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[发明专利]选择表达异源蛋白质的真核细胞的方法-CN201080009517.7有效
发明人： T·约斯多克;H-P·科诺普夫 -专利权人：诺瓦提斯公司
申请日： 2010-02-26 - 公布日： 2012-01-25 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及用于选择至少一个表达目的产物的真核宿主细胞的方法，其包括：(a)提供多个真核宿主细胞，其中该宿主细胞的细胞生存取决于叶酸盐摄取，其中该真核宿主细胞至少包含：(i)编码目的产物的外源多核苷酸；和(ii)编码DHFR酶的外源多核苷酸；(b)在至少包含DHFR的抑制剂和限制浓度的叶酸盐的选择性培养基中培养该多个真核宿主细胞；和(c)选择至少一个表达该目的产物的真核宿主细胞。本发明还提供用于表达目的产物的方法，其基于通过该方法选择的宿主细胞和细胞培养基。
选择表达蛋白质真核细胞方法

[发明专利]戊糖的发酵-CN03802659.7有效
发明人：胡贝图斯·约翰内斯·玛丽·奥普登坎普;哈里·拉曼厄德·哈尔汉吉;克里斯蒂安·范德德里夫特;雅各布斯·托马斯·普龙克 -专利权人：皇家奈达尔科股份有限公司
申请日： 2003-01-23 - 公布日： 2005-11-30 - 主分类号： C12N15/61 文献下载
摘要：本发明涉及用来自厌氧真菌的编码真核生物的木糖异构酶的核酸序列转化的宿主细胞。当该编码真核生物木糖异构酶的序列被表达时，赋予宿主细胞将木糖转化为木酮糖的能力，木酮糖进一步被宿主细胞代谢。因此，宿主细胞能够以木糖作为碳源生长。宿主细胞优选为真核微生物如酵母或丝状真菌。本发明还涉及制备发酵产物如乙醇的方法，其中本发明的宿主细胞利用木糖生长并产生发酵产物。本发明还涉及编码可以从厌氧真菌中获得的真核生物木糖异构酶和木酮糖激酶的核酸序列。
戊糖发酵

[发明专利]用于真核宿主中真核mRNA生产、输出和翻译的工程细菌系统和方法-CN201980056937.1在审
发明人： R·塞尔;P·科斯塔-努恩斯;G·H·殷 -专利权人：美国卵石实验室公司
申请日： 2019-07-05 - 公布日： 2021-07-23 - 主分类号： C12N15/64 文献下载
摘要：本发明技术包括用于生成基因工程化的原核生物体的新系统、方法和组合物，所述基因工程化的原核生物体被配置为生产可引入到真核宿主并在真核宿主中翻译的真核样mRNA。其他方面可包括新型真核样核苷酸构建体和mRNA分子，以及从原核细胞有效递送至靶真核宿主细胞的方法和系统。本发明进一步的方面包括用于真核细胞非整合性转化的系统、方法和组合物。
用于宿主中真核 mrna 生产输出翻译工程细菌系统方法

[发明专利]生产目标蛋白质的宿主细胞-CN201980024462.8在审
发明人： K·克拉斯;J·格拉哈姆;S·霍斯维亚克;C·基齐亚克 -专利权人：龙沙有限公司
申请日： 2019-01-30 - 公布日： 2020-12-18 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：一种经改造的真核宿主细胞，以产生异源目标蛋白质(POI)，该真核宿主细胞经过基因修饰，以减少三种不同内源宿主细胞蛋白质(HCP)中至少一种的产生，以及它在生产POI的方法中的用途。
生产目标蛋白质宿主细胞

[发明专利]用于蛋白生产: CA2+ ATP酶过表达的改良的载体和酵母菌株-CN200980140300.7无效
发明人：崔秉权 -专利权人：格利科菲公司
申请日： 2009-08-10 - 公布日： 2011-09-07 - 主分类号： C12P21/00 文献下载
摘要：描述了低等真核生物宿主细胞，其中内源或异源Ca2+ATP酶被过表达。也描述了低等真核生物宿主细胞，其中钙网蛋白和/或ERp57蛋白被过表达。这些宿主细胞可用于生产具有减少的O-糖基化的重组糖蛋白。
用于蛋白生产 ca2 atp 表达改良载体酵母菌株

[发明专利]通过终止密码子连读的多肽同种型的细胞表面展示-CN200980142651.1有效
发明人： T·约斯多克;H-P·科诺普夫;A·J·诺梅;B·威尔姆斯 -专利权人：诺瓦提斯公司
申请日： 2009-08-28 - 公布日： 2011-09-21 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明尤其涉及用于产生或选择表达所希望的水平的目的多肽的真核宿主细胞的方法，其包括：a)提供多个包含异源核酸的真核宿主细胞，该异源核酸包含至少一个盒(Cas-POI)，该盒(Cas-POI)至少包含编码目的多肽的第一多核苷酸(Pn-POI)、至少一个处于该第一多核苷酸下游的终止密码子，和处于该终止密码子下游的编码免疫球蛋白跨膜锚或其功能性变体的第二多核苷酸；b)培养该真核宿主细胞，以允许表达目的多肽，使得至少部分目的多肽表达为包含该免疫球蛋白跨膜锚或其功能性变体的融合多肽，其中该融合多肽展示在该宿主细胞表面；c)根据展示在细胞表面的融合多肽的存在或量选择至少一个真核宿主细胞。本发明还提供包含这样设计的异源核酸的宿主细胞和用于使用这些宿主细胞产生多肽的方法。
通过终止密码子多肽同种细胞表面展示

[发明专利]一种细胞膜表面展示含双信号肽PD-1蛋白的细胞模型及其应用-CN201911077819.7在审
发明人：王选年;孙国鹏;何海汛;岳锋;李鹏;张艳芳;朱艳平;郭东光;陈威;李丹;蒋力维 -专利权人：新乡学院
申请日： 2019-11-06 - 公布日： 2020-01-07 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：一种细胞膜表面展示含双信号肽PD‑1蛋白的细胞模型及其应用，细胞模型是可表达PD‑1成熟蛋白全长序列的真核宿主细胞，真核宿主细胞由构建完成的真核荧光表达载体转染至293T细胞形成，真核荧光表达载体在293T细胞上瞬时表达PD‑1蛋白，并将PD‑1蛋白展示在293T细胞表面，细胞模型在筛选能与PD‑1结合的多肽和抗体中的应用。本发明是将Kozak序列和牛Fcγ受体信号肽序列代替原来PD‑1基因上的信号肽，能将PD‑1更高效的锚定在细胞膜上，以便将犬的PD‑1成熟蛋白大量展示在真核细胞膜表面。
细胞模型真核宿主细胞成熟蛋白荧光表达信号肽真核蛋白细胞膜细胞膜表面信号肽序列真核细胞膜蛋白展示全长序列瞬时表达细胞表面细胞形成多肽构建抗体锚定转染应用展示筛选细胞基因

[发明专利]产生真核生物可翻译mRNA并将其传递给真核生物的微生物系统-CN202180008864.6在审
发明人： L·M·林克;A·B·威廉姆斯;D·莫拉;M·考克斯 -专利权人：西韦克生物技术有限责任公司
申请日： 2021-01-11 - 公布日： 2022-11-11 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：一种用于产生真核生物可翻译mRNA并将其传递给真核生物细胞的细菌系统。该系统使用侵入性非致病性细菌以产生功能性mRNA货物并将其传递给真核生物细胞。此外，该系统使用细菌以产生可从细菌细胞中提取的功能性mRNA，用于下游应用。细菌包含至少一种编码mRNA的原核生物表达盒；该mRNA包含细菌转录的聚‑A序列和5'帽或伪帽元件，例如内部核糖体进入位点(IRES)元件，将介导真核生物宿主细胞中的翻译。治疗性mRNA功能的示例包括但不限于提供编码抗体、疫苗抗原和宿主中缺陷基因的遗传物质。
产生生物翻译 mrna 传递微生物系统

[发明专利]带有荧光标记的PD-L1膜表面表达细胞模型及其应用-CN201911076907.5在审
发明人：王选年;孙国鹏;何海汛;岳锋;李鹏;张艳芳;朱艳平;郭东光;陈威;李丹;蒋力维 -专利权人：新乡学院
申请日： 2019-11-06 - 公布日： 2020-01-31 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：带有荧光标记的PD‑L1膜表面表达细胞模型及其应用，细胞模型是可表达PD‑L1成熟蛋白全长序列的真核宿主细胞，所述真核宿主细胞由构建完成的真核荧光表达载体转染至293T细胞形成，所述真核荧光表达载体在293T细胞中瞬时表达PD‑L1蛋白，并将PD‑L1蛋白展示在293T细胞表面，细胞模型在筛选能与PD‑L1结合的多肽和抗体中的应用。本发明是将牛Fc γ受体信号肽序列代替原来PD‑L1基因上的信号肽，能将PD‑L1更高效的锚定在细胞膜上，以便将犬的PD‑L1成熟蛋白大量展示在真核细胞膜表面。
真核宿主细胞成熟蛋白细胞模型荧光表达真核细胞膜信号肽序列真核细胞膜表达细胞全长序列瞬时表达细胞表面细胞形成荧光标记膜表面信号肽多肽构建抗体锚定转染应用展示筛选细胞

[发明专利]在低等真核生物中产生半乳糖基化糖蛋白-CN201510004041.2在审
发明人： R.戴维森;T.格恩格洛斯;S.维尔德特;B.-K.蔡;J.内特;P.博布罗维茨;S.哈米尔顿 -专利权人：格利科菲公司
申请日： 2005-04-15 - 公布日： 2015-05-13 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明涉及在低等真核生物中产生半乳糖基化糖蛋白。本发明提供了产生人样糖蛋白的新型低等真核生物宿主细胞，所述糖蛋白的特征在于含有末端β-半乳糖残基并基本E缺少岩藻糖和唾液酸残基。本发明还提供了催化从UDP-半乳糖将半乳糖残基转移至重组低等真核生物宿主细胞的受体底物上的方法，所述底物可被用作治疗性糖蛋白。
低等生物产生半乳糖糖蛋白

[发明专利]细胞膜表达ALV-env蛋白荧光真核转基因表达质粒的构建及应用-CN201010011630.0无效
发明人：常维山;崔治中;张振杰 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2010-01-14 - 公布日： 2011-01-05 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明涉及一种细胞膜表达ALV-env蛋白荧光真核转基因表达质粒的构建及应用，是将PCR扩增获得的ALV-env基因与慢病毒表达载体重组构建的一种可在细胞膜上表达ALV-env蛋白的荧光真核转基因表达质粒该质粒被转染到宿主细胞后，可将ALV-env基因和绿色荧光蛋白基因(EmGFP)基因整合到宿主细胞染色体中，并在宿主细胞膜表面表达出禽白血病的囊膜蛋白，同时在宿主细胞浆中表达报告基因-绿色荧光蛋白。该膜表达ALV-env蛋白荧光真核转基因表达质粒可用于制备禽白血病假病毒，制备的禽白血病假病毒可用于检测J-亚型禽白血病中和抗体。
细胞膜表达 alv env 蛋白荧光转基因质粒构建应用

[发明专利]真核NRPS催化过程中的MBTH样蛋白-CN201780034595.4有效
发明人：鲁洛夫·阿利·兰斯·伯韦比格;乌尔里克·玛丽亚·穆勒尔;阿诺尔德·雅各布·马蒂厄·德里森;波尔·卡斯滕;雷托·丹尼尔·兹瓦伦 -专利权人：灿盛制药荷兰公司;格罗宁根大学
申请日： 2017-04-13 - 公布日： 2022-10-18 - 主分类号： C12P15/00 文献下载
摘要：本发明涉及改善由非核糖体肽合成酶催化的次生代谢物的产生的方法，该方法包括在真核宿主中使真核非核糖体肽合成酶和MbtH样蛋白接触。本发明进一步涉及包含作为非杂合体的真核非核糖体肽合成酶和原核MbtH的组合物，以及包含非核糖体肽合成酶和允许表达MbtH样蛋白的多核苷酸的真核宿主细胞。
nrps 催化过程中的 mbth 蛋白

[发明专利]发酵木糖的真核细胞的代谢工程-CN200580031103.3有效
发明人：阿龙·阿德里安·温克勒;西普克·马尔滕·凯珀;威廉默斯·特奥多鲁斯·安东尼厄斯·马里亚·德拉特;约翰内斯·彼得·范戴肯;雅各布斯·托马斯·普龙克 -专利权人：代尔夫特技术大学
申请日： 2005-07-15 - 公布日： 2007-10-10 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明涉及真核宿主细胞中的进一步遗传修饰，所述真核宿主细胞已经被转化而表达赋予宿主细胞使木糖异构为木酮糖的能力的木糖异构酶。本发明的修饰的宿主细胞适于在利用木糖来源或者木糖和葡萄糖来源作为碳源的发酵过程中生产包括乙醇在内的各种发酵产物。
发酵真核细胞代谢工程

[发明专利]在具有恒定pCO₂含量的培养基中制备重组蛋白质的方法-CN200980108428.5无效
发明人： D·艾森克雷特泽尔;J·格特根斯;A·约克尔;C·克灵格尔;T·诺勒;B·苏埃斯 -专利权人：弗·哈夫曼-拉罗切有限公司
申请日： 2009-03-11 - 公布日： 2011-02-09 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本说明书描述了用于在柠檬酸循环经修饰的真核宿主细胞中重组制备多肽的方法，其中所述方法包括在允许多肽表达的条件下在合适培养基中培养所述真核宿主细胞，其中培养基中溶解的CO2含量(pCO2)维持在10％至20
具有恒定 pco sub 含量培养基制备重组蛋白质方法

[发明专利]在低等真核生物中产生半乳糖基化糖蛋白-CN200580011116.4无效
发明人： R·戴维森;T·格恩格洛斯;S·维尔德特;B·－K·蔡;J·内特;P·博布罗维茨;S·哈米尔顿 -专利权人：格利科菲公司
申请日： 2005-04-15 - 公布日： 2007-04-18 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明提供了产生人样糖蛋白的新型低等真核生物宿主细胞，所述糖蛋白的特征在于含有末端β－半乳糖残基并基本上缺少岩藻糖和唾液酸残基。本发明还提供了催化从UDP－半乳糖将半乳糖残基转移至重组低等真核生物宿主细胞的受体底物上的方法，所述底物可被用作治疗性糖蛋白。
低等生物产生半乳糖糖蛋白

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