本发明提供了一种新的5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSP合酶)及其编码基因,所述EPSP合酶为:(1)SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(2)SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有草甘膦抗性和EPSP合酶活性的由(1)衍生的蛋白质。本发明还提供了上述EPSP合酶的制备方法以及该EPSP合酶及其编码基因的应用。将本发明所述EPSP合酶编码基因导入植物并在其中表达后,所获得的转基因植物对草甘膦具有增强的耐受性。
本发明涉及一种高抗草甘膦EPSP合酶,所述EPSP合酶是由SEQ ID NO.2氨基酸序列组成的蛋白、或多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物,本发明还涉及编码高抗草甘膦EPSP合酶的基因,所述编码基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.1;本发明进一步涉及上述高抗草甘膦EPSP合酶的应用,该应用是生成高抗草甘膦植株,并将EPSP合酶编码基因作为微生物或植物转基因细胞培养的筛选标记。本发明为改变植物的草甘膦抗性提供了新的途径,为改变现有优良农作物品种的草甘膦抗性提供可能,并将EPSP合酶编码基因作为微生物或植物转基因细胞培养的筛选标记,具有巨大的应用前景。
本发明属于生物技术领域,公开了一种新的5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶(简称为“EPSP合酶”),其具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列或具有基于SEQ ID NO:2经过一个或多个氨基酸残基的取代本发明还公开了编码EPSP合酶的多核苷酸和经重组技术产生这种EPSP合酶的方法。本发明还公开了这种EPSP合酶的用途。
本发明公开了一种源于豌豆根瘤菌的EPSP合酶基因AroA-Rl及其制备方法和应用,所述EPSP合酶基因AroA-Rl的核苷酸序列如SEQ ID NO1所示,其编码的蛋白质序列如SEQ ID NO2所示。本发明的EPSP合酶基因AroA-Rl是利用基因合成方法制备而成,该AroA-Rl基因编码的EPSP合酶具有抗草甘膦性能,将其转化植物,能够提高植物对草甘膦除草剂的抗性,可应用于抗草甘膦转基因作物培育中
本发明公开了一种水稻EPSP合成酶突变基因、突变体及其应用。该水稻EPSP合成酶突变基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过人工突变技术将野生型水稻EPSP合成酶基因中编码第102位氨基酸、第106位氨基酸和第381位氨基酸的密码子进行突变得到,使得第102位氨基酸残基由苏氨酸突变成异亮氨酸、第106位氨基酸残基由脯氨酸突变成丝氨酸、第381位氨基酸残基由脯氨酸突变成亮氨酸,得到水稻EPSP合成酶突变基因;将水稻EPSP合成酶突变基因转入受体后获得的转基因作物具有较好的草甘膦抗性,对筛选和培育抗草甘膦作物新品种具有重要意义。
本发明公开了一种水稻EPSP合成酶突变基因、突变体及其应用。该水稻EPSP合成酶突变基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过人工突变技术将野生型水稻EPSP合成酶基因中编码第102位氨基酸、第106位氨基酸和第381位氨基酸的密码子进行突变得到,使得第102位氨基酸残基由苏氨酸突变成异亮氨酸、第106位氨基酸残基由脯氨酸突变成丝氨酸、第381位氨基酸残基由脯氨酸突变成亮氨酸,得到水稻EPSP合成酶突变基因;将水稻EPSP合成酶突变基因转入受体后获得的转基因作物具有较好的草甘膦抗性,对筛选和培育抗草甘膦作物新品种具有重要意义。
本发明公开了一种来源于脱氮副球菌(Paracoccus denitrificans)的EPSP合酶基因及其应用。所述的EPSP合酶基因含1332个碱基,编码氨基酸443个;其核苷酸序列如SEQ ID NO 1所示,其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO 2所示。本发明的来源于脱氮副球菌的EPSP合酶基因具有较高的草甘膦耐受性,可用于转基因作物的培育。
本发明公开了一种来源于肺炎克雷伯氏杆菌342(Klebsiella pneumoniae 342)的EPSP合酶基因及其应用。所述的EPSP合酶基因含1284个碱基,编码氨基酸428个;其核苷酸序列如SEQ ID NO 1所示,其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO 2所示。本发明的来源于肺炎克雷伯氏杆菌342的EPSP合酶基因具有较高的草甘膦耐受性,可用于转基因作物的培育。