本发明公开了一种PRRSV基因组全长cDNA全长质粒、PRRS病毒及其构建方法和应用,属于生物技术领域,以PBR322作为基础载体,包括PRRSV基因组全长cDNA序列和CMV启动子序列,bGH poly(A)signal序列,CMV启动子序列设置在PRRSV基因组全长cDNA序列的上游,bGH poly(A)signal序列设置在PRRSV基因组全长cDNA序列的下游,PRRSV基因组全长cDNA全长质粒为pBR322‑CMV‑rJXA1R,其序列如如SEQ ID No.1所示。该PRRSV基因组全长cDNA全长质粒保真度高,构建便捷效率高。
本发明公开了一种表达非洲猪瘟病毒p30蛋白的重组PRRSV载体、PRRSV重组病毒及其构建方法和应用,属于生物技术领域,以PBR322作为基础载体,包括PRRSV基因组全长cDNA序列和p30蛋白基因序列,PRRSV基因组全长cDNA序列如SEQ ID No.1所示,p30蛋白基因序列插入到PRRSV基因组全长cDNA序列的ORF1b和ORF2a之间的区域,在插入p30蛋白基因序列的PRRSV基因组全长cDNA序列的上游设置位于CMV启动子,即得到表达非洲猪瘟病毒p30蛋白的重组PRRSV载体。
本发明公开了白菜TT16基因家族,包括BrTT16-1基因(全长cDNA序列如SEQ IDNo.2所示)、BrTT16-2基因(全长cDNA序列如SEQ ID No.4所示)和BrTT16-3基因(全长cDNA序列如SEQ ID No.6所示)三个成员,该基因家族可应用于芸薹属作物种子大小发育和种皮色素积累等种子性状的分子育种。
本发明公开了甘蓝TT16基因家族,包括BoTT16-1基因(全长cDNA序列如SEQ IDNo.8所示)、BoTT16-2基因(全长cDNA序列如SEQ ID No.10所示)和BoTT16-3基因(全长cDNA序列如SEQ ID No.12所示)三个成员,该基因家族可应用于芸薹属作物种子大小发育和种皮色素积累等种子性状的分子育种。
本发明公开了一种柳枝稷木质素合成酶基因PvCCoAOMT的全长cDNA,所述全长cDNA具有(1)或(2)所示的核苷酸序列:(1)SEQ ID No.1所示的核苷酸序列;(2)SEQ ID No.1所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或几个核苷酸而形成的具有同等功能的核苷酸序列。本发明还提供了所述柳枝稷木质素合成酶基因PvCCoAOMT全长cDNA的克隆方法。本发明为后续利用柳枝稷木质素合成酶基因PvCCoAOMT全长cDNA序列设计引物、构建载体和遗传转化研究提供了便利,为今后在柳枝稷中开展荧光定量表达、转基因、基因功能验证等研究奠定了基础。
本发明涉及基因工程药物技术领域,公开了一种增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白,全长融合基因序列1的编码cDNA序列见SEQ ID NO1;全长融合基因序列1的编码氨基酸序列见SEQ ID NO2;全长融合基因序列2的编码cDNA序列见SEQ ID NO4;全长融合基因序列2的编码氨基酸序列见SEQ ID NO5。本发明与单独TRAIL蛋白可溶性片段编码cDNA序列的原核表达载体相比,原核表达载体的融合蛋白具有更高的可溶性表达,融合蛋白的回收及纯化效率更高;体外生物活性分析表明,所获融合蛋白能同时激动细胞膜上死亡受体和抑制细胞质内
本发明涉及家猪增殖诱导配体cDNA及其克隆、表达技术。家猪增殖诱导配体的基因,具有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的序列。其克隆方法如下:根据家猪增殖诱导配体的保守序列设计引物;提取总RNA;通过RT-PCR方法,扩增出一段cDNA,命名为P1,克隆入pMD18-T载体,测序;再根据P1的序列设计正义引物及反义引物分别用以扩增出上述cDNA 3’-及5’-全长末端区域,扩增片段分别命名为P2及P3,分别克隆入pMD18-T载体,并测序;将P1、P2、P3拼接出cDNA全长序列,并设计首尾引物一步扩增出全长cDNA序列,克隆入pMD18