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[发明专利]用于肺癌的生物标记物、相关的方法和试剂盒-CN201580009282.4有效
发明人：奥尔多·平托;瑞塔·帕特里齐亚·阿基诺;罗莎琳达·索伦蒂诺;米凯拉·泰尔利齐 -专利权人：免疫制药股份责任有限公司
申请日： 2015-02-19 - 公布日： 2019-07-02 - 主分类号： G01N33/574 文献下载
摘要：本发明涉及活性形式的人源半胱天冬酶蛋白，优选地为人源半胱天冬酶‑4或半胱天冬酶‑1，或者由人源半胱天冬酶蛋白的同源基因(优选地为人源半胱天冬酶‑4(例如鼠源半胱天冬酶‑11蛋白)的同源基因)编码的活性形式的蛋白质在诊断和
用于肺癌生物标记相关方法试剂盒

[发明专利]一种人源尿酸酶基因及其克隆表达方法与人源尿酸酶的应用-CN202310736039.9在审
发明人：杨登峰;潘丽霞;阳丽艳;李红亮;李娟 -专利权人：广西佰尔法生物工程有限责任公司
申请日： 2023-06-21 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12N9/06 文献下载
摘要：本发明提供了一种人源尿酸酶基因及其克隆表达方法与人源尿酸酶的应用，涉及基因工程技术领域，所述人源尿酸酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述人源尿酸酶基因的克隆表达方法，包括以下步骤：将所述的人源尿酸酶基因制备重组质粒pET32a‑Uricase；转化至宿主菌中获得重组表达菌株pET32a‑Uricase‑E.coliBL21(DE3)codonplusRIL；培养，然后诱导表达；收集诱导表达菌体，超声破碎，收集上清，即得到人源尿酸酶溶液本发明所述人源尿酸酶基因表达的尿酸酶保留了哺乳动物来源尿酸酶的活性，降低了人体适用的免疫活性，更适用于高尿酸血症等病症引起的痛风治疗。
一种尿酸酶基因及其克隆表达方法应用

[发明专利]一种酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽及其制备方法-CN202011532276.6在审
发明人：李志成;高佩佩;李瑞霞 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2020-12-14 - 公布日： 2022-06-14 - 主分类号： C07K14/47 文献下载
摘要：本发明公开了酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽的制备方法，采用胰蛋白酶将牛乳酪蛋白酶解，酶解物经过大孔非极性树脂分离及脱盐，再经过半制备凝胶色谱仪纯化，冷冻干燥，即加工成酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽粉，经申请人进行的胰脂肪酶抑制功能试实验结果表明，制得的该酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽对胰脂肪酶活性具有较高的抑制率，酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽一级结构明确，分子量均小于3000，易于吸收利用。酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽对于促进人类健康以及其在减肥功能食品方面的应用将具有重要且长远的意义。
一种蛋白脂肪酶抑制及其制备方法

[发明专利]一种生产5-羟色胺的基因工程菌及其构建方法与应用-CN202310722800.3在审
发明人：徐庆阳;刘韪玮;余子辰;李旭;陈志超;张震 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2023-06-19 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了一种生产5‑羟色胺的基因工程菌及其构建方法与应用，利用代谢工程手段引入外源相关基因表达，并对关键酶进行密码子优化。具体为：敲除色氨酸酶tnaA；过表达芳香族氨基酸转运蛋白yddG；构建外源5‑羟色胺合成途径包括色氨酸羟化途径(人源色氨酸羟化酶变体TM2)、色氨酸脱羧途径(黑曲霉来源色氨酸脱羧酶TDC)和辅酶四氢喋呤的合成再生途径(枯草芽孢杆菌来源GTP环化水解酶ⅠmtrA、人源6‑丙酮酰四氢生物蝶呤合成酶PTPS、人源鸟蝶呤还原酶SPR、人源蝶呤‑4α‑甲醇氨脱水酶PCD、人源双氢喋呤还原酶DHPR)，该菌株可高效催化色氨酸生成
一种生产羟色胺基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种蛋清源凝血酶抑制肽的纯化方法-CN201110139327.3无效
发明人：刘静波;王菲 -专利权人：吉林大学
申请日： 2011-05-27 - 公布日： 2011-11-02 - 主分类号： C07K14/81 文献下载
摘要：本发明属于保健食品开发领域，涉及蛋清源凝血酶抑制肽的纯化方法，尤其涉及利用凝胶柱色谱和半制备高效液相色谱法联用对蛋清源凝血酶抑制肽进行纯化。采用凝胶柱色谱和半制备高效液相色谱联用技术，可得到高纯度和高活性的蛋清源凝血酶抑制肽。测得蛋清源凝血酶抑制肽对凝血酶的抑制率达到63％。本发明研究目的物为食源性蛋清源凝血酶抑制肽，提高产品安全性、降低成本、节省资源。
一种蛋清凝血酶抑制纯化方法

[发明专利]一种玉米源单体肽在作为酪氨酸酶抑制剂中的应用-CN201810551636.3在审
发明人：徐力;郭轶;李娜;徐婉琦 -专利权人：吉林大学
申请日： 2018-05-31 - 公布日： 2018-08-10 - 主分类号： A61K38/07 文献下载
摘要：一种玉米源单体肽在作为酪氨酸酶抑制剂中的应用，属于化妆品技术领域。该玉米源单体肽酪氨酸酶抑制剂的肽链结构为Leu‑Asp‑Tyr‑Glu，其在酪氨酸酶抑制上有显著效果。本发明技术利用Autodock软件对玉米源单体肽与酪氨酸酶的结合方式进行研究，借助酶标仪等方法，进行检测玉米源单体肽对酪氨酸酶抑制情况，借助B16‑F10细胞，证明其具有抑制细胞内酪氨酸酶的活性且没有毒性，细胞抗氧化试验证明该玉米源单体肽还具有抗氧化的能力。单酚酶活性测试证明此玉米源单体肽酪氨酸酶抑制剂对酪氨酸酶活性抑制效果是熊果苷的1.25倍，因此本发明制备的酪氨酸酶受抑制的活性显著，可以用于美白、祛斑、抗衰老等领域。
单体肽酪氨酸酶酪氨酸酶抑制剂玉米抗氧化细胞化妆品技术领域酪氨酸酶活性技术利用结合方式肽链结构抗衰老酶标仪酶活性熊果苷单酚美白制备祛斑应用测试检测试验研究

[发明专利]用于改善酒精发酵的异源蛋白酶表达-CN201880009047.0在审
发明人：特丽莎·巴雷特;查尔斯·F·里瑟;阿龙·阿吉罗斯 -专利权人：拉勒曼德匈牙利流动性管理有限责任公司
申请日： 2018-02-01 - 公布日： 2019-09-13 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本公开涉及用于改善酒精发酵的蛋白酶。蛋白酶由重组宿主细胞表达。本公开还提供了表达异源蛋白酶的重组宿主细胞的群体，其可以与表达异源葡糖淀粉酶和/或异源甘油还原系统的重组宿主细胞组合使用。
重组宿主细胞蛋白酶异源蛋白酶酒精发酵异源葡糖淀粉酶还原系统甘油群体

[发明专利]外源蛋白酶在提高腐乳品质中的应用-CN201710638768.5在审
发明人：韩北忠;刘晶晶;陈晶瑜;喻世哲 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2017-07-31 - 公布日： 2017-11-07 - 主分类号： A23C20/02 文献下载
摘要：本发明公开了外源蛋白酶在提高腐乳品质中的应用。本发明通过对在腐乳后酵阶段添加木瓜蛋白酶或皱胃酶的处理组与不加酶的对照组的pH、水分、总酸、氨基态氮、硬度和感官品质进行测定，评定外源蛋白酶的添加对腐乳成熟的影响。结果表明，在腐乳后酵过程中外源蛋白酶添加组的pH在第25d后均高于空白组；4％的木瓜蛋白酶、2％和4％的皱胃酶的添加可以使腐乳的氨基态氮含量显著增加；4％的木瓜蛋白酶和4％的皱胃酶的添加能够明显降低腐乳硬度；而且外源蛋白酶的添加还能改善腐乳的口感和内部颜色，提高香味和鲜味。本发明了解并研究了外源蛋白酶的添加对腐乳品质的影响，对酶促腐乳的工业化生产具有一定的指导意义。
蛋白酶提高腐乳品质中的应用

[发明专利]农药残留检测用酶源及其应用-CN201710717490.0在审
发明人：付会兵;古瑞琴;陈凌飞;钟克创;刘红霞;张书成;于兰天;张杰强 -专利权人：郑州炜盛电子科技有限公司
申请日： 2017-08-21 - 公布日： 2018-03-02 - 主分类号： C12N9/18 文献下载
摘要：本发明提供了一种农药残留检测用酶源及其应用，该酶源包括均匀混合的生物酶、酶活性促进剂、磷酸盐缓冲溶液和表面活性剂，其中，所述生物酶为丁酰胆碱酯酶、乙酰胆碱酯酶或植物酯酶，所述酶活性促进剂为可溶性镁盐、可溶性锌盐所述农药残留检测用酶源用于有机磷和氨基甲酸酯类农药残留检测可以有效提高检测的精确度，扩大检测范围。
农药残留检测用酶源及其应用

[发明专利]鳀鱼蛋白粉的制备方法-CN200910099326.3无效
发明人：马永钧;秦乾安;高志中;周小敏;欧远 -专利权人：浙江兴业集团有限公司;舟山瑞洋水产品研发有限公司
申请日： 2009-06-01 - 公布日： 2010-12-01 - 主分类号： A23J1/04 文献下载
摘要：本发明提供的鳀鱼蛋白粉的制备方法，先将鳀鱼清理后粉碎得鱼糜，再将鱼糜进行加外源酶水解，水解后对得物进行灭酶、去渣、脱脂，最后干燥得蛋白质粉，其中在加外源酶水解前先作内源酶水解，内源酶水解的步骤是：(1)将鱼糜加水并升温到50～55℃，(2)加入水溶性钙盐并调节酶解液pH值至6.5～8.5，保温3hr以内结束内源酶水解。与现有技术相比，本发明中整个水解过程通过充分而适度地利用鳀鱼内源酶特别是蛋白酶分解鳀鱼组织蛋白，结合加入外源酶达到对鳀鱼蛋白的深度酶解，以获得纯度高、腥味少、无苦味的鳀鱼蛋白粉。同时由于充分利用了内源酶，使外源酶消耗大大降低；采用内酶水解后不需要再进行脱苦操作，降低了成本。
蛋白粉制备方法

[发明专利]一种实现人源精氨酸酶-1在大肠杆菌表面展示的方法-CN201610218512.4在审
发明人：张贞;马立新;卞璐;唐荣兴 -专利权人：湖北大学
申请日： 2016-04-11 - 公布日： 2016-08-24 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明提出了一种实现人源精氨酸酶‑1在大肠杆菌表面展示的方法。步骤为：1)构建人源精氨酸酶‑1表面展示重组质粒；2)将重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞，获得基因工程菌株；3)将重组菌株摇瓶培养，检测人源精氨酸酶‑1展示效率和酶活；4)利用重组菌株高效转化L‑Arginine本发明通过改进的Type V自转运蛋白(Antigen 43)实现人源精氨酸酶‑1在大肠杆菌细胞表面有效展示，加速实现了人源精氨酸酶‑1工业化应用。与原始的Type V自转运蛋白(Antigen 43)展示系统相比，明显提高人源精氨酸酶‑1展示效率和酶活，与现有几丁质固定化法相比，降低合成成本，缩短工艺流程，简化纯化步骤。
一种实现精氨酸大肠杆菌表面展示方法

[发明专利]测定人骨源性碱性磷酸酶含量的磁微粒化学发光检测试剂盒-CN202111084938.2在审
发明人：吴同超;李冉;魏英英;王纳贤 -专利权人：北京利德曼生化股份有限公司
申请日： 2021-09-16 - 公布日： 2021-12-17 - 主分类号： G01N33/573 文献下载
摘要：本发明为测定人骨源性碱性磷酸酶含量的磁微粒化学发光检测试剂盒，包括：R1试剂、磁分离试剂、校准品、质控品系列和化学发光底物液；所述R1试剂中包含肝源性碱性磷酸酶单克隆抗体和标记物标记的骨源性碱性磷酸酶单克隆抗体本发明通过在R1试剂的缓冲液中添加了抗肝源性碱性磷酸酶的单克隆抗体，可以封闭肝源性碱性磷酸酶的抗原表位，最大限度的避免了肝源性碱性磷酸酶导致的交叉反应，提高了检测的准确性和特异性。
测定人骨源性碱性磷酸酶含量微粒化学发光检测试剂盒

[发明专利]Fab抗体与小牛肠碱性磷酸酶的融合蛋白及其制备方法-CN202111042242.3有效
发明人：郭清红;田翀;任俊英 -专利权人：金标优尼科（无锡）生物科技有限公司
申请日： 2021-09-07 - 公布日： 2023-04-11 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及Fab抗体与小牛肠碱性磷酸酶的融合蛋白，所述融合蛋白由目标抗体的Fab片段和小牛肠碱性磷酸酶由连接肽链接构成，编码小牛肠碱性磷酸酶的核苷酸序列如SEQ IDNO.6所示，其中目标抗体可选自人源抗体，鼠源抗体，羊源抗体，兔源抗体，马源抗体，鸡源抗体或嵌合抗体。本发明将Fab抗体与小牛肠碱性磷酸酶在哺乳动物细胞中融合表达，既能克服化学标记方法的各种缺陷，又可获取高比活酶标抗体。所制备的融合蛋白可应用于免疫诊断领域，如化学发光免疫法，酶联免疫吸附法或酶促荧光免疫法等。
fab 抗体小牛碱性磷酸酶融合蛋白及其制备方法

[发明专利]牙源性上皮细胞的培养和扩增方法-CN201010567273.6有效
发明人：郭维华;田卫东;孔子任;郭永文;葛雅能 -专利权人：四川大学
申请日： 2010-12-01 - 公布日： 2011-04-06 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种牙源性上皮细胞培养和扩增方法，属于细胞培养技术领域。本发明的牙源性上皮细胞培养和扩增方法包括原代上皮细胞的获取和培养、上皮细胞的扩增，其中原代培养包括用分散酶、Ⅰ型胶原酶和DNA酶组成的混合酶消化液对牙源性乳糜状组织进行消化、收集细胞后进行培养，所述混合酶包括分散酶、Ⅰ型胶原酶和DNA酶，传代培养包括用细胞刮刀刮除法结合0.025%-0.25%胰蛋白酶消化法消化细胞、用培养基重悬细胞后进行培养。以此方法传代2-3次，即得到大量纯化的牙源性上皮细胞，经上皮细胞表达标志物CK14鉴定为上皮细胞。本发明克服了牙源性上皮细胞难培养的问题，得到了大量稳定纯化的牙源性上皮细胞，为牙齿发育和再生研究提供了上皮细胞来源。
牙源性上皮细胞培养扩增方法

[发明专利]一种通过表面展示实现人源精氨酸酶‑1固定化的方法-CN201610097606.0有效
发明人：马立新;张贞;王亚平;唐荣兴 -专利权人：湖北大学
申请日： 2016-02-22 - 公布日： 2018-02-16 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明提出了一种通过表面展示实现人源精氨酸酶‑1固定化的方法。步骤为设计在冰核形成蛋白剪切变体(InaK‑N)的氨基端加入信号肽和带电荷多肽，在羧基端融合人源精氨酸酶‑1，在羧基端设计HA标签；构建各种重组质粒分别转化大肠杆菌感受态细胞，获得不同基因工程菌株；将不同菌株摇瓶培养；检测人源精氨酸酶‑1展示效率和酶活；挑取酶活最高的菌株大量培养，高效转化L‑精氨酸，合成L‑鸟氨酸。本发明通过冰核形成蛋白剪切变体融合人源精氨酸酶‑1在大肠杆菌细胞表面有效展示，从而实现了人源精氨酸酶‑1固定化。与原始的冰核形成蛋白展示系统相比，明显提高人源精氨酸酶‑1展示效率和酶活，与几丁质固定化法相比，降低成本，缩短流程，简化纯化步骤。
一种通过表面展示实现精氨酸固定方法

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