本发明公开了一种多聚磷酸激酶突变体、工程菌及其应用,所述多聚磷酸激酶突变体是将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列第79位、第106位、第108位、第111位或第285位进行单突变或多突变获得的。本发明提供了多种来源于Cytophaga hutchinsonii的多聚磷酸激酶突变体,这些突变体的比酶活较母本多聚磷酸激酶提升2.7‑17.9倍,这些突变体构成的ATP再生体系能减少70%以上ATP依赖的生物催化合成反应中
本发明属于酶工程领域,具体涉及一种酶比活提升的几丁质酶突变体ChiM及其应用。本发明提供的几丁质酶突变体ChiM是以几丁质酶ChiAm为出发模板,通过定点包含突变、组合突变获得酶比活提升的突变体ChiM,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的几丁质酶突变体ChiM酶比活为71U/mg,是ChiAm的1.48倍。本发明以毕赤酵母为重组表达宿主,实现了ChiM的高效表达,可用于制备突变体ChiM,为进一步为其广泛应用奠定基础。
本发明公开了一种水蛭素突变体及重组基因工程菌,所述水蛭素突变体是将水蛭素HV2-Lys47的N端第一个氨基酸突变为Ala获得的水蛭素突变体Ala1-HV2-Lys47,所述水蛭素突变体Ala1-HV2-Lys47的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示;所述水蛭素突变体Ala1-HV2-Lys47和未突变的水蛭素HV2-Lys47相比,比活性相同,但是在周质空间的表达量提高了近一倍。