一种褐藻酸裂解酶突变体,所述的褐藻酸裂解酶突变体由野生型褐藻酸裂解酶通过点突变获得,所述的野生型褐藻酸裂解酶氨基酸序列为SEQ ID NO:1;所述的褐藻酸裂解酶突变体的氨基酸序列为SEQ ID NO:本发明提供的褐藻酸裂解酶突变体的蛋白表达量高于野生型褐藻酸裂解酶,1L发酵液分离纯化后可获得700±50mg纯酶,远高现有水平,为褐藻酸裂解酶的工业化生产提供了可能。
本发明涉及基因工程重组型褐藻胶裂解酶在制备系列寡糖产物中的应用。M‑专一性褐藻胶裂解酶在降解底物生成系列不饱和寡糖产物中的应用;所述重组褐藻胶裂解酶为褐藻胶裂解酶Pae‑rEAlgL,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,或者,所述重组褐藻胶裂解酶为褐藻胶裂解酶Avi‑rEAlgL褐藻胶裂解酶Pae‑rEAlgL和Avi‑rEAlgL是M专一性的内切型褐藻胶裂解酶,是一种高效的制备富G段寡糖的工具酶。褐藻胶裂解酶Pae‑rEAlgL和Avi‑rEAlgL具有适冷特性和广泛的pH稳定性,有望成为用于治疗囊性纤维病的酶制剂。
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种透明质酸裂解酶及其基因,含有该基因的重组载体和细胞,以及该透明质酸裂解酶的表达与应用。一种透明质酸裂解酶,所述透明质酸裂解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。一种透明质酸裂解酶基因,编码透明质酸裂解酶,序列为SEQ ID NO.2所示的序列或SEQ ID NO.2的互补序列。本发明采用工程菌株(大肠杆菌或枯草芽孢杆菌)表达系统成功实现细菌来源透明质酸裂解酶异源高效活性表达,发酵活力显著高于已有报道,实现了细菌透明质酸裂解酶的规模化生产,而且克服了野生菌株分离纯化过程复杂的不足,制备高纯度透明质酸裂解酶产品,为透明质酸裂解酶的工业化生产和透明质酸裂解酶在生物化工和医药等领域的研究应用奠定基础。
本发明涉及一种海洋褐藻酸裂解酶及其表达基因与应用。一种海洋褐藻酸裂解酶基因gc,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述海洋褐藻酸裂解酶基因gc编码的海洋褐藻酸裂解酶GC,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明首次获得了褐藻酸裂解酶GC,并利用结晶的方法得到了褐藻酸裂解酶GC的晶解析了其三维结构。褐藻酸裂解酶GC晶体结构可在工业酶制剂中的底物改造、提高酶活等方面具有广泛的应用前景。