本发明提供了一种LAMP引物组包含其的用于烟草靶斑病检测的试剂盒及其应用和检测方法,涉及分子生物学技术领域。所述LAMP引物组包括上游内引物FIP、下游内引物BIP、上游外引物F3和下游外引物B3,其中上游内引物FIP、下游内引物BIP、上游外引物F3和下游外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID No.1~4所示上述4条引物是由烟草靶斑病菌AG3融合群的ITS序列作为靶标分子而设计得到的。因此,上述4条引物对烟草靶斑病具有较高的特异性和敏感性,进而包括该LAMP引物组的用于烟草靶斑病检测的试剂盒及其检测方法,其能够实现烟草靶斑病的快速检测,具有灵敏度高、特异性好的优点。
本发明公开了一种巢式PCR法检测叶点霉属真菌的引物组及方法,该引物组包括四对引物,其中,第一对引物:上游引物的碱基序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物的碱基序列如SEQ ID NO.5所示;第二对引物:上游引物的碱基序列如SEQ ID NO.2所示,下游引物的碱基序列如SEQ ID NO.5所示;第三对引物:上游引物的碱基序列如SEQ ID NO.3所示,下游引物的碱基序列如SEQ ID NO.5所示;第四对引物:上游引物的碱基序列如SEQ ID NO.4所示,下游引物的碱基序列如SEQ ID NO.5所示。采用本发明的引物组通过巢式PCR法检测柑橘黑斑病相关的叶点霉属真菌,特异性好,可实现四种叶点霉属真菌的同时检测,具有准确可靠、灵敏度高、快速简便的特点。
本发明涉及基因工程及分子生物学领域,一种EGFR基因突变检测引物及探针,用于扩增和检测含T790M位点的核酸片段,所述引物包括特异性引物和特异性探针,特异性引物包括上游引物和下游引物;所述上游引物为SEQ ID NO:1,所述下游引物为SEQ ID NO:2,所述特异性探针为SEQ ID NO:3,所述特异性探针的5’末端连接荧光报告基团,3’末端连接荧光淬灭基团,所述上游引物的3’端第二位包括人工错配碱基本发明EGFR基因突变检测引物及探针使用简便。
本发明提供了用于检测耐甲氧西林葡萄球菌的引物组合物,其中包括的用于检测耐甲氧西林葡萄球菌的引物的上游引物核苷酸序列为SEQ ID NO:1,下游引物核苷酸序列为SEQ ID NO:2;内参引物的上游引物核苷酸序列为SEQ ID NO:7,下游引物核苷酸序列为SEQ ID NO:8。其中还可以包括的用于检测金黄色葡萄球菌的引物的上游引物核苷酸序列为SEQ ID NO:3,下游引物核苷酸序列为SEQ ID NO:4;用于检测表皮葡萄球菌的引物的上游引物核苷酸序列为SEQ ID NO:5,下游引物核苷酸序列为SEQ ID NO:6。本发明还提供了上述引物组合物的试剂盒。采用所述引物组合物及试剂盒检测耐甲氧西林葡萄球菌的方法,可以在基因水平上进行迅速判断,具有较好的灵敏度和特异性,具有节约时间、技术成熟及检测结果稳定的优点。
本发明涉及分子生物学领域,特别是涉及一种检测乳糖酶基因多样性的引物组及其应用,所述引物组的序列包括:上游引物SEQ ID NO.1与下游引物SEQ ID NO.2、上游引物SEQ ID NO.3与下游引物SEQ ID NO.4和上游引物SEQ ID NO.5与下游引物SEQ ID NO.6。本发明通过设计广谱兼并引物得到引物组,通过该引物组扩增乳糖酶基因片段,可鉴定微生物菌落多样性,以便了解其微生物种类和丰度组成,进而研究物种进化和系统发育,从而帮助医学研究者更好的指导用药。