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[发明专利]一种猪圆环病毒2型重组Cap蛋白的表达制备及应用-CN201911246097.3有效
发明人：张文亮;李鹏宇;刘新月;栗利芳;侯旭;张彤;肖进;齐鹏 -专利权人：中牧实业股份有限公司
申请日： 2019-12-08 - 公布日： 2021-10-19 - 主分类号： C07K14/01 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪圆环病毒2型重组Cap蛋白的表达制备及应用。猪圆环病毒2型重组Cap蛋白，其序列为序列表中序列2。其编码基因为序列表中序列1。猪圆环病毒2型Cap重组蛋白病毒粒子的制备方法，包括下述步骤：1)表达猪圆环病毒2型Cap重组蛋白重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态，得到表达猪圆环病毒2型Cap重组蛋白病毒粒子的重组菌；2)重组菌诱导表达，收集菌体并破碎，收集包涵体；3)包涵体溶解复性获得组装的猪圆环病毒2型Cap重组蛋白病毒粒子。本发明采用大肠杆菌表达系统表达猪圆环病毒2型Cap蛋白，蛋白表达量大，纯化方法简单，极大降低了生产成本，有利于推进之后的大批量生产。
种猪圆环病毒重组 cap 蛋白表达制备应用

[发明专利]一种Irisin重组蛋白及其合成方法-CN201610592918.9在审
发明人：谯小勇;许良智;马亚仙;胡颖;聂颖;程冉;曾如君 -专利权人：四川大学华西第二医院
申请日： 2016-07-26 - 公布日： 2016-11-30 - 主分类号： C07K14/78 文献下载
摘要：本发明公开了一种Irisin重组蛋白及其合成方法，所述Irisin重组蛋白的N端有His‑tag。His‑tag是一类经过亲和纯化的小鼠单克隆抗体，用于检测表达载体上的标签序列，籍以分析目的蛋白的表达含量及其功能。His‑tag含6个组氨酸，组氨酸可以特异性的结合镍离子，带有组氨酸标签的重组蛋白可以被镍柱吸附，从而达到纯化的目的。Irisin直接使用不能对蛋白的表达进行分析和鉴定，通过生物学功能鉴定表明，带有His‑tag的Irisin重组蛋白能够对蛋白的定位表达进行特异性的分析和鉴定，从而分析Irisin重组蛋白的表达含量及其功能
一种 irisin 重组蛋白及其合成方法

[发明专利]一种非洲猪瘟病毒B602L重组蛋白稳定表达细胞系及其构建方法和应用-CN202210698321.8在审
发明人：郝文茜;李作生;陈瑞爱;刘郁夫;容芳;冯夏宁;王圳 -专利权人：岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
申请日： 2022-06-20 - 公布日： 2022-10-18 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种非洲猪瘟病毒B602L重组蛋白稳定表达细胞系及其构建方法和应用，在将B602L重组蛋白完成序列改造后，将其克隆至真核表达载体，进行真核表达，经过筛选能得到稳定表达B602L重组蛋白的CHO利用本发明的构建方法能在1个月内筛选获得表达非洲猪瘟病毒B602L重组蛋白的CHO细胞株，并在没有G418筛选压力下，细胞系传至20代，仍可检测到外源重组蛋白，具有试验周期短、成功率高和表达成本低的优点
一种非洲猪瘟病毒 b602l 重组蛋白稳定表达细胞系及其构建方法应用

[发明专利]重组蛋白的生产方法-CN201780047981.7在审
发明人：仓知建始;木下美保子 -专利权人：丝芭博株式会社
申请日： 2017-08-02 - 公布日： 2019-04-02 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组蛋白的生产方法，其为使用在诱导型启动子的调控下表达重组蛋白的重组细胞的该重组蛋白的生产方法，其中，包括在使重组细胞增殖后的培养液的一部分中添加新鲜的培养基并连续地进行培养的步骤，不重复使用诱导了重组蛋白的表达的重组细胞
重组蛋白重组细胞培养液表达重组蛋白诱导型启动子培养基生产增殖诱导调控新鲜

[发明专利]一种外显子连接蛋白、核酸分子、表达载体、重组蛋白表达系统、应用-CN202011060210.1在审
发明人：王天云;樊振林;林艳;王小引;贾岩龙;米春柳;张继红 -专利权人：河南普诺易生物制品研究院有限公司;新乡医学院
申请日： 2020-09-30 - 公布日： 2021-02-05 - 主分类号： C07K14/00 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种外显子连接蛋白、核酸分子、表达载体、重组蛋白表达系统、应用。本发明公开了一种具有如SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的外显子连接蛋白，通过构建含有外显子连接蛋白基因序列的重组蛋白表达系统，将外显子连接蛋白应用于重组蛋白的表达，同等条件下，与不含外显子连接蛋白的细胞系进行比较，能够显著提高重组蛋白的表达量，表达水平提高6～11倍多，降低生产成本。
一种外显子连接蛋白核酸分子表达载体重组系统应用

[发明专利]具有预防治疗动脉粥样硬化作用的重组蛋白表达与纯化-CN200910187943.9有效
发明人：刘庆平;迟彦;李文哲;张英彪 -专利权人：大连大学
申请日： 2009-10-15 - 公布日： 2010-07-14 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及人源重组蛋白的表达和纯化，具体涉及到一种具有预防治疗动脉粥样硬化作用的重组蛋白表达与纯化。通过设计一对上下游引物在已保存有β2-GPI基因片段的T载体上进行Polymerase Chain Reaction(PCR)反应扩增得到β2-GPI Domain V基因片段，并克隆到表达载体pET-32a-c(+)上，构建表达载体pET32a-DV，并将其转化至大肠杆菌rosetta-gami表达菌，然后经过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达，并通过镍离子亲和层析柱纯化重组蛋白，western blot方法验证重组蛋白β2-GPI Domain V表达，TLC-配体实验验证重组表达β2-GPI Domain V蛋白活性，ELISA竞争性抑制试验验证重组表达β2-GPIdomain V蛋白可作为预防治疗动脉粥样硬化药物的可行性。
具有预防治疗动脉粥样硬化作用重组蛋白表达纯化

[发明专利]一种含肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的融合蛋白和其制备方法及由该蛋白自组装的纳米粒-CN201610951811.9有效
发明人：华子春;黄凯宗 -专利权人：南京大学
申请日： 2016-11-02 - 公布日： 2020-03-27 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明属生物制药领域，具体涉及一种TRAIL变体蛋白表达、纯化，自组装。该重组蛋白由含有TRAIL融合蛋白基因的质粒在大肠杆菌表达，产生活性很高的该重组蛋白。该重组蛋白采用离心的方式进行简单、快速地纯化。纯化的蛋白在生理条件下自组装成为200纳米的微粒。静脉注射肿瘤移植小鼠后，该重组蛋白有效地在小鼠的肿瘤部位聚集。该重组蛋白腹腔注射肿瘤移植小鼠，有效抑制肿瘤生长。经简单工艺纯化后的该重组蛋白，用于肿瘤治疗。
一种肿瘤坏死因子相关诱导融合蛋白制备方法组装纳米

[发明专利]获自毕赤酵母的自动诱导型磷酸钠协同转运体启动子和利用该启动子制造重组蛋白的方法-CN200680054180.5有效
发明人：李弘远;安廷梧;郑俊基;崔毅星;金千锡;李殷教;洪智涎;李赫远;朴明洙 -专利权人：韩国生命工学研究院
申请日： 2006-08-07 - 公布日： 2009-04-22 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了获得自毕赤酵母的自动诱导型NPS启动子；携带所述启动子和核苷酸序列的重组表达载体，所述序列与所述启动子可操作地连接并编码重组蛋白；用所述重组表达载体转化或转染的宿主细胞；以及制造重组蛋白的方法，所述方法包括培养所述宿主细胞以表达所述重组蛋白并分离所述蛋白。所述NPS启动子可大规模地制造感兴趣的重组蛋白而无需任何诱导物。
酵母自动诱导磷酸钠协同转运启动子利用制造重组蛋白方法

[发明专利]表达特定重组蛋白的功能化细菌磁颗粒及其制备方法-CN201610052911.8在审
发明人：张金菊;王红光 -专利权人：北京中科圆融生物科技发展有限公司
申请日： 2016-01-26 - 公布日： 2016-06-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供一种表达特定重组蛋白的功能化细菌磁颗粒，该细菌磁颗粒膜蛋白通过一段柔性多肽链融合表达特定重组蛋白；该特定重组蛋白为重组蛋白A改良的Z结构域二聚体或重组蛋白G的C结构域二聚体，并对它们的基因序列进行了特别修饰
表达特定重组蛋白功能细菌颗粒及其制备方法

[发明专利]番茄EIL1重组蛋白的制备及其应用-CN200810069714.2无效
发明人：李正国;李季;罗安才;杨迎伍;邓伟 -专利权人：重庆大学
申请日： 2008-05-22 - 公布日： 2009-02-18 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明提供了一种番茄EIL1重组蛋白质的制备方法，该方法包括表达重组蛋白的基因工程菌的构建；重组蛋白的诱导表达；重组蛋白的分离纯化。本发明还提供了上述番茄EIL1重组蛋白质的一些应用，包括番茄EIN3/EILs蛋白家族的结构、功能研究应用；番茄乙烯应答基因的筛选；番茄EIL1单克隆抗体的制备等。
番茄 eil1 重组蛋白制备及其应用

[发明专利]一种大肠杆菌胞外生产外源蛋白的集成化方法-CN201210287000.5有效
发明人：童望宇;宋俊兰;陈昭元 -专利权人：安徽大学
申请日： 2012-08-13 - 公布日： 2012-12-19 - 主分类号： C12P21/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种大肠杆菌胞外生产外源蛋白的集成化方法，包括单基因突变的分泌型大肠杆菌的菌株构建、外源蛋白表达的分泌型重组大肠杆菌的菌株构建及分泌型重组大肠杆菌的目标蛋白表达过程。本发明采用大肠杆菌的pal或mrcB等基因突变株为宿主和定位于周质空间的重组蛋白质粒，使得重组蛋白的发酵和胞外分泌同时进行。从而实现降低目标蛋白的胞内降解，提高重组蛋白表达；同时减少重组蛋白的胞内过度积累，而降低包涵体形成；消除细胞破壁工艺，减少热原污染，方便分离纯化；进而达到降低生产成本，提高产品表达及质量的目的。经检测，超过40％的重组蛋白渗漏到培养基中，表达水平为10～30%。
一种大肠杆菌外生产外源蛋白集成化方法

[发明专利]一种基于Sec63的不同重组蛋白表达水平的毕赤酵母菌株的分选方法-CN201811510659.6有效
发明人：林影;袁清焱;梁书利;韩双艳;李承;郑穗平 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2018-12-11 - 公布日： 2021-07-16 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开一种基于Sec63的不同重组蛋白表达水平的毕赤酵母菌株的分选方法，涉及基因工程技术领域。本发明将毕赤酵母内质网膜蛋白(Sec63)融合表达荧光蛋白，通过分选出荧光值高低不同的菌株而分选出重组蛋白表达水平不同的菌株。本发明使用荧光蛋白(EGFP)荧光值可以快速地分选出不同重组蛋白表达水平的毕赤酵母菌株，简便快速，无需繁琐的操作，有利于不同重组蛋白表达水平的毕赤酵母重组菌株的快速分选。
一种基于 sec63 不同重组蛋白表达水平酵母菌株分选方法

[发明专利]哈维氏弧菌外膜蛋白Ompk抗原的表达和作为疫苗组份的应用-CN200310112479.X无效
发明人：李宁求;吴淑勤;白俊杰;劳海华;石存斌;叶星;简清;潘厚军;陶家发 -专利权人：中国水产科学研究院珠江水产研究所
申请日： 2003-12-08 - 公布日： 2005-06-15 - 主分类号： C07H21/00 文献下载
摘要：本发明涉及在大肠杆菌中重组表达哈维氏弧菌外膜蛋白Ompk抗原及重组外膜蛋白Ompk作为疫苗组份在预防海水鱼弧菌病方面的应用。以哈维氏弧菌株EcGS020802DNA为模板，用PCR法克隆抗原Ompk的编码基因，将该基因重组到原核表达载体pBV220中，表达的重组蛋白分子量约为28kDa，重组蛋白在大肠杆菌中高效表达形成包涵体包涵体经洗涤、变性复性后获得重组蛋白纯度好，产量高。哈维氏弧菌Ompk重组蛋白免疫实验鱼后，对攻击感染产生有效的免疫保护性。
哈维弧菌膜蛋白 ompk 抗原表达作为疫苗应用

[发明专利]人成纤维细胞生长因子21重组蛋白及其制备方法和应用-CN201610819321.3有效
发明人：叶贤龙;齐剑英;仉晓文 -专利权人：河南师范大学
申请日： 2016-09-13 - 公布日： 2019-10-11 - 主分类号： C07K14/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种人成纤维细胞生长因子21重组蛋白及其制备方法和应用，将人成纤维细胞生长因子21重组蛋白编码基因的核苷酸序列与表达载体相连接得到重组表达载体；再将该重组表达载体转化宿主细胞，然后筛选高表达阳性宿主细胞，培养细胞并诱导表达人成纤维细胞生长因子21重组蛋白，收集菌体、破碎、离心、澄清、纯化，得到目标产物人成纤维细胞生长因子21重组蛋白。本发明还公开了该人成纤维细胞生长因子21重组蛋白在制备治疗代谢疾病药物中的应用。本发明的人成纤维细胞生长因子21重组蛋白（mFGF21）相比于野生型hFGF21蛋白，活性显著提高，能够更加有效降低糖尿病小鼠体内的血糖水平。
纤维细胞生长因子 21 重组蛋白及其制备方法应用

[发明专利]一种非洲猪瘟病毒p72蛋白稳定表达细胞系及其构建方法-CN202210699860.3在审
发明人：冯夏宁;李作生;陈瑞爱;刘郁夫;容芳;郝文茜;王圳 -专利权人：岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
申请日： 2022-06-20 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种非洲猪瘟病毒p72蛋白稳定表达细胞系及其构建方法，在将p72蛋白完成序列改造得到重组蛋白后，分别将其克隆至原核表达载体、真核表达载体，分别进行原核表达、真核表达和；其中，在原核表达的过程中，能得到稳定表达p72重组蛋白的大肠杆菌以及能得到纯化后的p72重组蛋白；经过真核表达后，能得到稳定表达p72重组蛋白的CHO细胞株。利用本发明的构建方法能在2个月内筛选获得表达非洲猪瘟病毒p72蛋白的CHO细胞株，并在没有嘌呤霉素筛选压力下，细胞系传至20代，仍可检测到外源重组蛋白，成功率为90％，具有试验周期短、成功率高和表达成本低的优点
一种非洲猪瘟病毒 p72 蛋白稳定表达细胞系及其构建方法