本发明涉及一种来自恶臭假单胞菌的黄素单加氧酶基因FMO及其制备方法和应用。具体涉及一种利用功能互补法从来自被芳香族化合物污染的土壤中能以色氨酸为底物合成靛蓝的恶臭假单胞菌克隆、编码黄素单加氧酶(FMO)基因，并将该基因重组到大肠杆菌体内，得到的一种具有黄素单加氧酶活性的重组菌，将其命名为黄素单加氧酶基因FMO，其核苷酸序列如SEQ ID No 1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID No2所示。在有色氨酸存在的条件下，用该黄素单加氧酶基因FMO可合成靛蓝。
本发明涉及生物工程技术领域，公开了一种提高裂解多糖单加氧酶异源可溶性表达的工程菌及其构建方法与应用。本发明对来源于丝状真菌柄孢霉(Podospora anserina S mat+)的PaLPMO基因的裂解多糖单加氧酶进行了密码子优化及定点突变，得到了一种裂解多糖单加氧酶，基于此，本发明提供了一种高表达裂解多糖单加氧酶的基因工程菌，实现了真菌来源裂解多糖单加氧酶在原核系统菌株中的异源表达，且可溶性表达水平高。
本发明提供一种来自于药用植物马蓝的黄素单加氧酶基因ScFMO及其制备方法、多肽、重组载体及其构建方法、工程细胞或工程菌，以及生产靛蓝的方法。本申请中的来自于药用植物马蓝的黄素单加氧酶基因ScFMO，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。该基因编码成一个新型的黄素单加氧酶，氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，黄素单加氧酶能催化吲哚生产靛蓝。通过构建表达质粒，获得生产靛蓝的大肠杆菌工程菌，新型黄素单加氧酶基因在大肠杆菌表达系统中进行表达，得到大肠杆菌黄素单加氧酶重组菌株，重组菌株经过发酵后，能够将培养基中的吲哚高效地转化为靛蓝。
本发明克隆表达并公开了一种来源于假单胞菌的单加氧酶PMO‑6814及其应用。具体涉及从假单胞菌基因组中克隆单加氧酶PMO‑6814的编码基因，并构建表达载体导入大肠杆菌内，得到的一种具有单加氧酶活性的基因工程菌。该单加氧酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，相应的编码基因核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
本发明提供了一种单加氧酶基因phzO、编码蛋白质、基因工程菌株及其构建方法和应用。所述单加氧酶基因phzO的编码序列如SEQ ID NO:1所示，所述单加氧酶基因phzO的上游非编码区的DNA序列如SEQ ID NO:2所示。编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。本发明将绿针假单胞菌LX24单加氧酶基因phzO基因及其上游非编码区替换至绿针假单胞菌GP72AN的內源phzO位点，使2‑羟基吩嗪的产量提高了17％，转化率提高24％。
本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种异丁香酚单加氧酶操纵子基因及其重组载体和重组假单胞菌。本发明所述异丁香酚单加氧酶操纵子基因具有SEQ ID NO:1所示核苷酸序列或在SEQ ID NO:1所示核苷酸序列基础上依照假单胞菌的密码子偏好性优化后的核苷酸序列。本发明提供了一段异丁香酚单加氧酶操纵子基因以及依照假单胞菌密码偏好性优化后的操纵子基因，该操纵子基因通过基因工程技术应用于重组载体和重组工程菌构建中，所获得的重组假单胞菌对异丁香酚、香草醛、阿魏酸等底物或产物的耐受性较高，且应用于香兰素生产中无需添加有毒的诱导剂，香草兰收率达到70％以上，同时异丁香酚单加氧酶具备较高酶活。
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Baeyer‑Villiger单加氧酶及其用途。一种Baeyer‑Villiger单加氧酶，该酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供一种新型的Baeyer‑Villiger单加氧酶及表达该酶的工程菌；该酶能够催化香紫苏醇衍生物发生Baeyer‑Villiger氧化反应，为龙涎醚的生产提供了新途径。
