本发明提供了一种HLA‑G全长蛋白及其表达载体、表达工程菌和制备方法，所述表达载体的表达区的核苷酸序列包括如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列；所述工程菌包含所述的HLA‑G全长蛋白表达载体。所述HLA‑G全长蛋白由所述的HLA‑G全长蛋白表达工程菌经诱导表达和纯化制备得到。本发明采用优化的大肠杆菌表达系统，体外表达人HLA‑G全长蛋白，实现了人HLA‑G全长蛋白的高产量、高纯度表达；本发明提供人HLA‑G全长蛋白，包含跨膜区，且经过ELISA验证具有与天然蛋白相似的结构，该方法可以制备出高产量、高纯度、具有结构活性的人HLA‑G全长蛋白。
