本发明涉及一种用于快速检测CSFV、GETV、JEV的多重RT‑PCR引物组,所述的多重RT‑PCR引物组是由用于检测CSFV的引物、用于检测GETV的引物和用于检测JEV的引物组成,该多重RT‑PCR引物组的序列如SEQ ID NO:1~6所示;所述的检测不以疾病诊断和/或治疗为目的。本发明还公开了快速检测CSFV、GETV、JEV的多重RT‑PCR方法,该方法实现在同一个反应体系中同时扩增三种病毒,减少了操作次数,极大的避免了交叉污染。该方法对动物源性食品、产品或有关样品中CSFV、GETV和JEV的检测与鉴别、公共卫生及流行病学调查等方面具有重要的应用价值。
本发明公开了一种用于T细胞白血病微小残留病检测的方法,包括多重PCR引物,所述多重PCR引物包括上游引物和下游引物,所述上游引物为SEQ ID N081~SEQ ID N0112序列组成的上游引物组;所述下游引物为SEQ ID N0114核苷酸序列组成的;检测方法包括以下步骤S1,提取人外周血单个核细胞获得总RNA;S2,将获得的RNA采用一步RT‑PCR的方法,进行多重PCR反应,获得多重PCR产物;S3,多重PCR反应结束后,磁珠纯化PCR产物,除去多余的引物;S4,在纯化后的多重PCR产物的3’末端添加碱基A,获得具有3’粘性末端A的PCR产物;S5,将具有3’粘性末端A的PCR产物与接头序列相连,获得含接头的连接产物本发明提供了一种T细胞白血病微小残留病检测方法,提高了检测效率,适合推广。
本发明涉及一种疟疾种属同检的嵌合引物多重PCR分子检测试剂盒及其检测方法,其中试剂盒包括混合引物组合、2×多重PCR预混液、多重PCR阳性参考、100bp分子量Marker,所述的混合引物组合包括引物序列为No.1~SEQ ID No.10的特异性嵌合引物和1条序列为SEQ ID No.11的通用引物;所述的检测方法包括多重PCR扩增反应,其中循环温度为58℃、62℃和68℃三个逐级递增的退火温度循环。采用该种疟疾种属同检的嵌合引物多重PCR分子检测试剂盒及其检测方法,通过SEQ ID No.1~11所示引物序列的组合,一次PCR反应就可对疟疾样本中的特异性种和属基因片段同时进行扩增,根据扩增片段的大小和组合就可以对节省时间和人力物力,提高检测效率。
本发明公开了一种猪肉中食源性寄生虫的多重PCR检测引物组及试剂盒;包括如SEQ ID NO.1/2所示的旋毛虫检测引物;如SEQ ID NO.3/4所示的刚地弓形虫检测引物;如SEQ ID NO.5/6所示的猪囊尾蚴检测引物;如SEQ ID NO.7/8所示的欧猥裂头蚴检测引物。本发明建立了能同时检测猪肉中猪囊尾蚴、旋毛虫、刚地弓形虫、欧猥裂头蚴的多重PCR引物组、包括该引物组的多重PCR检测试剂盒以及利用该引物组的多重PCR检测方法,极大地提高了分子检测的工作效率,而且方法的敏感性高