本发明提供了一种产玉米黄质的解脂耶氏酵母基因工程菌的构建方法，其是将2个拷贝的优化的crtZ基因依次导入解脂耶氏酵母基因工程菌XK17中，获得解脂耶氏酵母基因工程菌MY1；再将HMG基因导入工程菌MY1，得到解脂耶氏酵母基因工程菌MY3；接着，将优化的HMG基因和优化的AtoB基因，整合到解脂耶氏酵母基因工程菌MY3中，得到解脂耶氏酵母基因工程菌HA，所述优化的crtZ基因、优化的HMG基因和优化的AtoB基因的核苷酸序列分别如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。采用该方法构建获得的解脂耶氏酵母基因工程菌HA可以提高玉米黄质的产量具有良好的应用前景。
本发明涉及基因工程领域重组蛋白的制备方法，具体是一种重组人酸性成纤维细胞生长因子蛋白的制备方法，其步骤为：①根据人酸性成纤维细胞生长因子haFGF全长序列设计引物克隆得到原始基因片段，并替换掉其中存在的大肠杆菌不利表达的密码子从而获得优化的haFGF基因，所述优化的haFGF基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；克隆得到分子伴侣PDI的原始基因片段，并替换掉其中存在的大肠杆菌不利表达的密码子从而得到优化的PDI基因，所述优化的PDI基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；②优化的haFGF基因、优化的PDI基因、标签序列以及蛋白酶切位点序列连接后克隆进入载体，构建得到高效表达载体；或是先构建上述部分序列的备用载体，然后将其余序列连接于部分序列上
本发明公开了优化的甘露聚糖酶基因及其重组植物表达载体和应用。本发明将甘露聚糖酶基因通过密码子优化以及提高mRNA二级结构稳定性等措施得到SEQ ID NO.1所示的优化甘露聚糖酶基因；本发明进一步构建了含有原始甘露聚糖酶基因或优化甘露聚糖酶基因的重组植物表达载体并将其转化到玉米中筛选得到种子中高效表达甘露聚糖酶的转甘露聚糖酶基因玉米植株；酶学性质测定表明，优化的甘露聚糖酶基因能在玉米中稳定、高效的表达及遗传，所表达的甘露聚糖酶酶活以及稳定性显著高于原始甘露聚糖基因在玉米中所表达的甘露聚糖酶的酶活及稳定性。
本发明公开了一种携带去优化M基因和两个G基因的重组狂犬病病毒。本发明首先将M基因阅读框部分进行去优化，优化后序列如SEQ ID NO.2所示。然后以狂犬病病毒HEP‑Flury株为骨架，将去优化后M基因替换HEP‑Flury中的M基因，再插入额外一个狂犬病毒的G基因，得到携带去优化M基因和两个G基因的重组狂犬病病毒pHEP‑dG‑M基因的转录都增高，有作为狂犬病疫苗候选株的潜力。
