本发明提供了一种检测人乳头瘤病毒的引物和分型探针组合及其应用,所述检测人乳头瘤病毒的引物和分型探针组合包括扩增人乳头瘤病毒基因组晚期区L1区的通用引物对和分型探针;所述通用引物对包括上游引物组和下游引物组;所述上游引物组包括上游引物1、上游引物2和上游引物3;所述上游引物组包括SEQ ID No.1~3所示的核苷酸序列;所述下游引物组包括下游引物1、下游引物2和下游引物3;所述下游引物组包括SEQ ID所述检测人乳头瘤病毒的引物和分型探针组合能检测区分28种HPV亚型,优于当前国内同类产品,覆盖面更广,更具代表性。