本发明提供了一种用于检测副溶血弧菌K抗原基因分型的引物组SEQ ID No.1~SEQ ID No.114,所述引物组是基于多重杂交连接反应的荧光探针熔解曲线技术,根据418株副溶血弧菌的全基因组进行生物信息学方法分析以及公共数据库中18株副溶血弧菌特异基因序列分析,获取并筛选了副溶血弧菌57种K抗原的特异基因和具体的基因区域,针对所得到的副溶血弧菌57种K抗原的特异基因进行设计得到的,保证所述引物组能够基于荧光探针熔解曲线法同时检测57种副溶血弧菌K抗原基因分型,提高了副溶血弧菌的抗原基因分型的检测时间和检测准确性。