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[发明专利]草莓超低温疗法脱毒再生苗病原体检测的方法-CN201410784226.5无效
发明人：罗娅;汤浩茹;邱静;王小蓉;张勇;陈清;孙勃;邓群仙;李雁翎;田钰 -专利权人：四川农业大学
申请日： 2014-12-16 - 公布日： 2015-04-01 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种草莓超低温疗法脱毒再生苗病原体检测的方法，具体包括如下步骤：(1)田间草莓苗提取总RNA：(2)总RNA反转录为cDNA(3)设计四种病毒引物；(4)单一RT-PCR检测田间苗；(5)多重RT-PCR病毒检测体系：本发明在利用单一RT-PCR检测SVBV、SMYEV、SMoV和SCV的基础上，通过优化影响多重RT-PCR的因子，建立起多重RT-PCR检测SVBV、SMYEV、SMoV和SCV
草莓超低温疗法脱毒再生病原体检测方法

[发明专利]检测PRRSV的多重荧光定量RT-PCR方法及其应用-CN201310424225.5有效
发明人：施开创;莫胜兰;胡杰;邹联斌;张步娴;屈素洁;陆文俊;粟艳琼;苏凯;李军 -专利权人：广西壮族自治区动物疫病预防控制中心
申请日： 2013-09-17 - 公布日： 2014-04-16 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了检测PRRSV多重荧光定量RT-PCR方法及其应用。检测PRRSV荧光定量RT-PCR引物和探针，引物包括AM-PRRSV引物对和TJM-PRRSV引物对，探针包括AM-V-PRRSV-P探针、AM-C-PRRSV-P探针、TJM-PRRSV-P探针；检测PRRSV多重荧光定量RT-PCR方法，利用引物和探针进行荧光定量RT-PCR扩增，扩增后收集荧光信号，出现扩增曲线者为阳性，其特征在于，所述RT-PCR扩增体系包括上述引物和探针。
检测 prrsv 多重荧光定量 rt pcr 方法及其应用

[发明专利]同时检测四种猪RNA病毒的RT-PCR引物组及试剂盒-CN201410697381.3有效
发明人：丁国杰;李彦伟;涂映霞;梁宛楠;刘鑫莹;张凤强;杨朋欣;王彬;李来旭;魏宏宇 -专利权人：哈药集团生物疫苗有限公司
申请日： 2014-11-26 - 公布日： 2015-02-04 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了同时检测四种猪RNA病毒的RT-PCR引物组及试剂盒，属于猪RNA病毒的多重RT-PCR检测领域。在此基础上，本发明提供了一种同时检测猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒的多重RT-PCR试剂盒。本发明多重RT-PCR检测试剂盒对PRRSV、TGEV、PEDV和CSFV能实现一次性同步检测，特异性好，敏感性高，检测程序简便，成本低。
同时检测种猪 rna 病毒 rt pcr 引物试剂盒

[发明专利]诊断马流感病毒和鉴定其亚型的多重RT－PCR方法-CN200810132409.3有效
发明人：郭巍;戴伶俐;李雪峰;赵利平;相文华;周建华 -专利权人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
申请日： 2008-07-15 - 公布日： 2008-12-24 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种诊断马流感病毒(EIV)和鉴定其亚型的多重RT－PCR方法，包括：以待检样品RNA为模板，以SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2，SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4两组核苷酸序列为多重引物进行RT－PCR反应；如果从样品中只扩增出了227bp的产物，则该样品为EIV的H7N7亚型；如果同时扩增出了227bp和595bp的产物，则该样品为EIV的H3N8亚型；如果未扩增出本发明根据RT－PCR技术原理，根据EIV只有两种HA亚型的特点，建立了多重RT－PCR检测方法，其敏感性强、特异性高，可以用于EIV的快速诊断和亚型鉴定。
诊断流感病毒鉴定多重 rt pcr 方法

[发明专利]动物疫病三色荧光RT-PCR检测试剂盒及其检测方法-CN201210251620.3无效
发明人：周冬根;孙大为;曹雪春;李红;张升;王燕;岑晨霞 -专利权人：宁波检验检疫科学技术研究院
申请日： 2012-07-20 - 公布日： 2013-01-02 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种动物疫病三色荧光RT-PCR检测试剂盒及检测方法，特点是该试剂盒包括多重荧光RT-PCR反应母液、阳性对照品、阴性对照品、AMV逆转录酶、Taq聚合酶，其中多重荧光RT-PCR反应母液含有多重10×荧光RT-PCR反应缓冲液、禽流感引物和探针、新城疫引物和探针、禽传染性支气管炎引物和探针、牛血清白蛋白，其中其中各上、下游引物、特异性探针序列如SEQIDNO.1、NO.2、NO.3、NO.4、
动物疫病三色荧光 rt pcr 检测试剂盒及其方法

[发明专利]检测PRRSV的荧光定量RT-PCR引物、探针及其方法-CN201310424239.7有效
发明人：施开创;张步娴;官家明;邹联斌;胡杰;陆文俊;莫胜兰;屈素洁;粟艳琼;李军 -专利权人：广西壮族自治区动物疫病预防控制中心
申请日： 2013-09-17 - 公布日： 2014-04-16 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了检测PRRSV的荧光定量RT-PCR引物、探针及其方法。检测PRRSV的荧光定量RT-PCR引物和探针，引物包括AM-PRRSV引物对和EU-ORF1a引物对，探针包括AM-V-PRRSV-P探针、AM-C-PRRSV-P探针、EU-PRRSV-P探针；检测PRRSV的荧光定量RT-PCR方法,该方法利用引物和探针进行多重荧光定量RT-PCR扩增，扩增后收集荧光信号，出现扩增曲线者为阳性。其特征在于，所述的RT-PCR扩增体系包括所述的引物和探针。本发明可同时检测PRRSV美洲型经典毒株、HP-PRRSV以及欧洲型毒株，具有特异性强、敏感性高、自动化程度高、快速简便等优点。
检测 prrsv 荧光定量 rt pcr 引物探针及其方法

[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒的多重RT-PCR检测试剂盒-CN201610194077.6在审
发明人：秦毅斌;卢冰霞;段群棚;何颖;李斌;梁家幸;苏乾莲;周英宁;蒋冬福;卢敬专;赵武 -专利权人：广西壮族自治区兽医研究所
申请日： 2016-03-31 - 公布日： 2016-06-22 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒的多重RT-PCR检测试剂盒，本发明属于动物病毒学和分子生物学技术领域。该试剂盒包括SEQ ID1~4所示的引物序列，还包括了RT-PCR反应缓冲液、反转录酶、聚合酶等组分。本发明建立的试剂盒对猪流行性腹泻病毒变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株一步法三重RT-PCR的检测方法，该多重RT-PCR检测试剂盒具有特异性强、灵敏度高、操作简单，为猪流行性腹泻的流行病学及病原的鉴别诊断研究提供了可供借鉴的技术手段
种猪流行性腹泻病毒多重 rt pcr 检测试剂盒

[发明专利]一种同时检测三种引起马铃薯块茎坏死的病毒的三重RT-PCR方法及其引物组合-CN201510439761.1在审
发明人：胡新喜;雷艳;熊兴耀;周华兰 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2015-07-24 - 公布日： 2015-11-11 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种同时检测三种引起马铃薯块茎坏死的病毒的三重RT-PCR方法及其引物组合。具体采用3对引物，一次RT-PCR同时检测危害马铃薯块茎的马铃薯Y病毒块茎坏死株系(PVY^NTN)、番茄斑萎病毒(TSWV)、马铃薯帚顶病毒(PMTV)三种病毒。由于TSWV、PVY^NTN、PMTV三种病毒都能引起马铃薯块茎发生坏死，症状难以区分，运用传统的单重RT-PCR需要通过3次反应才能完成检测，比较费时费力。因此，本发明通过一个多重RT-PCR反应即可完成这3种病毒的检测，检测效率极大提高，检测的成本极大降低。
一种同时检测引起马铃薯块茎坏死病毒三重 rt pcr 方法及其引物组合

[发明专利]猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒多重RT-PCR检测引物及试剂-CN201310353373.2无效
发明人：曲哲会;郭晓秋;刘涛;唐雪峰;张广强 -专利权人：曲哲会
申请日： 2013-08-14 - 公布日： 2013-11-20 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒多重RT-PCR检测引物及试剂，可有效解决猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒多重RT-PCR检测的问题，本发明的技术方案是，本发明提供一种猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒多重RT-PCR检测引物：包括引物对C1/C2和P1/P2，引物对C1/C2包括引物C1和引物C2，引物对P1/P2包括引物P1和引物P2，引物C1、引物C2、引物P1和引物P2的核苷酸序列分别为序列表的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4；所述的引物对C1/C2和P1/P2在对CSFV细胞毒、PRRSV细胞毒和HP-PRRSV细胞毒基因组RNA进行RT-PCRPRRSVPCR产物536bpSEQ ID NO:5和HP-PRRSVPCR产物452bpSEQ ID NO:6，本发明的另一目的还提供一种引物对C1/C2和P1/P2在猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒多重RT-PCR检测试测中的应用。
猪瘟病毒繁殖呼吸综合征多重 rt pcr 检测引物试剂

[发明专利]一种一管式反转录聚合酶链式反应-CN03128897.9无效
发明人：徐定邦;朱德芬;谢文凯;徐文慧 -专利权人：徐定邦;徐文慧
申请日： 2003-05-29 - 公布日： 2004-12-08 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明涉及一种一管式反转录聚合酶链式反应方法及其在提高RT－PCR和多重RT－PCR反应专一性中的应用，特别涉及缩短反转录反应时间至0.5－15分钟、扩展常温反转录酶MMLV和AMV的反转录步骤的反应温度范围为本发明适用于实验室用RT－PCR试剂盒和医学核酸检测用RT－PCR试剂盒的方案设计和制备。
一种一管式反转录聚合链式反应

[发明专利]应用唯一引物的聚合酶链式反应方法及其应用-CN03117012.9无效
发明人：徐定邦;朱德芬;谢文凯;徐文慧 -专利权人：徐定邦;徐文慧
申请日： 2003-05-20 - 公布日： 2004-11-24 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明提供使用唯一引物来完成PCR或RT－PCR的方法及其应用，整个反应的引物为唯一的根据模板DNA链顺序特征而设计的寡聚核苷酸链，引物3'端6－12个碱基与模板顺序完全互补，而5'端则采用柔性设计。突破了经典PCR理论中使用一对引物完成扩增的技术常规，克服了由于正反引物对模板DNA链的结合效率有所不同可能造成的对扩增效率的负面影响，也完全避免了正反引物间的3'端碱基的互补。适合应用于人类和病原微生物基因的PCR或RT－PCR检测，也可用于多重RCP或RT－PCR反应以减少引物间的相互影响，或者作为其他PCR/RT－PCR的内参照反应，减少了一对引物作为内参照时的引物间影响和扩增效率差异
应用唯一引物聚合链式反应方法及其

[发明专利]兔出血症病毒荧光定量RT-PCR检测方法-CN201110062529.2无效
发明人：贾广乐;苏国清;林祥梅;武昱孜;孙卫东 -专利权人：中国检验检疫科学研究院
申请日： 2011-03-15 - 公布日： 2011-08-17 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供了用于兔出血症病毒荧光定量RT-PCR检测的引物和TaqMan探针。本发明还提供了含有上述引物和探针的试剂盒，以及使用上述引物和探针采用一步法RT-PCR检测兔出血症病毒的方法。本发明采用一步法RT-PCR检测技术，在一管内连续完成反转录和定量PCR扩增，完全闭管扩增和检测，减少了多重操作污染的可能性，易于操作，减少加样过程中的体积损耗，保证结果的可信性，反转录得到的所有cDNA
出血病毒荧光定量 rt pcr 检测方法

[发明专利]一种同时检测人的冠状病毒229E、OC43、NL63的方法及试剂盒-CN201410083191.2在审
发明人：崔淑娟;石伟先;黄芳;田丽丽;张新;陈萌;孙玉兰;王海滨;张玉松 -专利权人：崔淑娟
申请日： 2014-03-07 - 公布日： 2014-08-20 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明属于生物技术应用领域，涉及一种以TaqMan探针为基础的同时检测人的冠状病毒229E、OC43、NL63的含内质控的多重荧光RT-PCR方法。本发明针对人的冠状病毒229E、OC43、NL63代表株的N基因的保守序列设计特异性引物和探针，建立了含内质控的一步法多重荧光RT-PCR快速检测方法，操作简便快捷，克服了常规单重荧光RT-PCR单孔单检的繁琐
一种同时检测冠状病毒 229 oc43 nl63 方法试剂盒

[发明专利]一种同时检测人的Ⅰ型、Ⅱ型及Ⅲ型副流感病毒的方法及试剂盒-CN201410275579.2有效
发明人：黄芳;崔淑娟;石伟先;王海滨;张玉松;陈萌;于霞丽;李爱华 -专利权人：黄芳
申请日： 2014-06-18 - 公布日： 2014-09-10 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明属于生物技术应用领域，涉及一种以TaqMan探针为基础的同时检测人的I型、II型及III型副流感病毒的含内质控的多重荧光RT-PCR方法。本发明针对人的I型、II型及III型副流感病毒代表株的HN基因的保守序列设计特异性引物和探针，建立了含内质控的一步法多重荧光RT-PCR快速检测方法，操作简便快捷，克服了常规单重荧光RT-PCR单孔单检的繁琐
一种同时检测流感病毒方法试剂盒

[发明专利]一种同时检测人A型、B型呼吸道合胞病毒及人偏肺病毒的方法及试剂盒-CN201410083275.6有效
发明人：邓瑛;崔淑娟;石伟先;王海滨;张玉松;李爱华;于霞丽 -专利权人：邓瑛
申请日： 2014-03-07 - 公布日： 2014-09-03 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明属于生物技术应用领域，涉及一种同时检测人A型、B型呼吸道合胞病毒及人偏肺病毒的含内质控的多重荧光RT-PCR方法及试剂盒。本发明针对人A型、B型呼吸道合胞病毒及人偏肺病毒代表株的N基因、L基因及L基因的保守序列设计特异性引物和探针，建立了含内质控的一步法多重荧光RT-PCR快速检测方法，操作简便快捷，克服了常规单重荧光RT-PCR
一种同时检测呼吸道病毒肺病方法试剂盒

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