本发明提供了一种肺癌相关分子标志物基因突变的crRNA、检测试剂盒与检测方法，所述crRNA包括：EGFR‑T790M突变位点的crRNA：如SEQ ID NO.16‑17任一所示；EGFR‑L858R突变位点的crRNA：如SEQ ID NO.18‑19任一所示；BRAF基因突变位点的crRNA：如SEQ ID NO.20‑21任一所示；ALK基因突变位点的crRNA：如SEQ ID NO.22‑23任一所示；ROS1基因突变位点的crRNA：如SEQ ID NO.24‑25任一所示。本发明设计与肺癌相关分子标志物基因突变靶点相关的5个crRNA，运用此crRNA结合CRISPR‑cpf1系统进行突变检测，此方法具有简单、速度快、灵敏度高、特异性强的特点。
本发明涉及生物技术技术领域，尤其是涉及一种GCK基因突变的Hela细胞模型及其构建方法和应用，其中，构建方法包括以下步骤：针对GCK基因需要突变的目的基因位点，设计gRNA靶点；根据gRNA靶点合成插入片段，并构建敲除质粒；将敲除质粒转染至Hela细胞，得到GCK基因突变的Hela细胞模型；其中，所述gRNA靶点的序列如SEQ ID No.1所示。经活性检测及测序鉴定得到的GCK基因突变的Hela细胞模型，为一稳定可靠的模型，可用于由GCK基因突变所致的单基因糖尿病的诊断和精确分型，进而实现个体化治疗，给予患者最优化治疗方案的基础，对于疾病进程、
