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[发明专利]一步法快速构建扩增子文库的引物组合-CN201710218530.7有效
发明人：阎海;王思振;焦宇辰;徐大勇;郑乔松;师晓 -专利权人：北京泛生子基因科技有限公司
申请日： 2017-04-05 - 公布日： 2020-02-21 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一步法快速构建扩增子文库的引物组合，其包括：根据目标扩增子设计的上游融合引物，所述上游融合引物包括第一接头序列和根据目标扩增子设计的特异性上游引物序列；根据目标扩增子设计的下游融合引物，所述下游融合引物包括第二接头序列和根据目标扩增子设计的特异性下游引物序列；上游通用引物，所述上游通用引物包括第三接头序列、barcode序列和第一接头序列；和下游通用引物，所述下游通用引物包括通用序列和第二接头序列。运用该融合引物组合可以简便、快速的经1步构建扩增子文库，且由于在PCR起始前就引入barcode，使得样本及文库间交叉污染的可能性大大降低。
一步法快速构建扩增文库引物组合

[发明专利]用于构建测序文库的接头和测序文库的构建方法-CN202110147807.8在审
发明人：许明炎;张晓妮 -专利权人：深圳海普洛斯医疗器械有限公司
申请日： 2018-12-06 - 公布日： 2021-05-28 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于构建测序文库的接头，其通过第一核苷酸单链与第二核苷酸单链部分结合而形成，所述第一核苷酸单链包括第一通用引物序列、第一测序引物序列和位于所述第一通用引物序列与所述第一测序引物序列之间的单分子标签，所述第二核苷酸单链包括第二通用引物序列、与所述第一测序引物序列部分互补的第二测序引物序列和位于所述第二通用引物序列与所述第二测序引物序列之间的样本标签，所述第一通用引物序列为AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC，所述第一测序引物为ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC T，所述第二通用引物序列为ATCTCGTATGCCGTCTT CTGCTTG，所述第二测序引物为GATCGGAAGAGCACA
用于构建序文接头方法

[发明专利]基于甲基化DNA目标区域构建测序文库及系统和应用-CN201980092935.8在审
发明人：杨林;张艳艳;王其伟;卢佳;陈芳;蒋慧 -专利权人：深圳华大智造科技股份有限公司
申请日： 2019-05-21 - 公布日： 2021-12-17 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：该方法包括：获得经重亚硫酸氢盐转化的带有通用序列的DNA样本；利用第一特异性引物和第一通用引物扩增获得，第一特异性引物位于目标区域的上游，第一通用引物与通用序列至少部分匹配或重叠；利用第二特异性引物、第二通用引物和标签引物扩增得到测序文库；其中第二特异性引物位于第一特异性引物的下游和目标区域的上游，第二通用引物与第二特异性引物的至少部分序列重叠，标签引物与第一通用引物的部分序列重叠；或者第二特异性引物位于目标区域的下游，第二通用引物和第一特异性引物的至少部分序列重叠，标签引物与第二特异性引物的部分序列重叠。
基于甲基化 dna 目标区域构建序文系统应用

[发明专利]单标记通用探针与特异性引物的组合物及其DNA检测方法-CN201811084642.9在审
发明人：陈月琴;刘旭宏;王小波;钟鸿;戴丽丽;王秀云 -专利权人：厦门基科生物科技有限公司
申请日： 2018-09-18 - 公布日： 2019-01-04 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开了单标记通用探针与特异性引物的组合物及其DNA检测方法，所述单标记通用探针包括第一探针和第二探针，所述特异性引物包括上游引物和下游引物；所述上游引物和下游引物均包括接头序列、标签序列和特异性序列，上游引物与下游引物的接头序列相同；所述第一探针包含第一通用序列和第一修饰基团，第二探针包含第二通用序列和第二修饰基团，第一修饰基团和第二修饰基团能配合发出荧光信号；所述第一通用序列与第一标签序列互补或反向互补，第二通用序列与第二标签序列相同或反向。本发明提供的组合物及检测方法，具备PCR实时分析检测和熔点分析能力，在检测容量上进一步提升，具有较强的检测通用性。
通用序列修饰基团探针特异性引物标签序列上游引物通用探针下游引物单标记检测接头序列特异性序列反向互补熔点分析实时分析荧光信号配合

[发明专利]用于减少非特异性扩增的PCR引物组及其应用-CN202010929502.8在审
发明人：朱华生;冒燕;孔令印;梁波 -专利权人：苏州贝康医疗器械有限公司
申请日： 2020-09-07 - 公布日： 2020-12-01 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于减少非特异性扩增的PCR引物组及其应用，PCR引物组包括上游引物和下游引物，所述上游引物和/或所述下游引物从5’端到3’端依次包括5’端通用序列、互补序列和3’端通用序列；所述5’端通用序列与所述3’端通用序列反向互补，所述互补序列与目标序列特异性互补配对，且所述互补序列中含有间隔的两个RNA碱基。本发明的PCR引物组能够减少引物二聚体和其他非特异性扩增产物，增加了目标区域序列扩增的特异性，从而可满足位点捕获的有效性。
用于减少非特异性扩增 pcr 引物及其应用

[发明专利]用于目标互补DNA富集的方法-CN201980090479.3在审
发明人： J·斯科尔尼克;王颖婷;云翔 -专利权人：新加坡国立大学;新加坡科技研究局
申请日： 2019-12-26 - 公布日： 2021-09-14 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明提供了用于富集目标互补DNA(cDNA)的方法，包括：(a)提供多个cDNA，每个cDNA在末端包含第一通用序列，并且其中所述多个cDNA包含目标cDNA；(b)用与第一通用序列互补的通用正向引物和基因特异性反向引物扩增目标cDNA，且其中通过核酸扩增反应、通过连接或通过引物延伸反应将第二通用序列添加到与第一通用序列相反的目标cDNA的末端；(c)使用通用正向引物和与第二通用序列互补的通用反向引物扩增所述扩增子或延伸产物。在一个实施方式中，通用正向引物、基因特异性反向引物和第二通用反向引物在相同的反应混合物中提供，使得扩增是单一步骤。
用于目标互补 dna 富集方法

[发明专利]核苷酸序列、通用反向引物、通用反转录引物、引物设计方法及miRNA检测方法-CN201610382631.3有效
发明人：陈伟铭;康诗婷 -专利权人：奎克生技光电股份有限公司
申请日： 2016-06-01 - 公布日： 2020-01-07 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明提供一种具有SEQ ID NO:1的核苷酸序列、具有SEQ ID NO:2的通用反向引物、通用反转录引物、引物设计方法以及miRNA检测方法。在miRNA检测方法中，使用所述通用反转录引物对miRNA样品进行cDNA合成，而所述通用反向引物用于在qPCR定量检测时进行所述cDNA分子扩增。所述引物设计方法使用所述通用反向引物序列、所述核苷酸序列及设计规则，以设计qPCR定量检测所用的引物。本发明的通用反转录引物、通用反向引物以及由引物设计方法所设计出的引物具有较佳的特异性及敏感度，同时兼具降低成本及方便使用的特性，且不需对引物进行额外修饰。
核苷酸序列通用反向引物转录设计方法 mirna 检测

[发明专利]一种短片段核酸链检测方法和预扩增方法-CN201711220022.9在审
发明人：雷向东;张选 -专利权人：上海境象生物科技有限公司
申请日： 2017-11-29 - 公布日： 2018-05-08 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：一种短片段核酸链检测方法和预扩增方法，反转录时通过TSO序列模板转换加长目标序列5’端，通过反转录引物识别目标序列并加长目标序列3’端；核酸扩增时为反转录产物设计5’和3’专一性引物，5’专一性引物跨越TSO序列和目标序列衔接部分，3’专一性引物跨越目标序列和反转录引物衔接部分，即可准确地扩增和检测短片段核酸序列；核酸扩增时为反转录产物设计5’和3’通用引物，5’通用引物设计在TSO序列内部，3’通用引物设计在反转录引物内部，即可同时获得多个短片段核酸序列预扩增产物。
一种片段核酸检测方法扩增

[发明专利]用于基因突变检测的发夹式扩增阻断法的引物和探针及其应用-CN201911392622.2在审
发明人：杨梦甦;徐涛;邹恒 -专利权人：香港城市大学深圳研究院
申请日： 2019-12-30 - 公布日： 2021-07-16 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于基因突变检测的发夹式扩增阻断法的引物和探针及其应用。本发明提供的引物和探针包括通用引物A、通用引物B和野生型阻断探针P；通用引物A和B用于扩增含有靶突变位点的靶序列，与野生型靶序列W和扩增的突变靶序列M完全互补；野生型阻断探针P与通用引物A的延伸的野生型靶序列W完全互补，并且部分互补于通用引物A的延伸的突变靶序列M；野生型阻断探针P的互补位点的5'端与通用引物B的互补位点的3'端部分重叠；优选探针P以其3'端通过共价基团与引物A的5'端结合形成野生型阻断探针P‑通用引物A复合物的形式存在。
用于基因突变检测发夹扩增阻断引物探针及其应用

[发明专利]PCR引物对及其应用-CN201780090488.3在审
发明人：杨林;蒋浩君;曾鹏;庄雪寒;高雅;张艳艳;蒋慧;郭晶;陈芳;徐讯 -专利权人：深圳华大智造科技有限公司
申请日： 2017-06-20 - 公布日： 2019-12-20 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：提供了PCR引物对及其应用。其中，该PCR引物对包括：第一引物和第二引物，其中，所述第一引物包含第一特异性序列、第一随机序列和第一通用序列，所述第一特异性序列位于所述第一引物的3’端，所述第一随机序列位于所述第一引物的5’端，所述第一通用序列位于所述第一特异性序列和所述第一随机序列之间，所述第二引物包含第二特异性序列、第二随机序列和第二通用序列，所述第二特异性序列位于所述第二引物的3’端，所述第二随机序列位于所述第二引物的5’端，所述第二通用序列位于所述第二特异性序列和所述第二随机序列之间，其中，所述第一随机序列和所述第二随机序列反向互补。
随机序列特异性序列第二引物第一引物通用序列反向互补应用

[发明专利]一种应用多重PCR阵列技术的核酸检测方法-CN201210289505.5有效
发明人：杜蓬;张磊;邵世和;孙爱华;王黎芳;周海鸥;银国利;何方;蒋锦琴;花扣珍;覃江凤 -专利权人：浙江医学高等专科学校
申请日： 2012-08-15 - 公布日： 2013-02-20 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：包括：通用标签(UT)序列，通用标签序列与特异性检测引物组成的引物对(5’-UT引物+特异检测引物-3’)，含有该通用标签序列或引物对的试剂盒，及其它们在核酸生物检测中的应用。所述UT序列满足以下条件：①上下游引物的UT序列不同、Tm值相差不超过±1℃，且大于检测引物Tm值5-10℃左右；②UT序列为随机设计的DNA片段，与待检测生物的序列间无同源性。本发明的检测方法，通过mPCR结合通用标签序列的方法，以提高核酸检测的灵敏度和特异性。
一种应用多重 pcr 阵列技术核酸检测方法

[发明专利]检测基因突变的引物、试剂盒及方法-CN201811386433.X在审
发明人：孙培 -专利权人：北京昱晟达医疗科技有限公司
申请日： 2018-11-20 - 公布日： 2019-04-16 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测基因突变的引物、试剂盒及方法。该引物包括上游引物和下游引物，上游引物包括依次相连的通用扩增序列、荧光探针序列以及目的片段上游特异性扩增序列；下游引物包括目的片段的下游特异性扩增序列；目的片段上游特异性扩增序列是区分野生型目的片段与突变型目的片段的特异性扩增序列将探针设计在目的片段特异性扩增序列的上游，使得目的片段长度可以按需缩短，提高了对血浆cfDNA类样本的利用率和临床应用价值。而在荧光探针序列的上游同时设置通用扩增序列，不仅方便后续扩增，减少整体引物的用量，进而避免整体引物所需用量太大而导致的扩增特异性降低，而且通用扩增序列的存在还有助提高该引物使用的通用性。
目的片段特异性扩增引物扩增序列上游荧光探针序列基因突变上游引物下游引物试剂盒扩增通用临床应用探针设计依次相连突变型需用量野生型种检测血浆样本检测

[发明专利]用于病原核酸扩增的引物组、病原核酸检测文库构建方法和病原检测方法-CN201811575203.8在审
发明人：邹婧;欧日晶;聂自豪;万纯 -专利权人：深圳华大智造科技有限公司
申请日： 2018-12-21 - 公布日： 2020-06-30 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：一种用于病原核酸扩增的引物组、病原核酸检测文库构建方法和病原检测方法，本发明的引物组包括至少一对多重扩增引物，多重扩增引物包括正向引物和反向引物，每条正向引物和反向引物的结构包括通用引物扩增结构序列、样本标签序列和病原核酸特异性结合序列，通用引物扩增结构序列用于通用引物扩增，样本标签序列用于识别样本来源，病原核酸特异性结合序列用于特异性结合病原核酸目标区域。本发明采用多重扩增技术富集病原核酸目标基因序列，通过将样本标签序列与样本相连，可明确样本来源，同时实现多个样本混合一起进行文库制备，提高检测通量。
用于病原核酸扩增引物检测文库构建方法

[发明专利]一种用于检测HPV的引物与探针组合-CN202211073703.8在审
发明人：杨林;叶伦;汪玉洲 -专利权人：杭州迪英加科技有限公司
申请日： 2022-09-02 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于检测HPV的引物与探针组合。本发明的通用引物与通用探针组合，通过将特异性引物与探针组合1）至12）中的正向引物增加17）同源重复序列，使得正向特异性引物变成50‑70个碱基的长引物，而17）同源重复序列的序列组成有两个部分，一是通用探针序列，二是通用引物序列，这样的引物和探针组合设计可以将1）至12）这12个高危亚型的探针从多个（12个或者2个以上的探针组）降低至1个通用探针，特异性引物也可以从12对降至更低，从而大大减小了由于引物组合和探针组合过多造成的干扰
一种用于检测 hpv 引物探针组合

[发明专利]一种基于加尾引物设计的Sanger测序方法-CN202210358213.6在审
发明人：陈志宏;吴水英;陈琰 -专利权人：厦门飞朔生物技术有限公司
申请日： 2022-04-06 - 公布日： 2022-07-05 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明涉及基因测序的技术领域，特别是一种基于加尾引物设计的Sanger测序方法，包括如下步骤：(1)根据样本DNA选择特异性引物序列，之后在特异性引物序列的5’端加上通用引物序列得到加尾引物序列，根据加尾引物序列合成加尾引物；(2)使用加尾引物配制PCR扩增反应液，加入样本DNA，执行PCR扩增程序，得到PCR扩增产物；(3)PCR扩增产物进行纯化；(4)选择通用引物作为测序引物,对纯化的PCR扩增产物进行循环测序反应；(5)循环测序反应产物经过纯化、变性、上机测序得到样本DNA的序列，本发明通过通用序列和特异性序列引物的结合不仅可以节省Sanger测序的工作量，也可以降低引物加错的可能性。
一种基于引物设计 sanger 方法

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