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[发明专利]一种海鲈仔鱼细胞系的构建方法-CN202010197056.6在审
发明人：黄友华;黄晓红;秦启伟;魏京广;周胜 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2020-03-19 - 公布日： 2020-07-14 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供了一种海鲈仔鱼细胞系的构建方法，包括以下步骤：(1)原代培养：将海鲈仔鱼组织进行胰酶消化获得细胞悬浮液，加入原代细胞培养液培养原代细胞；(2)传代培养：传代1‑10代时，传代细胞培养液中的胎牛血清浓度为20％；传代11‑20代时，传代细胞培养液中的胎牛血清浓度为15％；传代20代以后，传代细胞培养液中的胎牛血清浓度为10％；(3)收集传代细胞，获得所述海鲈仔鱼细胞系。通过本发明的构建方法获得的海鲈仔鱼细胞系生长状态良好，细胞增殖稳定不仅可以连续传代，并可超低温冻存和复苏，可用于外源基因表达以及病毒感染分离等研究。
一种海鲈仔鱼细胞系构建方法

[发明专利]由消化道来源上皮细胞重编程获得的内胚层干/祖细胞的传代方法及应用-CN202110032459.X有效
发明人：王韫芳;王术勇;张文成;覃金华;王璇;常铭洋;闫舫;裴雪涛 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所
申请日： 2017-05-27 - 公布日： 2022-06-28 - 主分类号： C12N5/0735 文献下载
摘要：本发明公开了一种由消化道来源上皮细胞重编程获得的内胚层干/祖细胞的传代方法及应用，其中提供的传代方法是将由消化道来源上皮细胞重编程获得的内胚层干/祖细胞以胃肌成纤维细胞、Fibronectin或Cell‑TAK为细胞外基质在传代培养基中进行传代，可获得大规模传代培养且良好生长并维持原始克隆状态的传代内胚层干/祖细胞。获得的传代内胚层干/祖细胞可用于向肝脏细胞、胰腺β细胞和肠细胞方向诱导分化。
消化道来源上皮细胞编程获得胚层细胞传代方法应用

[发明专利]一种鳜鱼脑细胞克隆细胞株的构建方法-CN202211064673.4在审
发明人：穆光慧;陈坚;张东卓;魏京广;江梦雅;涂玉蓉;秦启伟;林德锐;杨傲冰;赖月辉 -专利权人：广东永顺生物制药股份有限公司;华南农业大学
申请日： 2022-09-01 - 公布日： 2023-04-11 - 主分类号： C12N5/079 文献下载
摘要：本发明公开了一种鳜鱼脑细胞克隆细胞株的构建方法。本发明利用M199培养基对翘嘴鳜脑组织进行原代培养，若干次传代后成功构建了鳜鱼脑传代细胞系，然后使用L15克隆营养液进行稀释培养，稀释培养后各孔单细胞培养成细胞群落后进行传代培养，传代过程均能维持良好的生长状态，细胞形态基本一致。经单细胞克隆后筛选得到的鳜脑克隆传代细胞株可传代50代以上，原始细胞库、基础细胞库和工作细胞库冻存的细胞经复苏均可正常传代。而且构建得到鳜脑克隆传代细胞株对SGIV、SKIV、LMBV、ISKNV、MSRV等多种水产病毒敏感，可以为水产病毒的分离、鉴定、培养和疫苗研究提供较好的细胞平台。而且本构建方法简便，重复性高。
一种鳜鱼脑细胞克隆细胞株构建方法

[发明专利]一种用于传代干细胞的无动物源传代方法-CN202110048348.8在审
发明人：康悦;赵峰 -专利权人：辽宁省肿瘤医院
申请日： 2021-01-14 - 公布日： 2021-04-20 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明属于生物医药技术领域，涉及一种用于传代干细胞的无动物源传代方法，具体涉及一种临床级干细胞无动物源成分消化液、消化终止液的制备及干细胞无动物源传代方法。一种用于传代临床级干细胞的无动物源传代方法包括以下步骤：提取人羊膜、脐带间充质干细胞，常规培养至第三代，进行细胞鉴定；将第三代人羊膜、脐带间充质干细胞接种于75cm2培养瓶中培养，待汇合度达到80‑90%；应用无动物源成分消化液、消化终止液将人羊膜、脐带间充质干细胞传代。本发明提供的用于传代干细胞的无动物源传代方法，既符合无动物源成分标准，又能有效消化干细胞至单细胞形态，进而均匀接种干细胞，达到最佳培养状态。
一种用于传代干细胞动物方法

[发明专利]细胞观察信息处理系统、细胞观察信息处理方法-CN201580026525.5有效
发明人：伊贺靖展;泷本真一;谷川洋平 -专利权人：奥林巴斯株式会社
申请日： 2015-03-20 - 公布日： 2020-02-07 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本发明提供细胞观察信息处理系统，能够防止用户对传代数的输入错误，该传代数是应该对细胞等的观察信息赋予的标签之一。细胞观察信息处理系统具有：传代有无信息取得/生成部(11a)，其取得或生成包含第1～第n‑1传代有无值中的至少一个以上的传代有无值的过去传代有无信息，该第1～第n‑1传代有无值表示通过观察信息取得部(20)按照时间序列取得第1～第n观察信息的第1～第n观察时刻中的第1～第n‑1观察时刻的针对细胞的作业是否是传代作业，所述第1～第n观察信息表示细胞的观察结果，该观察结果包含细胞图像、和细胞数/细胞密度/形状/生存率等活性度数据、以及观察名称等，其中，n为2以上的整数；以及传代数取得/生成部(11b)，其根据由传代有无信息取得/生成部取得或生成的过去传代有无信息，自动或借助用户的操作取得或生成至少第n观察时刻的第n传代数。
细胞观察信息处理系统方法

[发明专利]生物医学实验设备-CN201811319963.2在审
发明人：张晗;康建龙 -专利权人：深圳大学
申请日： 2018-11-07 - 公布日： 2019-03-08 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本发明提供一种生物医学实验设备，包括主平台、传代组件、铺板组件、加药组件和光照组件，主平台上设有多个工作区域，传代组件、铺板组件、加药组件和光照组件分别设于主平台上或主平台两侧，并分别在多个工作区域工作，传代组件对细胞瓶内的细胞液进行传代，传代后的细胞液经铺板组件铺板至细胞孔板，细胞孔板依次在多个工作区域移动，加药组件对细胞孔板加药，光照组件对细胞孔板施加光照，得到细胞孔板内的细胞的实验数据。通过设置传代组件、铺板组件、加药组件和光照组件，在多个工作区域分别对细胞瓶和细胞孔板进行动作，实现细胞的传代、铺板、加药和光照的实验过程，将手工操作的不可控性降低，提高了实验结果的信赖度。
传代铺板孔板细胞工作区域光照组件加药组件主平台生物医学实验细胞瓶细胞液加药光照实验过程实验数据信赖度控性施加移动

[实用新型]生物医学实验设备-CN201821833200.5有效
发明人：张晗;康建龙 -专利权人：深圳大学
申请日： 2018-11-07 - 公布日： 2019-10-18 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型提供一种生物医学实验设备，包括主平台、传代组件、铺板组件、加药组件和光照组件，主平台上设有多个工作区域，传代组件、铺板组件、加药组件和光照组件分别设于主平台上或主平台两侧，并分别在多个工作区域工作，传代组件对细胞瓶内的细胞液进行传代，传代后的细胞液经铺板组件铺板至细胞孔板，细胞孔板依次在多个工作区域移动，加药组件对细胞孔板加药，光照组件对细胞孔板施加光照，得到细胞孔板内的细胞的实验数据。通过设置传代组件、铺板组件、加药组件和光照组件，在多个工作区域分别对细胞瓶和细胞孔板进行动作，实现细胞的传代、铺板、加药和光照的实验过程，将手工操作的不可控性降低，提高了实验结果的信赖度。
传代铺板孔板细胞工作区域光照组件加药组件主平台生物医学实验细胞瓶细胞液加药光照本实用新型实验过程实验数据信赖度控性施加移动

[发明专利]可传代培养的羊睾丸传代细胞及其传代驯化培养方法及专用培养体系与应用-CN201710208123.8有效
发明人：路荣;刘国英;范秀丽;张燕红;高艳华 -专利权人：金宇保灵生物药品有限公司
申请日： 2017-03-31 - 公布日： 2021-03-19 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了可传代培养的羊睾丸细胞及其传代驯化培养方法及专用培养体系与应用，提供了一株可传代培养的羊睾丸传代细胞LT‑1(CGMCC No.12988)以及驯化培养获得该细胞的方法。本发明采用优化的细胞培养液对羊睾丸原代细胞(LT)进行传代驯化培养，可使羊睾丸原代细胞增加传代次数，适于批量生产；并利用该细胞对羊口疮病毒进行增殖培养，结果显示，羊口疮病毒能连续传代培养3代，均能产生明显的病变
传代培养睾丸细胞及其驯化方法专用体系应用

[发明专利]无血清培养基在分离和传代脂肪间充质干细胞中的用途-CN202011568942.1有效
发明人：王正;刘冰;肖海蓉;汤乐 -专利权人：博雅干细胞科技有限公司
申请日： 2020-12-25 - 公布日： 2023-03-21 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及无血清培养基在分离和传代脂肪间充质干细胞中的用途。具体涉及分离和传代培养脂肪间充质干细胞的方法，其包括(a)分离培养原代脂肪间充质干细胞和(b)传代培养脂肪间充质干细胞两个阶段，(b)阶段是将原代间充质干细胞接种，补充传代完全培养基培养，用D‑hanks液清洗，加重组胰酶溶液消化，得到P1代间充质干细胞；接着将P1代间充质干细胞接种参照P1传代培养方法，得到P2代间充质干细胞，继续传代至P10代，得到各代次的间充质干细胞。本发明使用无血清培养基分离培养和传代培养脂肪间充质干细胞的方法呈现优异的技术效果，例如细胞收率高、细胞活率高。
血清培养基分离传代脂肪间充质干细胞中的用途

[发明专利]一株猪DC细胞的传代细胞系及其建立方法与应用-CN202110447893.4在审
发明人：王钦富;刘欢;柏显昌;张正韬;王美辰;胡琳珑 -专利权人：大连大学
申请日： 2021-04-25 - 公布日： 2021-07-30 - 主分类号： C12N5/0784 文献下载
摘要：本发明属于生物免疫学领域，具体涉及一株猪DC细胞的传代细胞系及其建立方法与应用，本发明利用猪血液中的单核细胞分化成树突状细胞，在传代过程中发现一细胞集落，经反复传代后，建成一猪树突状细胞系。通过研究传代细胞的生长、表面标志、吞噬和抗原递呈作用，发现其细胞系具有树突状细胞特性，并具有很好的刺激T细胞增殖、细胞因子分泌和激发CTL细胞毒作用。
一株猪 dc 细胞传代细胞系及其建立方法应用

[发明专利]一种基于三维微载体细胞培养的原位传代方法-CN201910505614.8在审
发明人：鄢晓君;刘伟;张昆 -专利权人：北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2019-06-12 - 公布日： 2019-09-13 - 主分类号： C12N5/07 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于三维微载体细胞培养的原位传代方法。本发明提供了基于三维微载体细胞培养的原位传代方法，包括如下步骤：将种子微载体接入新的微载体；所述种子微载体为培养有待传代细胞的微载体。本发明方法避免了传统二维细胞的消化传代，既可减少消化液对细胞的损伤，又可省去消化传代等繁琐的操作过程，因此在大规模培养扩增时会节省相当的人力物力，并且可获取高质量细胞。节省时间，细胞消化下来再接种到需要时间操作，而此传代方式会省去操作时间。选择原位传代，不需要用到消化液等试剂耗材，精简过程、降低成本。
传代微载体体细胞培养三维消化液细胞大规模培养消化操作过程传代细胞人力物力时间操作细胞消化二维耗材扩增接种损伤

[发明专利]一种全悬浮无血清MDCK细胞扩繁传代的优化方法-CN201911152960.9在审
发明人：陈瑞爱;方倪冉;赖汉漳;温良海;叶俊贤;闫圆圆 -专利权人：华农（肇庆）生物产业技术研究院有限公司
申请日： 2019-11-22 - 公布日： 2021-05-25 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明属于微生物工程技术领域，具体涉及一种全悬浮无血清MDCK细胞扩繁传代的优化方法，本发明将MDCK‑sus细胞扩繁传代，然后于MDCK细胞无血清培养基中进行全悬浮无血清培养并扩繁传代，最后分瓶培养，通过优化MDCK‑sus细胞的接种密度和细胞传代时间点，优化全悬浮无血清MDCK细胞扩繁传代的方法，为后续生产高质量、高滴度的H9N2亚型禽流感病毒奠定基础。
一种悬浮血清 mdck 细胞传代优化方法

[发明专利]一种利用DF1传代细胞生产伪狂犬病活疫苗的方法及其制品-CN201410515820.4在审
发明人：吴文福;林旭埜;张毓金;任向阳;赖月辉;黄秋雪;牛晓芸 -专利权人：广东永顺生物制药股份有限公司
申请日： 2014-09-30 - 公布日： 2016-04-27 - 主分类号： A61K39/245 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用DF1传代细胞生产伪狂犬病活疫苗的方法及其制品。该方法包括如下步骤：用DF1传代细胞培养伪狂犬病病毒弱毒株；收获得到的细胞培养毒液；再加入稳定剂和抗菌素，经冷冻真空干燥得到伪狂犬病DF1细胞活疫苗。本发明利用DF1传代细胞培养伪狂犬病病毒弱毒，因DF1传代细胞是异源传代细胞，可避免同源细胞带未知猪源微生物的可能，更能保证疫苗的纯净。
一种利用 df1 传代细胞生产狂犬病疫苗方法及其制品

[发明专利]一种用传代细胞源生产伪狂犬病活疫苗的方法及其制品-CN200910193313.2有效
发明人：林旭野;吴文福;张毓金;岑小清;游启有;任向阳;廖润科;周泽标;张木辉;司徒剑谋 -专利权人：广东永顺生物制药有限公司
申请日： 2009-10-26 - 公布日： 2010-04-21 - 主分类号： A61K39/245 文献下载
摘要：本发明提供了一种用传代细胞源生产伪狂犬病活疫苗的方法及其伪狂犬病活疫苗产品。该方法包括如下步骤：用传代细胞培养伪狂犬病病毒弱毒株；收获得到的细胞培养毒液；再加入稳定剂和抗生素，经冷冻真空干燥得到传代细胞源伪狂犬病活疫苗。传代细胞为猪睾丸传代细胞ST、猪肾传代细胞PK15或IBRS-2。本发明用传代细胞源生产伪狂犬病活疫苗的方法具有生产工艺简单且稳定、易操作、病毒含量高、批间差异小、质量易控、可显著提高疫苗产量和质量、减少过敏反应等优点。
一种传代细胞生产狂犬病疫苗方法及其制品

[发明专利]一种多能干细胞的传代方法-CN202210190050.5有效
发明人：宋芸娟;蒋斌;温斌 -专利权人：深圳市旷逸生物科技有限公司
申请日： 2022-02-28 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： C12N5/0735 文献下载
摘要：本发明公开了一种多能干细胞的传代方法该方法包括传代工具和配制的解离液；传代工具包括精密弹簧，滚轴，镊子，且精密弹簧套设在滚轴上，滚轴表面设有卡槽可以被固定在镊子尖端通过压缩弹簧调节弹簧丝间距，将组件灭菌后可以用于多能干细胞传代，传代时握住镊子推滚精密弹簧，利用精密弹簧丝切割多能干细胞集落，将其切割成大小均匀的小片，然后添加解离液使切割后的多能干细胞片容易被移液洗脱收集，进而完成多能干细胞的传代扩增。本发明方法简单可靠，通用易行，成本低廉，整合了已有方法的各种优点，并且无需酶和钙离子螯合剂消化，不会破坏多能干细胞的细胞外基质，可以高效的进行多能干细胞传代。
一种多能干细胞传代方法

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