本发明公开了一种斑节对虾细胞周期蛋白E基因序列及其制备方法和用途，旨在提供一种斑节对虾细胞周期蛋白E基因序列，该序列用于检测肿瘤是否扩散或者作为靶位点设计治疗肿瘤的药物或者调节斑节对虾卵巢发育过程，有利于人工催熟斑节对虾细胞；其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；制备方法通过提取斑节对虾总RNA，来cDNA第一链的合成，再以合成的第一链cDNA作为模板，利用cDNA末端快速扩增技术对目的基因的5ˊ和3ˊ末端进行PCR扩增；然后对斑节对虾细胞周期蛋白E基因的测定，最后以进行斑节对虾细胞周期蛋白E基因分布和表达测定；属于分子生物学中基因克隆领域。
本发明公开了一种斑节对虾细胞周期蛋白H基因序列及其制备方法和用途，旨在提供斑节对虾细胞周期蛋白H基因序列，可以作为设计抗肿瘤药物的靶位点或者调节斑节对虾卵巢发育过程，有利于人工繁殖斑节对虾细胞；该H基因序列的核苷酸如SEQ ID NO：1所示；制备方法是通过提取斑节对虾总RNA来cDNA第一链的合成，再以合成的第一链cDNA作为模板，利用降落PCR法，用接头引物和cycH-F1、cycH-F2对目的基因的3ˊ末端进行两次PCR扩增；然后对斑节对虾细胞周期蛋白H基因的测定，最后进行对斑节对虾细胞周期蛋白H基因分布和表达测定；属于分子生物学中基因克隆领域。
本发明公开了一种斑节对虾细胞周期蛋白H的基因序列及其制备方法和用途，旨在提供斑节对虾细胞周期蛋白H基因序列及其制备方法，可以作为设计抗肿瘤药物的靶位点或者调节斑节对虾卵巢发育过程，有利于人工繁殖斑节对虾细胞；该H基因序列的核苷酸如SEQ ID NO：1所示；制备方法是通过提取斑节对虾总RNA来进行cDNA第一链的合成，再以合成的第一链cDNA作为模板，利用降落PCR法，用接头引物和cycH-F1、cycH-F2对目的基因的3ˊ末端进行两次PCR扩增；然后对斑节对虾细胞周期蛋白H基因进行测定，最后进行斑节对虾细胞周期蛋白H基因分布和表达测定；属于分子生物学中基因克隆领域。
本发明公开了一种斑节对虾细胞周期蛋白E的基因序列及其制备方法和用途，旨在提供一种斑节对虾细胞周期蛋白E基因序列及其制备方法，该序列用于检测肿瘤是否扩散或者作为靶位点设计治疗肿瘤的药物或者通过其在斑节对虾卵巢发育过程中的作用进而用来探究斑节对虾人工催熟的方法；其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；制备方法通过提取斑节对虾总RNA，来进行cDNA第一链的合成，再以合成的第一链cDNA作为模板，利用cDNA末端快速扩增技术对目的基因的5ˊ和3ˊ末端进行PCR扩增；然后对斑节对虾细胞周期蛋白E基因进行测定，最后确定斑节对虾细胞周期蛋白E基因分布和表达测定；属于分子生物学中基因克隆领域。
本发明提供一种用于在对虾细胞中高效转录非编码RNA的启动子，所提供的启动子的核苷酸序列为SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2。本发明从南美白对虾基因组中筛选和克隆得到了候选启动子，利用VP28‑假型昆虫杆状病毒作为递送载体，以EGFP基因为靶基因，分别构建上述启动子驱动的RNAi VP28‑假型重组杆状病毒递送系统，比较和分析其在Sf9细胞和对虾血淋巴细胞中对shEGFP的驱动活性，发现两个启动子具有较高的转录活性，且在Sf9细胞中对EGFP的干扰效率分别为15％和8％，在对虾原代培养血淋巴细胞中可达19％和14％。本发明所提供的2个高效的对虾U6启动子为构建对虾细胞CRISPR/Cas9基因编辑体系奠定了技术基础。
