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[发明专利]多重引物组及利用该引物组基于高通量测序构建人类T细胞免疫组库的方法-CN201811597549.8在审
发明人：李艳艳;尚小云;张金凤;马立敏;张通 -专利权人：山东艾克韦生物技术有限公司
申请日： 2018-12-26 - 公布日： 2019-04-02 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种多重引物组及利用该引物组基于高通量测序构建人类T细胞免疫组库的方法，属于分子生物学检测领域。本发明的多重引物组，由一组上游引物和一条下游引物组成，所述上游引物由接头1、引物条码1、测序引物1、针对可变区V区设计的特异性引物V1‑V24串联而成；所述下游引物由接头2、引物条码2、测序引物2、针对恒定区C区设计的特异性引物Vc串联而成；引物条码1和引物条码2的序列不同；测序引物1与测序引物2序列相同。
构建测序引物条码引物高通量测序多重引物免疫组库特异性引物人类T细胞上游引物下游引物引物组串联分子生物学检测多样性信息全面覆盖恒定区可变区

[发明专利]多重引物组及利用该引物组基于高通量测序构建人类B细胞免疫组库的方法-CN201811597255.5有效
发明人：李艳艳;邱盟轩;靖相密;汪朝晖 -专利权人：山东艾克韦生物技术有限公司
申请日： 2018-12-26 - 公布日： 2021-11-26 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种多重引物组及利用该引物组基于高通量测序构建人类B细胞免疫组库的方法，属于分子生物学检测领域。本发明的多重引物组，由一组上游引物和一组下游引物组成，上游引物由接头1、引物条码1、测序引物1、针对可变区V区设计的特异性引物V1‑V18串联而成；下游引物由接头2、引物条码2、测序引物2、针对IgA、lgD、IgE、IgG、IgM的基因恒定区C区保守序列设计的特异性引物Va、Vd、Ve、Vg、Vm串联而成；引物条码1和引物条码2序列不同；测序引物1与测序引物2序列相同。
多重引物利用基于通量构建人类细胞免疫方法

[发明专利]一种提高PCR扩增效率的引物设计方法及应用-CN201910892812.4在审
发明人：姜成涛 -专利权人：北京金马晟和科技有限公司
申请日： 2019-09-20 - 公布日： 2020-01-07 - 主分类号： C12Q1/6811 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高PCR扩增效率的引物设计方法及应用，所述引物设计方法包括以下步骤：在待测基因的一侧设计两条或两条以上的同向扩增的引物，或在待测基因的两侧分别设计两条或两条以上的同向扩增的引物，其中，位于待测基因同一侧的两条或两条以上的同向扩增的引物，其3’端部分重叠或者不重叠，其5’端完全重叠、部分重叠或不重叠。利用本发明方法设计的引物，能够事先预防和避免引物和待检模板的结合区存在碱基突变时导致PCR效率急剧下降乃至失败，解决因上述突变而导致的等位基因缺失和扩增不平衡问题，提高PCR成功率。此外，利用本发明方法可以直接应用公开序列来设计引物，大大降低了引物设计难度。
引物扩增待测基因引物设计同向不重叠等位基因缺失碱基突变设计引物结合区成功率突变应用失败预防

[发明专利]一种用于检测基因变异的PCR引物设计方法及试剂盒-CN201210448690.8无效
发明人：楼敬伟;李丙亮;谢彩霞 -专利权人：上海宝藤生物医药科技有限公司
申请日： 2012-11-09 - 公布日： 2013-02-06 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于检测基因变异的PCR引物设计方法及试剂盒，该引物设计方法包括：在基因同源和保守的区域设计正向PCR通用引物，所述正向PCR通用引物的5’端附加一段与基因变异区域野生型完全互补6~20个碱基的寡核苷酸；在变异基因的位置设计与变异基因完全互补的反向引物；所述的试剂盒，包括：dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶、Tris-KCl体系、引物和探针。本发明的引物设计方法易于设计、可控且扩增灵敏度高；本发明的试剂盒灵敏度高、特异性强、时间短、使用操作步骤少。
一种用于检测基因变异 pcr 引物设计方法试剂盒

[发明专利]用于检测羊源性成分的LAMP引物及其设计方法-CN201610651667.7在审
发明人：徐淑菲;孔繁德;唐泰山;苗丽;张秀平 -专利权人：厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心
申请日： 2016-08-10 - 公布日： 2016-10-12 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：用于检测羊源性成分的LAMP引物及其设计方法，涉及羊源性成分的检测。所述用于检测羊源性成分的LAMP引物的设计方法：步骤1，登陆NCBI网站，查找猪、羊、牛等动物的线粒体基因序列；步骤2，用DNAman软件对各种动物的线粒体基因序列进行比对，找出羊的特异性序列；步骤3，设计引物，引物的设计原则包括Tm值、引物末端的安定性、GC含量、引物之间的距离、二级结构；步骤4，建立LAMP检测方法，优化引物工作浓度、内外引物浓度比和反应温度。
用于检测羊源性成分 lamp 引物及其设计方法

[发明专利]用于检测牛源性成分的LAMP引物及其设计方法-CN201610652748.9在审
发明人：徐淑菲;孔繁德;唐泰山;苗丽;张秀平 -专利权人：厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心
申请日： 2016-08-10 - 公布日： 2016-10-26 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：用于检测牛源性成分的LAMP引物及其设计方法，涉及牛源性成分的检测。所述用于检测牛源性成分的LAMP引物的设计方法，包括以下步骤：步骤1，登陆NCBI网站，查找猪、羊、牛等动物的线粒体基因序列；步骤2，用DNAman软件对各种动物的线粒体基因序列进行比对，找出牛特异性序列；步骤3，设计引物，引物的设计原则包括Tm值、引物末端的安定性、GC含量、引物之间的距离、二级结构；步骤4，建立LAMP检测方法，优化引物工作浓度、内外引物浓度比和反应温度。
用于检测牛源性成分 lamp 引物及其设计方法

[发明专利]基于特征序列设计引物的方法及系统-CN202110754999.9在审
发明人：易康;安泰然 -专利权人：南京诺因生物科技有限公司
申请日： 2021-07-01 - 公布日： 2021-09-17 - 主分类号： C12Q1/6811 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于特征序列设计引物的方法，其步骤包括：将阳性序列和阴性序列进行整合；将阳性序列分割成适合进行比对的片段，并记录分割的位置；使用blast对阴性序列进行建库，然后将片段化的阳性序列比对到阴性序列进行筛选，得到一致性较低的特异性序列；使用primer3对特异性序列进行引物设计，得到上游引物、下游引物和探针的序列及位置；使用blast比对软件、阴性序列数据库、NCBI的nt数据库对得到的引物和探针进行再次筛选，并取引物和探针的交集；通过目录输出比对结果。并公开了基于特征序列设计引物的系统。本发明可以一步完成从基因组到目标序列和引物片段的引物设计。
基于特征序列设计引物方法系统

[发明专利]用于同时检测沙门菌枸橼菌变形菌和爱德华菌的多重PCR引物及其设计方法-CN201310072599.5有效
发明人：陈琼;孔繁德;徐淑菲;赵冉;周昱;杨涛;陈永锋;连玉华 -专利权人：厦门市农产品质量安全检验测试中心;厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心
申请日： 2013-03-06 - 公布日： 2013-06-12 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：用于同时检测沙门菌枸橼菌变形菌和爱德华菌的多重PCR引物及其设计方法，涉及沙门氏菌等的检测。沙门氏菌引物对应的PCR扩增片段为526bp，弗氏枸橼酸杆菌引物对应的PCR扩增片段为161bp，奇异变形杆菌引物对应的PCR扩增片段为396bp，迟缓爱德华菌引物对应的PCR扩增片段为330bp。1设计多重PCR引物组合；2对引物组合中的引物进行筛选，保留不能合成引物二聚体的引物；3判断所保留引物的竞争优劣状态，将步骤2保留不能合成引物二聚体的引物的GC%和碱基数进行比较，选取GC含量高的判断为竞争状态优势引物，转步骤5；否则转步骤4；4再次筛选竞争状态劣的引物；5对竞争状态优引物扩增。
用于同时检测沙门枸橼变形爱德华多重 pcr 引物及其设计方法

[发明专利]同时检测BRCA1/2外显子序列和化疗用药位点的引物及应用-CN201910745642.7在审
发明人：王雨倩;江凌 -专利权人：上海艾汭得基因科技有限公司
申请日： 2019-08-13 - 公布日： 2020-01-21 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：一种同时检测BRCA1/2外显子序列和化疗用药位点位点的引物，包括：为BRCA1设计的外显子扩增引物对、为BRCA2设计的外显子扩增引物对、针对SNP位点设计的特异性引物对；每一种外显子扩增引物对分别分为两组，且同一基因的每一组引物内部无扩增区域重叠；每一组引物对中，第一部分引物上游引物5’端添加SEQ ID.NO1，下游5’端添加SEQ ID.NO2；第二部分引物上游引物5’端添加SEQ ID.NO2，下游5’端添加SEQ ID.NO1；BRCA1基因的一组引物对与BRCA2基因的一组引物对随机组合，组成两个引物组对；所述特异性引物上游引物的5’端添加SEQ ID.NO1，在所述特异性引物下游引物5’端添加
引物特异性引物外显子扩增上游引物检测外显子序列癌症化疗区域重叠随机组合下游引物引物组点位扩增两组通量位点化疗基因申请

[发明专利]一种测序文库的制备方法及其应用-CN202110450718.0在审
发明人：郑建萍;吕天琦 -专利权人：中国科学院宁波材料技术与工程研究所慈溪生物医学工程研究所;中国科学院宁波材料技术与工程研究所
申请日： 2021-04-25 - 公布日： 2022-10-25 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：所述制备方法包括：根据目标扩增子设计并合成三组引物，分别包括融合引物、第一通用引物和第二通用引物，所述融合引物包括测序引物序列和根据目标扩增子设计的特异性引物序列；将三组引物按照0.1～10:1:1的摩尔比混合，形成混合引物；以目标样本的DNA为模板，采用所述混合引物对目标样本的DNA进行多重PCR扩增反应，获得目标扩增子的测序文库。本发明的制备方法通过设计使用三组引物组合，可通过一次PCR扩增反应，通过特殊的引物组合使非特异性扩增及引物二聚体的产生可能性降至最低，进而大大提高文库制备的效率，并提高检测的灵敏度，大大降低因多步纯化导致的文库损失
一种序文制备方法及其应用

[发明专利]一种茎环引物辅助的等温核酸扩增方法-CN202110361417.0有效
发明人：罗光成;易婷婷;郭晓兰;张国元 -专利权人：川北医学院附属医院
申请日： 2021-04-02 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：一种茎环引物辅助的等温核酸扩增技术，其特征在于，按下列步骤进行：a、SPA的引物设计：首先针对模板设计两条普通引物，即正向引物FP和反向引物BP；b、设计好普通引物后，再在FP和BP的5’端添加茎环序列，形成一对茎环引物，即正向茎环引物SFP和反向茎环引物SBP；c、SPA引物混合液液配制：SPA的扩增引物由普通引物FP、BP和茎环引物SFP、SBP混合而成；d、SPA缓冲液配制2×SPAMix：称取氯化钾
一种引物辅助等温核酸扩增方法

[发明专利]一种基于k-mer算法的引物设计方法及系统-CN202010167423.8有效
发明人：邓晔;吴悦妮 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心;中国科学院大学
申请日： 2020-03-11 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： G16B15/00 文献下载
摘要：本发明提供一种基于k‑mer算法的引物设计方法及系统，该方法包括：构建功能基因核酸序列数据库，将数据库中的核酸序列分别切割为k‑mers；按照k‑mer出现频次从高到低选择若干k‑mers，作为引物备选k‑mers；将引物备选k‑mers中的overlap＞x的k‑mers进行合并，再在合并后的引物备选k‑mers中按照频次从高到低选择多条k‑mers作为初步引物；在覆盖度＞1％的k‑mers中搜索与每条初步引物存在一个碱基之差的k‑mers，并将搜索到的k‑mers与相应初步引物以简并碱基的形式合并，得到简并引物；对简并引物分别进行基本信息评价并计算全部简并引物两两配对后的扩增产物长度，根据基本信息评价结果和扩增产物长度筛选成对引物；该方法能够避开序列比对的繁琐步骤，大大提升了引物设计时间，且设计引物具有更高的覆盖度。
一种基于 mer 算法引物设计方法系统

[发明专利]Y染色体AZF区域微缺失检测的方法、引物组合物及试剂盒-CN202110945887.1有效
发明人：费嘉;安松坡;刘沙沙;张倩;王莹 -专利权人：北京嘉宝仁和医疗科技股份有限公司;河南嘉宝智和医疗科技有限公司
申请日： 2021-08-17 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明提供了一种Y染色体AZF区域微缺失检测的方法、引物组合物及试剂盒，引物组合物包括第一引物组合物、第二引物组合物、第三引物组合物、end引物，第一引物组合物依据至少1个常染色体上若干个特异性内参位点设计形成；第二引物组合物依据Y染色体上至少1个特异性内参位点设计形成；第三引物组合物依据Y染色体AZF区的至少1个引物位点设计形成。引物组合物中引入了常染色的特异性内参位点设计引物，可有效避免由于Y染色体的拷贝数≠1引起的检测错误，同时本发明的方法可同时对X和Y染色体提进行检测，大大提高了Y染色体AZF区域微缺失检测的准确度。
染色体 azf 区域缺失检测方法引物组合试剂盒

[发明专利]病原物种特异PCR引物优化设计方法-CN202110023840.X有效
发明人：梁相志;李振中;周水莲;何祥鹏;潘吾思;胥慧;郭昊;李诗濛;任用 -专利权人：江苏先声医疗器械有限公司;江苏先声诊断技术有限公司
申请日： 2021-01-08 - 公布日： 2021-07-09 - 主分类号： G16B20/00 文献下载
摘要：本发明提供一种病原物种特异PCR引物优化设计方法。所述引物优化设计方法使用K‑mer法鉴定物种的特异区间，基于特异片段作引物设计，确保了引物的物种特异性，避免了使用单一基因组造成的菌株特异性。
病原物种特异 pcr 引物优化设计方法

[发明专利]一种快速构建扩增子文库的融合引物组合-CN201710219007.6在审
发明人：阎海;王思振;焦宇辰;徐大勇;郑乔松;师晓 -专利权人：北京泛生子医学检验实验室有限公司
申请日： 2017-04-05 - 公布日： 2017-06-30 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速构建扩增子文库的融合引物组合，其包括根据目标扩增子设计的上游融合引物和根据目标扩增子设计的下游融合引物，其中所述根据目标扩增子设计的上游融合引物包括按照5’到3’的方向依次排列的第一接头序列、barcode序列、第二接头序列和根据目标扩增子设计的特异性上游引物序列；所述根据目标扩增子设计的下游融合引物包括按照5’到3’的方向依次排列的第三接头序列和根据目标扩增子设计的特异性下游引物序列。使用该融合引物组合可以简便、快速的经1步PCR构建扩增子文库，且由于在PCR起始时就引入barcode，使得样本及文库间交叉污染的可能性大大降低，并能简化实验场地分区的要求，该融合引物组合还能将单个样品建立文库的成本控制在
一种快速构建扩增文库融合引物组合