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[发明专利]白细胞介素-31多克隆或单克隆抗体的制备方法及应用-CN201410686491.X在审
发明人：黄俊琼;孙万邦;魏培;郑静;曹雪梅;董革辉 -专利权人：遵义医学院附属医院
申请日： 2014-11-26 - 公布日： 2015-03-25 - 主分类号： C07K16/24 文献下载
摘要：本发明涉及一种白细胞介素-31多克隆或单克隆抗体的制备方法及应用，白细胞介素－31是近年发现的具有4个螺旋结构的多肽链，为Th2型细胞因子，具有调节细胞增殖分化、促进造血、参与炎症反应等多种生物学功能，白细胞介素-31多克隆抗体或单克隆抗体的制备方法分为以下几个步骤：大肠杆菌E.coli.BL21的培养及rhIL-31的诱导表达；免疫原制备；免疫原注射试验动物；提取抗体；IL-31多克隆或单克隆抗体特异性鉴定。IL-31多克隆或单克隆抗体的应用包括：ELISA检测方法及试剂和抗体外用治疗及皮肤保健应用。
白细胞 31 克隆单克隆抗体制备方法应用

[发明专利]一种用细胞系生产鸡传染性喉气管炎活疫苗的方法-CN201510788499.1在审
发明人：毛雅园;魏丽娟;刘毅;郭鸿志;杨国辉;王德功;周岩;谢艳芳;孔瑞岗;魏占勇;刘欣 -专利权人：河北远征药业有限公司
申请日： 2015-11-16 - 公布日： 2016-01-27 - 主分类号： A61K39/255 文献下载
摘要：一种用细胞系生产鸡传染性喉气管炎活疫苗的方法，选用细胞系代替鸡胚进行鸡传染性喉气管炎病毒液的增殖，经培养细胞系、克隆纯化、传代、培养、病毒株的克隆、培养、疫苗配制、收获制苗毒液、分装、冻干等工序制成。实验表明，本发明克隆方法仅通过3次克隆便可获得无细胞内杂质、透亮、圆润、轮廓清晰的细胞，而现有方法需要克隆7次，可见本方法缩短了克隆时长，并在克隆中具有高活性及高几率的克隆几率。
一种细胞系生产传染性气管炎疫苗方法

[发明专利]汉坦病毒S基因克隆、表达、单克隆抗体的制备方法及其应用-CN201710054599.0在审
发明人：蔡亮 -专利权人：蔡亮
申请日： 2017-01-24 - 公布日： 2017-05-10 - 主分类号： C12N15/40 文献下载
摘要：一种汉坦病毒S基因克隆、表达、单克隆抗体制备方法，包括设计扩增汉坦病毒S基因完整开放阅读框特异性引物，扩增汉坦病毒S基因；将扩增的汉坦病毒S基因克隆到pGM－T载体，转化Ecoli.TOP10感受态细胞，得到TA克隆阳性质粒，克隆到pGEX－6p－2原核表达载体，得到重组质粒pGEX－6P－2/S；将重组质粒pGEX－6P－2/S转化Ecoli.BL21菌体中，经IPTG诱导表达，得到包涵体；包涵体经溶解与复性得到重组蛋白；重组蛋白免疫Balb/c小鼠；小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，选择性培养；阳性克隆筛选；单克隆抗体制备、亚型鉴定及效价检测。同时提供一种汉坦病毒S基因单克隆抗体应用。
病毒基因克隆表达单克隆抗体制备方法及其应用

[发明专利]一种通路克隆入门载体的构建方法-CN201711138520.9在审
发明人：张可伟;张艳军;赵江哲;赵利;张梦园 -专利权人：浙江师范大学
申请日： 2017-11-16 - 公布日： 2018-02-16 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明涉及一种通路克隆入门载体的构建方法，包括引物设计、ICS1pro片段的扩增与纯化、pCR8片段的获得和pCR8‑ICS1pro质粒的构建。本发明利用通路克隆入门载体pCR8‑AtS5H来获得入门载体片段，而且该入门克隆可以保存和反复使用，因此实验过程中不需要购买昂贵的入门载体，同时该方法所用的其它试剂成本也非常低，从而大大降低了构建入门克隆的实验成本，并且非常省时，两天内即可完成入门克隆的构建和验证；本发明利用的一步SLIC技术是一种不依赖序列和连接的克隆方法，连接效率非常高，同时不受酶切位点限制，也不存在TA连接的非定向克隆问题，是一种非常值得推广的构建入门克隆的新方法
一种通路克隆入门载体构建方法

[发明专利]一种定量检测人几丁质酶3样蛋白1的化学发光试剂盒-CN202010775982.7在审
发明人：唐昊;缪瑜姗;仲彩铭;胡家勋;王伟 -专利权人：上海长征医院
申请日： 2020-08-05 - 公布日： 2020-11-20 - 主分类号： G01N33/577 文献下载
摘要：本发明涉及免疫分析领域，具体是一种定量检测人几丁质酶3样蛋白1(YKL‑40/CHI3L1)的化学发光试剂盒，包括包被有人YKL‑40单克隆抗体或人YKL‑40多克隆抗体的化学发光板，生物素标记的人YKL‑40单克隆抗体或人YKL‑40多克隆抗体，链霉亲和素标记的酶底物，以及酶促发光底物。本发明采用酶促化学发光法，利用化学发光板中的人YKL‑40单克隆抗体或人YKL‑40多克隆抗体作为捕获抗体，以生物素标记的人YKL‑40单克隆抗体或人YKL‑40多克隆抗体作为检测抗体，用酶底物为催化酶催化发光底物发光
一种定量检测几丁质蛋白化学发光试剂盒

[发明专利]检测痰液中免疫细胞的方法-CN202010508020.5在审
发明人：刘盼;林笑冬;王雷;张志强 -专利权人：北京卓诚惠生生物科技股份有限公司
申请日： 2020-06-05 - 公布日： 2020-09-22 - 主分类号： G01N15/14 文献下载
摘要：本公开涉及一种检测痰液中免疫细胞的方法，该方法包括如下步骤：a、将待测痰液样品进行预处理，得到单细胞混合物；b、将所述单细胞混合物与单克隆抗体混合液混合，得到单细胞‑抗体混合液，采用流式细胞术检测所述单细胞‑抗体混合液中的免疫细胞水平，即为所述待测痰液样品中的免疫细胞水平；其中，所述单克隆抗体混合液中含有抗CD45的单克隆抗体、抗CD66b的单克隆抗体、抗CD14的单克隆抗体、抗CD3的单克隆抗体、抗CD4的单克隆抗体和抗CD8的单克隆抗体。
检测痰液中免疫细胞方法

[发明专利]用于分析数据集的系统和方法-CN201880045660.8在审
发明人： A·Y·王;J·梅林;K·吴;P·雷夫金 -专利权人： 10X基因组学有限公司
申请日： 2018-05-18 - 公布日： 2020-03-06 - 主分类号： G16B30/00 文献下载
摘要：提供了用于分析数据集的系统和方法，其中获得表示多个克隆类型的数据集。所述数据集包含所述多个克隆类型中每个克隆类型的多个重叠群。针对每个相应克隆类型，确定表示所述相应克隆类型的所述多个重叠群的百分比、绝对数或比例。在显示器的第一部分上提供第一二维可视化。所述可视化的一条轴线代表单独克隆类型，并且另一条轴线代表表示所述相应克隆类型的所述多个重叠群的所述百分比、所述绝对数或所述比例。在所述第一可视化的同时，还显示所述多个克隆类型的列表。
用于分析数据系统方法

[发明专利]一种H9亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备方法-CN201911196419.8在审
发明人：单君忆;招沐;闫文龙;谢逸菲 -专利权人：扬州千代科技有限公司
申请日： 2019-11-29 - 公布日： 2021-06-01 - 主分类号： C07K16/10 文献下载
摘要：一种H9亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备方法。涉及单克隆抗体，尤其涉及一种H9亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备方法。提供了一种H9亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备方法。本发明使用基因免疫和杂交瘤技术成功研制抗H9亚型禽流感病毒的单克隆抗体,单克隆抗体是抗H9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的特异性单克隆抗体,具有较好的亚型特异性。本发明制得的针对禽流感H9亚型血凝素特异性的单克隆抗体为禽流感的诊断提供了高质量的试剂,其在进出口检疫,禽流感的检测监控上具有良好的推广和应用前景。
一种 h9 禽流感病毒单克隆抗体制备方法

[发明专利]一种杂交瘤细胞株及其应用-CN202011163297.5在审
发明人：杨金广;余艳璧;王凤龙;夏振远;黄坤;李莹;申莉莉;刘春明;蔺忠龙;谢永辉;张立猛;杨海林;王志江 -专利权人：中国农业科学院烟草研究所;云南省烟草农业科学研究院;云南省烟草公司红河州公司;云南省烟草公司昆明市公司;云南省烟草公司玉溪市公司
申请日： 2020-10-27 - 公布日： 2021-04-02 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明提出了一种杂交瘤细胞株及其应用，该杂交瘤细胞株可分泌番茄斑萎病毒的单克隆抗体，该单克隆抗体用于制备免疫金标速测卡，其方法如下，步骤1、对番茄斑萎病毒重组蛋白进行纯化，步骤2、将纯化的番茄斑萎病毒重组蛋白免疫兔，获得多克隆抗体，步骤3、将纯化的番茄斑萎病毒重组蛋白免疫小鼠，然后通过细胞融合、克隆化筛选制备得到该单克隆抗体，最后制备小鼠腹水，经过纯化得到鼠抗番茄斑萎病毒单克隆抗体，步骤4、通过配对筛选，得到配对的单克隆抗体和多克隆抗体用于所述免疫金标速测卡
一种杂交瘤细胞株及其应用

[发明专利]用于病毒载体生产的HEK293悬浮细胞系的开发方法-CN202211213168.1在审
发明人：胡迪超;华骏;张未萌;腾飞;王泱洲;丁树慧;张景森 -专利权人：苏州博腾生物制药有限公司
申请日： 2022-09-30 - 公布日： 2022-12-23 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：该方法包括以下步骤：将HEK293贴壁细胞以有限稀释法进行克隆筛选，获得180～250个细胞克隆；评估克隆筛选获得的细胞克隆的生长速率和病毒载体转染效率，筛选出15～25组待扩大培养的细胞克隆；将各组待扩大培养的细胞克隆分别扩大培养，并以生长速率和病毒载体转染效率筛选，获得5～13组作为悬浮驯化的优选克隆细胞；将各组优选克隆细胞分别进行悬浮驯化；及将经悬浮驯化的各组细胞分别取各自的一部分以病毒载体转染效率筛选，制备适宜于悬浮培养的
用于病毒载体生产 hek293 悬浮细胞系开发方法

[发明专利]一种端到端的音色及情感迁移的中文语音克隆方法-CN202210846358.0在审
发明人：刘丁玮;陈铧浚;毛爱华;刘江枫;郭勇彬;张柳坚 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2022-07-05 - 公布日： 2022-11-18 - 主分类号： G10L13/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种端到端的音色及情感迁移的中文语音克隆方法，步骤如下：采集用户录制的中文语音作为训练数据，提取出所需的语音特征；训练语音克隆合成模型，包括音色情感编码器、合成器和声码器三部分；利用训练完成的语音克隆合成模型，根据用户输入的语音或文字内容，生成语音克隆合成模型已有的指定说话人的语音；或根据用户输入的短时语音，快速克隆用户语音中的音色和情感。本发明实现端到端的语音合成与克隆，通过多说话人模型，以同一模型和不同说话人向量嵌入合成不同情感和音色的语音。本发明用短语音产生的说话人嵌入向量，结合使用较多语料训练的生成模型进行语音克隆，实现了能够体现特定说话人音色和情感的语音克隆。
一种端到端音色情感迁移中文语音克隆方法

[发明专利]一种快速筛选多倍体植物目的基因克隆产物的引物、方法-CN201410452747.0有效
发明人：陈发棣;赵楠;陈素梅;蒋甲福;张飞;廖园 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2014-09-05 - 公布日： 2018-08-28 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，提供一种快速筛选多倍体植物目的基因克隆产物的引物、方法及二者在菊花上的应用以及该引物在试剂盒上的应用。快速筛选目的基因克隆产物的方法包括：(1)引物设计(2)基因克隆扩增(3)检测引物筛选基因克隆产物，确定克隆产物对应的基因是否为目的基因。本发明解决了现有技术中，筛选菊花等多倍体植物目的基因克隆产物过程复杂、效率低下的问题。通过本发明提供的检测引物，每增加1bp长度，筛选目的基因的准确性即提高4倍。检测引物为复杂基因组基因的分子克隆提供思路，大大提高了基因克隆的效率。
一种快速筛选多倍体植物目的基因克隆产物引物方法

[发明专利]一种肿瘤复杂克隆结构的缺失变异识别及克隆计数方法-CN201811434921.3有效
发明人：耿彧;白涛;李纪文;许薇;佟力;田泽文 -专利权人：锦州医科大学
申请日： 2018-11-28 - 公布日： 2022-03-11 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明公开了一种肿瘤复杂克隆结构的缺失变异识别及克隆计数方法，首先运用缺失识别方法（如DELLY方法）确定与缺失突变相关的所有区域范围；然后针对每一个缺失区域，采用分段扩展和最长可变拆分读段的组合策略识别缺失断点，得到飘移缺失断点候选集合；接着根据断点对的数目区分飘移缺失与固定缺失，针对固定缺失，采用贪婪策略识别缺失周围混乱的单核苷酸变异位点并逐级分离各亚克隆所属的变异位点；最后获得克隆数目并依据克隆数目信息进一步优化飘移缺失识别结果本发明（项目编号20180550161、20180550855）不仅能够识别克隆演变中的飘移缺失突变，而且能够识别克隆分化引起的单核苷酸混乱变异情况，对克隆模式的研究提供了另一种检测途径。
一种肿瘤复杂克隆结构缺失变异识别计数方法

[发明专利]零背景克隆载体及其制备方法和应用-CN201410520443.3有效
发明人：邹爱兰;俞萍;李晓晨;孙克非 -专利权人：天根生化科技（北京）有限公司
申请日： 2014-09-30 - 公布日： 2017-04-26 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了制备零背景克隆载体的方法及应用。其中，制备零背景克隆载体的方法，包括以下步骤提供SEQ ID NO6所示的DNA片段；以pUC19质粒为模板，利用SEQ ID NO7‑8所示的引物进行第一PCR扩增，以便获得pUC19载体片段；将DNA片段与pUC19载体片段进行同源重组，以便获得载体骨架；将载体骨架转化感受态细胞并提取质粒，以便获得零背景克隆载体的前载体；以及采用EcoRV酶对零背景克隆载体的前载体进行酶切，以便得到零背景克隆载体。该方法获得的载体可直接用于平末端产物的连接，载体自连的背景低，克隆的阳性率高，无需蓝白筛选，能在短时间内实现快速有效的克隆，克隆效率高，效果好。
背景克隆载体及其制备方法应用

[发明专利]一种PRRSV广谱中和单克隆抗体及其应用-CN202010355075.7有效
发明人：南雨辰;张志刚;周恩民;武春燕 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2020-04-29 - 公布日： 2022-03-25 - 主分类号： C07K16/10 文献下载
摘要：经细胞融合，病毒感染Marc145细胞筛选克隆，获得高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，获得鼠单克隆抗体MAB‑GP3。用ELISA技术测定该单克隆抗体MAB‑GP3的亚型为IgG2b型单克隆抗体。PRRSV‑I型和PRRSV‑II型病毒感染Marc145细胞，利用IFA技术用该单克隆抗体进行检测，证明单克隆抗体MAB‑GP3对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒具有广谱反应性。随后用其进行病毒中和实验，利用Western blot技术和qPCR技术证明该单克隆抗体对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒都具有中和活性，可阻止病毒入侵，保护机体免受感染。
一种 prrsv 广谱中和单克隆抗体及其应用