本发明公开了一种神经坏死病毒石斑鱼口服疫苗及其制备方法。所述神经坏死病毒石斑鱼口服疫苗的抗原的氨基酸序列如SEQ ID No：1所示。制备方法为：1)重组质粒的构建：合成核苷酸序列如SEQ ID No：1所示的融合基因，将融合基因插入表达载体中获得重组载体，将重组载体转化入原核表达菌，进行培养，筛选出转化成功的原核表达菌；2)将转化成功的原核表达菌诱导表达；3)用诱导表达的原核表达菌饲喂孵化后的卤虫，富集和包裹原核表达菌的卤虫，获得神经坏死病毒感染石斑鱼的药物。本发明的神经坏死病毒石斑鱼口服疫苗，保护率高，对石斑鱼的免疫保护效率达100％。本发明可应用于石斑鱼养殖过程中神经坏死病毒病的防控。
本发明公开了一种石斑鱼白介素15及其制备方法和用途。所述的石斑鱼白介素15的氨基酸序列如SEQ ID No：1所示。合成核苷酸序列如SEQ ID No：2所示的基因，将基因插入表达载体中获得重组载体，将重组载体转化入原核表达菌，进行培养，筛选出转化成功的原核表达菌；将转化成功的原核表达菌诱导表达；用诱导表达的蛋白进行纯化，获得石斑鱼白介素15的重组蛋白。将EcIL‑15L蛋白与SGIV亚单位疫苗对石斑鱼进行SGIV免疫保护效果评价，结果发现，EcIL‑15L蛋白作为细胞因子佐剂可以提高SGIV亚单位疫苗诱导的MCP特异的抗体反应，提高免疫相关基因的表达，对SGIV亚单位疫苗的免疫保护效率提升效率达81.5％。本发明可应用于石斑鱼养殖过程中SGIV病毒病的防控。
本发明提供一种赤点斑石斑鱼神经坏死病毒RGNNV检测试剂盒及其检测方法，包括RGNNV引物组，所述引物组包括正向引物和反向引物，正向引物序列如SEQ ID NO.1所示，反向引物序列如SEQ ID NO.2所示；还包括在正向引物前段加上T7启动子序列，所述T7启动子序列如SEQ ID NO.3所示，得到添加了T7启动子序列的正向引物序列如SEQ ID NO.4所示。本发明检测方法，包括以下步骤：S1.RGNNV病毒RNA的提取、病毒RNA逆转录、核酸扩增、体外转录；S2.CRISPR‑Cas13a检测体系的建立；S3.将待测样品RNA添加到步骤S2得到的混合物中；S4.检测荧光值。本发明检测方法特异性好、灵敏度高、重复性好,准确度高,可快速地检测RGNNV检测成本低,具有较高的应用价值和推广前景。
