本发明涉及一种芽孢表面稳定展示海藻糖合酶的工程菌及其构建方法。所述枯草芽孢杆菌工程菌，使枯草芽孢杆菌中编码芽孢萌发的皮层溶解酶基因sleB和cwlJ失活后获得；所述sleB基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；cwlJ基因核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示本发明首次通过失活芽孢萌发的皮层溶解酶基因sleB和cwlJ弱化芽孢萌发的方式提高芽孢表面展示海藻糖合酶的稳定性，经实际验证，可有效提高海藻糖合酶的酶活，12h内海藻糖合酶酶活可保持95％以上。
本发明属于生物技术领域，公开了一种新的5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶(简称为“EPSP合酶”)，其具有SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列或具有基于SEQ ID NO：2经过一个或多个氨基酸残基的取代本发明还公开了编码EPSP合酶的多核苷酸和经重组技术产生这种EPSP合酶的方法。本发明还公开了这种EPSP合酶的用途。
本发明涉及一种肝素骨架合酶及其编码基因与应用。本发明中的肝素骨架合酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，来源于卡氏杆菌，是一种催化糖基转移的功能酶。本发明中的肝素骨架合酶突变体，是将上述肝素骨架合酶的氨基酸序列中第56位的天冬酰胺突变为天冬氨酸，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明中的肝素骨架合酶是一种全新来源的肝素骨架合酶，具备乙酰氨基葡萄糖的转移酶活性，并且可以利用底物GlcA‑pNP和UDP‑GlcNA有效的合成肝素二糖骨架，为进一步合成肝素糖链奠定了基础。
