本发明公开重组菌丝霉素的制备及其应用,按毕赤酵母偏爱密码子设计的菌丝霉素基因具有序列表SEQ ID NO.1所示核苷酸序列,构建重组表达载体pPICPlectasin和基因工程菌毕赤酵母X33pPICPlectasin经高密度发酵,上清中总蛋白浓度达到729μg/mL,上清透析冻干依次进行凝胶过滤层析和反相高效液相色谱,获得高纯度重组菌丝霉素,重组菌丝霉素无溶血性,具有较好的pH稳定性、热稳定性和抗胃蛋白酶活性,可以有效抑制革兰氏阳性菌肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的生长,可用于治疗或预防革兰氏阳性菌尤其是链球菌,具有潜在的抗菌药物开发价值。