本发明所述的敲除胶质母细胞瘤DHC2基因的试剂盒,包括第一敲除质粒和第二敲除质粒,或者包括第一敲除质粒和第三敲除质粒,或者包括第一敲除质粒、第二敲除质粒和第三敲除质粒;所述第一敲除质粒能转录出序列为SEQID NO:1的第一向导RNA;所述第二敲除质粒能转录出序列为SEQ ID NO:2的第二向导RNA;所述第三敲除质粒能转录出序列为SEQ ID NO:3的第三向导RNA。本发明首次提供了针对DHC2基因进行稳定敲除的试剂盒,本试剂盒所包含的敲除质粒具备脱靶率低、特异性强的特征;该试剂盒能稳定敲除DHC2两等位基因,基因编辑效率极高。