本发明公开了一种用于TRV介导的基因沉默系统中的指示基因，其核酸序列如SEQ ID No:1所示，还公开了含有该序列的病毒诱导沉默载体及其构建方法，并利用该沉默载体侵染柑橘幼苗的方法。本发明为TRV介导的病毒诱导基因沉默体系提供有效的指示基因，是首次在柑橘中成功建立TRV介导的病毒沉默系统，成功地沉默了柑橘中的指示基因。利用本发明的沉默载体构建的沉默系统操作简单、转化效率高、能够快速地在柑橘中对基因进行功能验证。能够有效地抑制柑橘中的内源基因表达，表型显著。本发明提供的沉默载体为快速、有效地在柑橘中进行基因功能验证提供了可靠技术。
本发明公开了一种基于CasRx的植物基因沉默载体及其构建方法和应用，涉及植物分子生物学领域中的定向基因沉默技术。本植物基因沉默载体是CasRx双元表达载体pHLW‑CasRx；其结构是35S驱动CasRx蛋白表达、AtU6‑26启动子驱动sgRNA表达；其系列是SEQ ID NO.1所示。本发明建立的基于CasRx的植物基因沉默载体能够快速简单特异地对植物基因进行高效的基因沉默，弥补了植物中基于CasRx的高效定向基因沉默系统，同时解决了RNAi技术诸多缺陷；本发明建立的植物基因沉默体系简单、快速、高特异性，能够快速高效高特异性的对植物靶标基因进行表达量敲低和RNA干扰。
本发明公开了一种基于VIGS的蓝色矢车菊花部基因沉默方法，属于生物技术领域。该方法是将CcANS基因特异性片段连接到VIGS沉默载体上得到重组载体，将重组载体转入矢车菊的花部；所述特异性片段为如SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列。本发明以CcANS构建的沉默载体，能够诱导矢车菊开花过程中花瓣内源CcANS基因发生沉默，有效降低矢车菊CcANS基因的表达水平，获得病毒诱导的基因沉默表型，能够验证矢车菊CcANS基因功能，在矢车菊的花色相关功能基因的研究中具有应用价值
本发明公开了一种真菌病毒诱导的基因沉默载体及其构建方法和应用，属于基因工程领域。该真菌病毒诱导的基因沉默载体的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，其构建方法包括(1)将真菌病毒FgGMTV1/HB58的3个单链环状DAN分子DNA‑A、DNA‑B和DNA‑C串联并导入同一载体，构建重组载体；(2)对所述重组载体中的DNA‑C分子的编码蛋白p26进行缺失突变，获取真菌病毒诱导的基因沉默载体。本发明构建通过缩短DNA‑A、DNA‑B和DNA‑C并串联后导入同一载体构建的基因沉默载体，经试验，结果显示该基因沉默载体可以有效控制小麦赤霉病，为小麦赤霉病的防控提供了新的方向。
