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[发明专利]一种奶牛乳腺上皮细胞永生化方法-CN201510611756.4在审
发明人：赵国琦;詹康;霍永久;林淼;刘明美;郭静 -专利权人：扬州大学
申请日： 2015-09-23 - 公布日： 2015-12-23 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供了一种奶牛乳腺上皮细胞永生化方法，其特征在于，在采用HPV E6和E7病毒感染原代奶牛乳腺上皮细胞使其永生化时，添加泛嗜性和兼嗜性病毒颗粒，从而增加病毒感染效率。本发明还提供了一种建立永生化奶牛乳腺上皮细胞系的方法，包括以下步骤：1)对奶牛乳腺组织在培养瓶中进行组织块原代培养；2)采用上述的病毒法感染原代奶牛乳腺上皮细胞，以使其永生化；3)筛选阳性克隆，进行细胞系的培养使用这些方法可以高效率地对奶牛乳腺上皮细胞进行永生化，并且建立生长速度快和稳定连续传代的奶牛乳腺上皮细胞系，从而获得具有生理功能的奶牛乳腺上皮细胞，为奶牛乳腺上皮细胞的泌乳营养调控和奶牛乳房炎的发病机制研究提供实验细胞素材
一种奶牛乳腺上皮细胞永生方法

[发明专利]奶牛乳腺上皮细胞损伤模型及其构建方法和应用-CN201910277982.1在审
发明人：童津津;张华;蒋林树;杨德莲;熊本海 -专利权人：北京农学院
申请日： 2019-04-08 - 公布日： 2019-10-25 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了奶牛乳腺上皮细胞损伤模型及其构建方法和应用。本发明发现无乳链球菌不仅可以黏附和侵入奶牛乳腺上皮细胞，还对奶牛乳腺上皮细胞具有明显的毒性作用，引起细胞发生变形和断裂，诱导细胞发生凋亡，最终导致细胞发生坏死；因此，本发明提供了一种奶牛乳腺上皮细胞损伤模型的构建方法，包括：用无乳链球菌体外感染奶牛乳腺上皮细胞后在CO₂细胞培养箱中培养，即得奶牛乳腺上皮细胞损伤模型。本发明所构建的奶牛乳腺上皮细胞损伤模型为研究无乳链球菌所导致的奶牛乳房炎的分子机制奠定了基础。
奶牛乳腺上皮细胞损伤模型构建无乳链球菌细胞发生奶牛乳房炎细胞培养箱毒性作用分子机制体外感染诱导细胞凋亡坏死应用变形断裂侵入发现研究

[发明专利]一种烟酸通过GPR109A受体制备缓解奶牛乳腺纤维化药物的应用-CN202110851372.5有效
发明人：付守鹏;柳巨雄;阚兴池;郭文晋;徐平;黄雅萍;曹宇 -专利权人：吉林大学
申请日： 2021-07-27 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种烟酸通过GPR109A受体制备缓解奶牛乳腺纤维化药物的应用，包括以下步骤：S1、体内和体外实验对比在正常奶牛和纤维化倾向奶牛乳腺中GPR109A受体表达差异情况的分析，明确GPR109A受体在乳腺纤维化奶牛乳腺重高表达。S2、奶牛乳腺上皮细胞中纤维化表型的检测：具体分别在奶牛乳腺上皮细胞中检测TGF‑β1、α‑SMA、Collagen2、E‑cadherin、在烟酸缓解后的变化情况。本发明制定全新的奶牛乳腺纤维化倾向的缓解策略，通过收集正常和乳腺纤维化的乳腺组织，分离原代奶牛乳腺上皮细胞，利用分子生物学方法全面的评估了烟酸对奶牛乳腺纤维化倾向的缓解效果。烟酸能够有效减少乳腺上皮细胞中纤维化表型的升高，从而达到保护乳腺纤维化疾病发生的目的。
一种烟酸通过 gpr109a 受体制备缓解奶牛乳腺纤维化药物应用

[发明专利]一种奶牛乳腺细胞体外分离培养方法-CN200810050853.0无效
发明人：刘春龙;李忠秋;孙海霞;李长胜 -专利权人：中国科学院东北地理与农业生态研究所
申请日： 2008-06-23 - 公布日： 2008-11-12 - 主分类号： C12N5/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种奶牛乳腺细胞体外分离培养方法，它涉及细胞体外分离培养技术领域，它解决了分离培养奶牛乳腺上皮细胞时不能将奶牛乳腺纤维细胞和上皮细胞很好分离的问题。通过直接采取自当地屠宰厂当日屠宰的奶牛乳腺组织，利用成纤维细胞和上皮细胞对胰蛋白酶敏感性的不同及贴壁时间的差异，采用组织块培养法和胰蛋白酶分级消化法分离培养奶牛乳腺上皮细胞，将奶牛乳腺细胞纯化，经角蛋白本发明提供了一种分离培养奶牛乳腺上皮细胞时最佳胰蛋白酶浓度，且较好地将奶牛乳腺纤维细胞和上皮细胞分离。
一种奶牛乳腺细胞体外分离培养方法

[发明专利]一种奶牛乳腺上皮细胞的体外炎症模型及其构建方法和应用-CN202210352760.3在审
发明人：王旭荣;王贵波;杨峰;申纪饶;李宏胜;张世栋;李锦宇;张康 -专利权人：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所
申请日： 2022-04-06 - 公布日： 2022-07-08 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供一种奶牛乳腺上皮细胞的体外炎症模型，是凝固酶阴性葡萄球菌侵染奶牛乳腺上皮细胞的损伤病理模型。本发明以奶牛乳腺上皮细胞为研究对象，建立了以奶牛乳腺上皮细胞为载体，采用凝固酶阴性葡萄球菌侵染奶牛乳腺上皮细胞的方法，建立一种模拟细菌感染奶牛乳房细胞的体外炎症模型，确定了适宜的感染复数MOI和侵染时间，优化并确定凝固酶阴性葡萄球菌侵染奶牛乳腺上皮细胞的检测指标。本模型稳定、可靠，为治疗细菌尤其是凝固酶阴性葡萄球菌引起的奶牛乳房炎的体外药物筛选研究，以及细菌尤其是凝固酶阴性葡萄球菌的致病机制研究奠定了基础。
一种奶牛乳腺上皮细胞体外炎症模型及其构建方法应用

[实用新型]奶牛乳头光学灭菌装置-CN200720116310.5无效
发明人：程龙;程建民 -专利权人：程建民
申请日： 2007-06-01 - 公布日： 2008-04-16 - 主分类号： A61L2/08 文献下载
摘要：该实用新型涉及一种奶牛乳头灭菌装置，确切地说是一种奶牛乳头光学灭菌装置。型腔一端设置有光源，光源后设置开关电路和电源其结构简单、使用方便快捷、容易制造、成本低，对奶牛乳头照射后，可有效的杀灭引起奶牛乳头发炎的细菌，防止奶牛乳腺炎的发生。改变了传统奶牛乳腺炎的治疗方法，避免以往由于使用抗生素治疗奶牛乳腺炎使得牛奶中含有抗生素的问题。采用该装置不用任何药物，即迅速、早期杀灭奶牛乳头上引起奶牛乳腺炎的细菌从而，防止牛奶中含有抗生素的问题。
奶牛乳头光学灭菌装置

[实用新型]奶牛乳腺炎监控装置-CN201120015057.0无效
发明人：王应军;荆功宾 -专利权人：山东长运光电科技有限公司
申请日： 2011-01-18 - 公布日： 2011-10-19 - 主分类号： A61B5/01 文献下载
摘要：本实用新型奶牛乳腺炎监控装置是利用Pt1000温度传感器高精度特性和奶牛患乳腺炎后乳腺表面温度会升高的特性，对奶牛乳腺表面温度进行监控并且把温度信号传递到单片机，如果奶牛乳腺表面温度异常就回报警，达到对奶牛乳腺疾病进行监控的目的
奶牛乳腺炎监控装置

[发明专利]一种用于奶牛乳腺炎的药物组合物及其制备方法-CN202211572577.0在审
发明人：李晓;王学方;王伟;陈玲;宁二娟;于立芹;张丽先;李智宁;魏悦;魏磊 -专利权人：河南省纳普生物技术有限公司;河南省科学院
申请日： 2022-12-08 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： A61K36/60 文献下载
摘要：一种用于奶牛乳腺炎的药物组合物，由以下质量百分比的原料制备而成：艾叶精油2‑3份、艾叶总酚5‑9份、构树叶总黄酮3‑6份，一种用于奶牛乳腺炎的药物组合物制备方法包括以下步骤：步骤1：提取艾叶精油；步骤2：制备艾叶总酚；步骤3：制备构树叶总黄酮；步骤4：艾叶精油、艾叶总酚、构树叶总黄酮按照一定比例组合，该组合即为奶牛乳腺炎的药物组合物。该奶牛乳腺炎的药物组合物可直接制成相应的制剂用于奶牛乳房浸洗、乳头灌注或涂抹于奶牛乳房上，用于奶牛乳腺炎的预防与治疗。
一种用于奶牛乳腺炎药物组合及其制备方法

[发明专利]二氢杨梅素在拮抗奶牛乳腺上皮细胞热应激损伤中的应用-CN201911084958.2有效
发明人：陈坤琳;仲跻峰;钱勇;王慧利;邢光东;赵芳 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2019-11-08 - 公布日： 2023-02-24 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种二氢杨梅素在拮抗奶牛乳腺上皮细胞热应激损伤中的应用，包括奶牛乳腺上皮细胞对数生长期细胞的培养、奶牛乳腺上皮细胞热应激处理、热应激处理后细胞存活率检测以及二氢杨梅素对奶牛乳腺上皮细胞热应激损伤的调控验证本发明致力于阐明二氢杨梅素对高温诱导奶牛乳腺上皮细胞热应激损伤的拮抗作用和机制，有助于深入了解高温环境对正常奶牛乳腺上皮细胞热应激损伤和二氢杨梅素拮抗细胞凋亡的作用机理及内在联系。
杨梅拮抗奶牛乳腺上皮细胞应激损伤中的应用

[发明专利]大肠杆菌感染单层致密奶牛乳腺上皮细胞模型的构建方法-CN202010208991.8在审
发明人：李胜利;郑宇慧;刘钢;王蔚;曹志军;杨红建;王雅晶 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2020-03-23 - 公布日： 2020-07-28 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供一种大肠杆菌感染单层致密奶牛乳腺上皮细胞模型的构建方法。所述细胞模型为感染了大肠杆菌ATCC 25922的单层致密奶牛乳腺上皮细胞，且感染时单层致密奶牛乳腺上皮细胞的跨膜电阻值达到400Ω·cm2。本发明提供的大肠杆菌感染单层致密奶牛乳腺上皮细胞模型，可作为检测大肠杆菌感染单层致密奶牛乳腺上皮细胞的黏附率及其对奶牛乳腺上皮细胞紧密连接蛋白表达的影响进行应用，也可在大肠杆菌诱发乳房炎对乳腺组织及乳腺上皮细胞的损伤机制和抗生素替代品的筛选等相关领域广泛应用
大肠杆菌感染单层致密奶牛乳腺上皮细胞模型构建方法

[发明专利]麦蓝菜种子提取物在促进奶牛泌乳中的应用-CN201611018625.6在审
发明人：袁肖寒;张明辉;高学军;敖金霞;仇有文;刘营;于艳波 -专利权人：东北农业大学
申请日： 2016-11-11 - 公布日： 2017-03-15 - 主分类号： A61K36/36 文献下载
摘要：本发明公开了一种麦蓝菜种子提取物在促进奶牛泌乳中的应用。本发明保护麦蓝菜种子提取物的应用，为如下(1)‑(6)中的至少一种(1)促进奶牛泌乳；(2)促进奶牛乳腺上皮细胞分泌乳糖；(3)促进奶牛乳腺上皮细胞分泌β‑酪蛋白；(4)促进奶牛乳腺上皮细胞分泌甘油三酯；(5)促进奶牛乳腺上皮细胞中Stat5基因表达；(6)提高奶牛乳腺上皮细胞中Stat5蛋白的表达量和/或活性。
菜种提取物促进奶牛乳中应用

[发明专利]一种奶牛乳腺炎相关的lncRNA及其应用-CN202111300489.0在审
发明人：孙雨佳;赵天奇;马瑶瑶;储双凤;崔春雨;杨章平 -专利权人：扬州大学
申请日： 2021-11-04 - 公布日： 2022-06-10 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明属于分子生物学技术领域，提供了一种奶牛乳腺炎相关的lncRNA及其应用。发明利用去除核糖体RNA技术，分析比较荷斯坦奶牛正常乳腺组织和炎症型乳腺组织中基因表达谱的差异，鉴定筛选出与奶牛乳腺炎相关的关键差异表达lncRNA BMNCR。上述lncRNA BMNCR在炎症型乳腺组织中被诱导表达，且在一定程度上消除炎症反应，参与奶牛乳腺炎发生发展过程中的自体保护机制。因此，该lncRNA BMNCR的发现有助于理解奶牛乳腺炎发生发展的分子调控机理，为开发奶牛乳腺炎靶向药物和开展抗性选育奠定实验基础，具有重要应用前景。
一种奶牛乳腺炎相关 lncrna 及其应用

[发明专利]一种奶牛乳腺监测系统和方法-CN201711084608.7在审
发明人：温九江;袁松平 -专利权人：广西小草信息产业有限责任公司
申请日： 2017-11-07 - 公布日： 2018-04-13 - 主分类号： A61B5/01 文献下载
摘要：本发明涉及一种奶牛乳腺监测系统和方法，该系统包括ZigBee监测终端和服务器；ZigBee监测终端，用于采集奶牛的乳腺的温度信号、乳汁的含糖量信号、pH值信号和金黄色葡萄糖菌含量信号，并生成监测信息，监测信息包括温度信号、含糖量信号、pH值信号、金黄色葡萄糖菌含量信号和ZigBee监测终端的终端编号；服务器，用于根据监测信息和预存的奶牛乳腺参数模型确定奶牛乳腺是否正常，当监测到奶牛乳腺异常时，生成提示信号，并将提示信号发送至奶牛管理人员终端本发明提供的技术方案可以实现对大规模养殖的奶牛的乳腺健康情况进行准确监测，在奶牛乳腺发生异常时，可以快速发现并及时处理，减小病疫危害，提高奶制品质量。
一种奶牛乳腺监测系统方法

[发明专利]敲除乳腺上皮细胞NLRP3炎性体接头蛋白ASC基因的方法-CN201711211382.2在审
发明人：朱要宏;吴琼;才冬杰;段聪;王九峰 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2017-11-28 - 公布日： 2019-06-04 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于CRISPR/Cas9技术敲除牛乳腺上皮细胞NLRP3炎性体接头蛋白ASC基因的方法。根据牛乳腺上皮细胞NLRP3炎性体接头蛋白ASC基因序列，构建基于CRISPR/Cas9系统的sgRNA表达载体，以此作为ASC基因打靶载体，转入牛乳腺上皮细胞中，获得ASC基因敲除的牛乳腺上皮细胞，可作为理想的用于研究奶牛乳腺炎性损伤以及奶牛乳腺炎的细胞模型，在奶牛乳腺炎的诊断试剂和药物筛选方面发挥应用。
牛乳腺上皮细胞奶牛乳腺炎接头蛋白敲除基因打靶载体乳腺上皮细胞表达载体基因敲除基因序列细胞模型药物筛选诊断试剂基因构建损伤转入应用研究

[发明专利]建立奶牛乳腺上皮细胞泌乳模型的方法-CN200910072961.2无效
发明人：佟慧丽;高学军;李庆章;林叶 -专利权人：东北农业大学
申请日： 2009-09-23 - 公布日： 2010-02-24 - 主分类号： C12N5/06 文献下载
摘要：本发明提供一种为乳蛋白基因表达调控机制的研究及乳腺表达载体的检测提供有利条件的建立奶牛乳腺上皮细胞泌乳模型的方法。实验方法步骤如下：奶牛乳腺上皮细胞的原代培养及鉴定；HPLC法测定乳糖的分泌情况；HPLC法测定β-酪蛋白的分泌情况；细胞的冻存和复苏。本发明采用组织块法对不同时期的奶牛乳腺上皮细胞进行培养，与酶消化等其他乳腺上皮细胞原代培养的方法相比，其不影响乳腺上皮细胞的活性，且培养成本十分低廉，操作十分简便。本发明实现了正常培养的奶牛乳腺上皮细胞系的延续，从而使大量珍贵的奶牛乳腺组织材料获得了妥善有效的保存。本发明为奶牛乳腺不同发育时期泌乳机理的研究提供了重要的实验材料和技术平台。
建立奶牛乳腺上皮细胞模型方法

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