[发明专利]制备具有天然N-末端序列的重组抑肽酶和重抑肽酶变异体的方法无效
| 申请号： | 95106042.2 | 申请日： | 1995-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN1123325A | 公开（公告）日： | 1996-05-29 |
| 发明（设计）人： | H·阿皮勒;J·博伊尼克;M·德斯松;U·戈沙尔克 | 申请（专利权）人： | 拜尔公司 |
| 主分类号： | C12N15/15 | 分类号： | C12N15/15;C12N15/63;C12P21/02;C07K14/81 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人： | 谭明胜,姜建成 |
| 地址： | 联邦德国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种制备具有天然N-末端序列的重组抑肽酶以及重组抑肽酶变异体的方法，其中提供的重组抑肽酶和/或重组抑肽酶变异体是均匀加工过的分泌蛋白质。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 具有 天然 末端 序列 重组 抑肽酶 异体 方法 | ||
【主权项】：
1.用于表达具有正确N-末端的抑肽酶和抑肽酶变异体的载体，它包括有：(a)抑肽酶或其变异体的基因：和(b)由信号肽酶加工的一个前体序列的核苷酸序列，该序列正好位于该基因上游，作为引导序列。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于拜尔公司，未经拜尔公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/95106042.2/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- TIMP1的剪接异构体及其应用-202310876197.4
- 董东;宋宏涛;果春青 - 苏州博健生物技术有限公司
- 2023-07-18 - 2023-10-24 - C12N15/15
- 本发明公开了TIMP1的剪接异构体及其应用，本发明利用ONT长读长测序技术和Illumina短读长测序平台检测并筛选了TIMP1的剪接异构体TIMP1Δ4‑5，经实验验证TIMP1Δ4‑5在结直肠癌中显著下调，进一步的体内和体外实验表明，过表达TIMP1Δ4‑5能够显著抑制肿瘤细胞的生长和迁移，发现抑制剪接因子SRSF1能够促进TIMP1Δ4‑5的生成，此外还引入了一种基于CRISPR/dcasrx的系统，诱导TIMP1外显子4‑5剪切的策略来抑制肿瘤生长，为结直肠癌的诊断与治疗提供了新的方向，具有广阔的应用前景。
- 一种剑麻半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因及应用-202111206967.1
- 黄兴;梁艳琼;谭施北;易克贤;习金根;吴伟怀;贺春萍;陈河龙;陆英 - 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
- 2021-10-18 - 2023-05-16 - C12N15/15
- 本发明公开了一种剑麻半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因及应用，涉及到生物工程领域，所述剑麻半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的核苷酸序列如SEQ No.1所示，由上述基因编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ No.2所示。本发明获得的剑麻半胱氨酸蛋白酶抑制剂蛋白具有抗菌生物活性，可用于制备抗菌类产品，应用于作物病害防控，可抑制烟草疫霉、芒果炭疽病菌和西瓜枯萎病菌生长。
- Pipiserpin蛋白在蚊媒种群控制中的应用-202210210079.5
- 陈琳;张东辉;诸雅雯;陆青宇;季旻珺 - 南京医科大学
- 2022-03-03 - 2023-03-03 - C12N15/15
- 本发明公开了Pipiserpin蛋白在蚊媒种群控制中的应用。SEQ ID No.1所示Xa抑制剂Pipiserpin基因在制备蚊媒种群控制制剂中的应用。SEQ ID No.2所示Xa抑制剂Pipiserpin蛋白在备蚊媒种群控制中的应用。Xa抑制剂Pipiserpin蛋白用于接种动物，以产生抗血清，用于蚊媒防制和蚊媒病防控。本发明克隆表达了一种新型Xa抑制剂Pipiserpin,其抗血清可以抑制蚊卵巢发育，降低孵化率，由于蚊以动物血液为食，本发明中Pipiserpin蛋白可用于接种动物，以产生抗血清，用于蚊媒防制和蚊媒病防控。
- serpinc1基因突变体及应用-202211270382.0
- 唐亮;胡豫;陶嬿伊;程志鹏;张一;吴婷婷 - 华中科技大学同济医学院附属协和医院
- 2022-10-18 - 2023-03-03 - C12N15/15
- 本发明属于基因技术领域，尤其涉及serpinc1基因突变体及应用。核酸，包含下列目标片段，所述目标片段与野生型serpinc1基因相比，具有c.506CT突变，其中所述野生型serpinc1序列如SEDIQ：1所示。多肽，与野生型serpinc1相比，所述多肽具有p.S169F突变，其中所述野生型serpinc1序列如SEDIQ：2所示。防治抗凝血酶缺乏疾病药物，至少含有编辑基因片段，所述编辑基因片段为可将serpinc1基因突变体中c.506位的单核苷酸T替换为单核苷酸C的片段。本发明提拓宽了对抗凝血酶缺乏疾病的认识；为抗凝血酶缺乏症提供了新的诊断方式、也为其防治提供了新的途径，并探讨了基于诱导多潜能干细胞(iPSC)介导的基因治疗AT缺乏症的可能性。
- 一种AACT基因过表达试剂及其制备方法和应用-202011053933.9
- 金艳霞;孙慧;王卫东;闫梦琴;詹艳;王琦昀 - 湖北师范大学
- 2020-09-30 - 2022-07-08 - C12N15/15
- 本发明提供了一种AACT基因过表达试剂及其制备方法，所述方法包括如下：步骤：1）.以人cDNA文库为模板，设计带有
- 一种小菜蛾丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin7基因及其应用-202010614504.8
- 许小霞;金丰良;张展滔;曾路 - 华南农业大学
- 2020-06-30 - 2022-04-29 - C12N15/15
- 本发明公开了一种小菜蛾丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin7基因及其应用，所述小菜蛾丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin7基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。添食重组蛋白Serpin7可强烈抑制小菜蛾酚氧化酶PO活力；添食Serpin7的多克隆抗体anti‑Serpin7能显著提高酚氧化酶PO活力；RNAi沉默Serpin7基因表达后，小菜蛾酚氧化酶PO活力升高，小菜蛾幼虫产生强烈黑化反应，导致大部分小菜蛾不能正常化蛹，能化蛹者也不能成功羽化。说明小菜蛾Serpin7是昆虫体内一种先天性免疫的负调节因子，可以作为新型生物防治的分子靶标，用于十字花科蔬菜害虫的防控，具有很好的生物防治潜力和应用前景。
- 一种掌叶半夏胰蛋白酶抑制剂基因、其编码的蛋白及抗虫应用-201810370845.8
- 董文琦;吴志明;高俊平;田哲娟;蒲娜娜;党红凯;李亚栋 - 河北省农林科学院
- 2018-04-24 - 2021-08-03 - C12N15/15
- 本发明公开了一种掌叶半夏胰蛋白酶抑制剂基因、其编码的蛋白及抗虫应用。基因的核苷酸序列表如SEQ ID NO：1所示。在培育耐抗虫转基因植物时，首先构建含有SEQ ID NO：1所示基因的重组表达载体，然后利用所得重组表达载体构建转化体，再利用所得转化体转化目的植物，筛选阳性植株，经过三代筛选得到纯合的与正常植物相比具有抗虫性的转基因植物。发明人通过大量科学研究证明本发明的基因对植物的抗虫特性具有明显的提升作用，证明其与植物的抗虫性具有紧密联系，基于此并利用现有基因工程方法得到了具有高抗虫性的转基因植物，对减少农药防治蚜虫、提高作物种植效率和种植产量具有重大的实际意义。
- 八目鳗口腔腺CystatinF、制备方法及应用-201711155806.8
- 肖蓉;朱明儒;李博文 - 辽宁师范大学
- 2017-11-20 - 2021-03-30 - C12N15/15
- 本发明公开一种八目鳗口腔腺CystatinF、制备方法及应用，八目鳗口腔腺Cystatin F（Lm‑Cystatin F）与已报道的蛇毒蛋白cystatin仅有不到29%的序列一致性，与其他物种的序列一致性也非常低（30%~40%），能够以剂量依赖性的方式显著抑制人脐静脉血管内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVECs）的增殖，能够抑制血管内皮细胞分化形成小管结构，即具有抗血管新生活性。本发明以优化的八目鳗口腔腺Cystatin F基因制备重组八目鳗口腔腺Cystatin F，表达周期短且表达率高，所得蛋白为可溶性蛋白，不需要酶切，一步层析，具有操作简单、得率高等优点。
- 斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因克隆、重组表达方法及应用-201710002348.8
- 刘春霞;冯陈晨;王文龙;呼和巴特尔 - 内蒙古农业大学
- 2017-01-03 - 2019-11-26 - C12N15/15
- 本发明公开了斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因克隆、重组表达方法及应用，通过斯氏副柔线虫转录组测序，预测出的编码基因与已公布的线虫数据库比对分析，找出斯氏副柔线虫特有基因，用RT‑PCR方法从斯氏副柔线虫中扩增出特有基因Pj_CPI，克隆测序后，构建到原核表达载体pET30a中，转化至E.coli BL21，进行诱导表达，用Western‑bloting法验证重组蛋白rCPI的免疫原性。斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因重组蛋白经纯化后，建立了家畜斯氏副柔线虫iELISA检测方法。
- 一种水蛭素编码基因及包含该基因的宿主系统-201910832553.6
- 石萍;鲁增辉;游华建;陈仕江 - 重庆市中药研究院
- 2019-09-04 - 2019-11-22 - C12N15/15
- 本发明公开了一种水蛭素编码基因及包含该基因的宿主系统。本发明首次从日本医蛭唾液腺组织中利用多种PCR方法得到该编码基因，突破了以往根据已知蛋白或多肽的氨基酸序列推测基因的核苷酸序列，然后进行人工合成的传统方法。采用本发明中的方法得到编码基因后将其重组到表达载体中，并将表达载体转化至宿主细胞中，利用宿主细胞可以高效的生产水蛭素，可有效解决药典水蛭品种因生物量小、资源限制等问题无法满足人民群众用药需求的问题。
- 一种遗传性视网膜色素变性疾病的致病突变及其检测试剂-201510251402.3
- 赵晨;陈雪;刘媛 - 南京医科大学第一附属医院;赵晨
- 2015-05-15 - 2019-11-19 - C12N15/15
- 本发明公开了一种遗传性视网膜色素变性疾病的致病突变及其检测试剂。一种用于检测遗传性视网膜色素变性疾病的突变的SPP2基因，突变的SPP2基因为杂合突变SPP2p.Gly97Arg或者SPP2p.Gly29Asp。一种检测遗传性视锥细胞营养不良疾病的试剂盒，所述的试剂盒包括：(a)检测SPP2基因物理位置为234967558和234959515核苷酸位点的试剂；或检测Spp‑24蛋白第29位或第97位氨基酸位点的试剂；(b)说明书。本发明获得遗传性视网膜色素变性疾病的致病突变，通过检测所述突变可以进行遗传性视网膜色素变性疾病的诊断。
- 菜蛾盘绒茧蜂畸形细胞丝氨酸蛋白酶抑制剂CvT-SPI基因及应用-201710818904.9
- 陈学新;谷启娟;时敏;黄健华 - 浙江大学
- 2017-09-12 - 2019-11-15 - C12N15/15
- 本发明涉及分子生物学、基因工程以及蛋白工程领域，旨在提供一种菜蛾盘绒茧蜂畸形细胞丝氨酸蛋白酶抑制剂CvT‑SPI基因及应用。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，由该基因编码的蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。由该基因体外原核表达获得的重组蛋白能够有效抑制其寄主小菜蛾血淋巴酚氧化酶原的激活，从而抑制寄主血淋巴的黑化作用，减弱寄主的免疫反应，为获得新型转基因抗虫作物提供了序列参考。该重组蛋白能够抑制枯草杆菌蛋白酶A，胰蛋白酶和猪胰腺弹性蛋白酶的活性，对于开发丝氨酸蛋白酶抑制剂类药物具有重要的意义。本发明能够在较短的时间内获得大量的可溶性CvT‑SPI重组蛋白，为进行CvT‑SPI的活性实验提供了便利。
- 菜蛾盘绒茧蜂丝氨酸蛋白酶抑制剂CvT-SERPIN基因及其编码蛋白-201610290698.4
- 陈学新;谷启娟;时敏;杨健 - 浙江大学
- 2016-05-05 - 2019-04-09 - C12N15/15
- 本发明涉及分子生物学技术领域，旨在提供一种菜蛾盘绒茧蜂丝氨酸蛋白酶抑制剂CvT‑SERPIN基因及其编码蛋白。该菜蛾盘绒茧蜂丝氨酸蛋白酶抑制剂CvT‑SERPIN基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该基因编码的蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述蛋白去除信号肽前体后得到的重组蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过基于高通量转录组测序方法，得到CvT‑SERPIN的cDNA核苷酸序列后，利用大肠杆菌表达系统进行诱导表达蛋白，利用His‑tag能够在较短的时间内获得大量的可溶性CvT‑SERPIN重组蛋白，为进行CvT‑SERPIN的活性实验提供了便利。
- 一种旋毛虫重组蛋白及应用-201310184056.2
- 付宝权;盖文燕;李文卉;曲自刚;谢志宙;刘静宜 - 中国农业科学院兰州兽医研究所
- 2013-05-19 - 2018-11-02 - C12N15/15
- 本发明公开一种重组蛋白的制备方法，特别是一种TsSerpin重组蛋白，以及这种蛋白和它的用途。本发明的TsSerpin重组蛋白的制备方法是：以猪旋毛虫肌幼虫中提取总RNA为模板，以Oligo(dT)18 Primer为引物进行反转录；再用上述所得到的反转录cDNA为模板，用SEQ ID №1和SEQ ID №2为引物进行PCR扩增，得到猪旋毛虫TsSerpin基因；再经构建重组质粒、转化大肠杆菌等处理得到目标蛋白。本发明的重组蛋白可用于制备检测旋毛虫病的抗原。
- 水稻胰蛋白酶抑制剂OsBBTI4基因的新应用-201610065123.2
- 张美;孙雯;王晶;郭艳 - 中国科学院华南植物园
- 2016-01-29 - 2016-04-06 - C12N15/15
- 本发明涉及工程菌酿酒酵母和植物基因工程领域。本发明提供了水稻胰蛋白酶抑制剂OsBBTI4基因在水稻中降低重金属镉积累的应用，其cDNA全长序列如SEQ ID NO.1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明OsBBTI4基因编码的蛋白质OsBBTI4与水稻对重金属镉的积累相关。通过将OsBBTI4基因在水稻中转基因超表达或RNAi，调控转基因水稻株系中OsBBTI4基因的表达量，可以影响转基因水稻种子中镉含量，得到低镉富集的转基因水稻品系。OsBBTI4基因可应用于工程菌及水稻针对体内镉含量改变的遗传工程育种，也可应用于其他植物的针对体内镉富集的遗传工程育种。
- 诊断和预示肠癌的标志物-201280066472.6
- 王弢;渠香云;陈菲 - 苏州工业园区为真生物医药科技有限公司
- 2012-01-09 - 2014-10-15 - C12N15/15
- 提供CST4基因、CST4基因的mRNA、CST4基因剪切子的cDNA、CST4特异性引物对应的扩增子、CST4基因编码的CYSTATIN S蛋白和CYSTATIN S蛋白的表位肽在制备诊断和预示肠癌标志物中的应用，以及利用它们进行肠癌检测的方法和试剂盒。
- 乳腺癌诊断和预示的标志物-201280066466.0
- 王弢;渠香云;陈菲 - 苏州工业园区为真生物医药科技有限公司
- 2012-01-09 - 2014-09-10 - C12N15/15
- 本发明公开了SEQ ID No.48所示的CST1基因剪切子和SEQ ID No.52所示CST1基因编码蛋白Cystatin SN作为乳腺癌诊断和预示标志物的应用，通过测定所述标志物的表达量，可以进行乳腺癌或乳腺癌组织转移的鉴别诊断和/或易感性分析，乳腺癌或乳腺癌组织转移治疗药物、治疗方法、治疗疗效及预后的评估，相关人群乳腺癌或乳腺癌组织转移患病风险的评估等，灵敏度高，特异性好，结果准确可靠；本发明还公开了所述CST1基因剪切子的捕获剂和Cystatin SN的捕获剂在制备乳腺癌诊断和预示试剂、试剂盒及芯片中的应用，并公开了包含上述捕获剂的乳腺癌诊断和预示试剂盒、芯片。
- 一种鲤钙蛋白酶抑制蛋白基因克隆及其表达量检测的方法-201410000114.6
- 陈伟兴;黄金善;管雪婷;苗晓微 - 东北农业大学
- 2014-01-02 - 2014-07-23 - C12N15/15
- 本发明提供了一种鲤钙蛋白酶抑制蛋白基因克隆及其表达量检测的方法。在本发明中，通过参照已发表的斑马鱼的钙蛋白酶基因mRNA序列进行引物设计，引物CAST1-F、CAST1-R、CAST2-F、CAST2-R、CAST3-F和CAST3-R用于克隆CAST基因部分编码序列，引物CAST3R1、CAST3R2、CAST5R1以及CAST5R2用于克隆CAST基因5’、3’UTR序列，根据所得到的序列确定出鲤CAST基因的完全cDNA序列，并根据所得到的CAST基因cDNA序列设计引物CASTY-F以及CASTY-R检测出鲤各组织中CAST基因表达量。
- 一种优化的眼镜王蛇毒蛋白酶抑制剂基因OH-TCI及其表达方法和应用-201410001201.3
- 孙同毅 - 潍坊医学院
- 2014-01-02 - 2014-04-23 - C12N15/15
- 本发明提供了一种优化的眼镜王蛇毒蛋白酶抑制剂基因OH-TCI及其表达载体和应用，合成优化的眼镜王蛇毒蛋白酶抑制剂基因OH-TCI，构建重组质粒pUC18-T-OH-TCI和pET43.1-OH-TCI，并转到大肠杆菌中，筛选阳性转化子，经实验结果表明重组大肠杆菌分泌表达了融合蛋白NusA-OH-TCI，经thrombin酶切后，获得具有明显抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶活性的重组rOH-TCI，本发明采用大肠杆菌表达系统可以获得高表达量、高活性的眼镜王蛇毒蛋白酶抑制剂OH-TCI，克服了以其他方式获取OH-TCI的成本高、表达量低的缺点。在医药、化工等行业具有广泛应用前景。
- 短蛸丝氨酸蛋白酶抑制剂OoSerpin基因及其重组蛋白和应用-201310518995.6
- 韦秀梅;徐洁;杨建敏;王卫军;孙国华 - 山东省海洋水产研究所
- 2013-10-29 - 2014-01-22 - C12N15/15
- 本发明是短蛸Serpin型蛋白酶抑制剂基因OoSerpin的体外重组表达和应用，本发明利用构建的短蛸转录组文库，得到了短蛸Serpin型蛋白酶抑制剂基因OoSerpin的cDNA全长序列，该基因的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示；利用原核重组表达技术表达了其编码蛋白，该重组蛋白对于胰蛋白酶和糜蛋白酶的活性及大肠杆菌的生长具有较好的抑制作用。该基因及其重组蛋白的研究对于进一步了解Serpin型蛋白酶抑制剂基因在先天性免疫中发挥的功能，研制新的疾病防治药物、食品和动物饲料添加剂具有重要的意义。
- 人SPINK6的基因优化及其在毕赤酵母中外分泌表达-201110335425.4
- 陆海荣;黄青山;黄晋江;李斌宾 - 复旦大学;上海高科联合生物技术研发有限公司
- 2011-10-30 - 2013-05-08 - C12N15/15
- 本发明涉及优化的基于酵母表达系统的重组人SPINK6(rhSPINK6)的DNA序列及其制备。具体地，本发明提出了优化的、适合酵母表达系统的rhSPINK6的DNA序列，高效生产rhSPINK6的方法，以及有关的工程菌的构建、rhSPINK6的表达优化、纯化的工艺和生物活性的研究。与大肠杆菌表达的rhSPINK6相比，本发明中酵母表达的rhSPINK6的生物活性提高了近3倍。
- 三疣梭子蟹Pacifastin型丝氨酸蛋白酶抑制剂PtPLC基因及其编码蛋白和应用-201210494670.4
- 崔朝霞;刘媛;王双艳 - 中国科学院海洋研究所
- 2012-11-28 - 2013-04-03 - C12N15/15
- 本发明属于分子生物学技术领域，具体的说是一种三疣梭子蟹Pacifastin型丝氨酸蛋白酶抑制剂PtPLC基因及其编码蛋白和应用。三疣梭子蟹PtPLC基因为序列表SEQ ID No.1中的碱基序列所示。重组的PtPLC蛋白对牛胰蛋白酶和牛α-胰凝乳蛋白酶具有显著的抑制活性。当重组蛋白PtPLC浓度为1μM、2μM、3μM时，对牛胰蛋白酶的抑制活性分别为88.73％、90.73％和97.18％；当重组蛋白浓度为2μM、3μM时，对牛α-胰凝乳蛋白酶的抑制活性达到31.1％和99.69％。本发明在药物开发和饲料添加剂生产等方面具有潜在的应用价值，为三疣梭子蟹的病害防治和基因辅助选育奠定基础。
- 一种从水稻种子生产和分离纯化重组人抗胰蛋白酶（OsrAAT)的方法-201210441102.8
- 杨代常;施倩妮;张莉平 - 武汉禾元生物科技有限公司
- 2012-11-07 - 2013-03-27 - C12N15/15
- 本发明提供了一种水稻遗传密码子优化的OsrAAT基因，相关载体及其制备OsrAAT转基因水稻种子的方法和OsrAAT的分离纯化方法。通过水稻胚乳细胞特异性表达OsrAAT的表达载体来制备OsrAAT转基因水稻种子，并从中分离纯化OsrAAT，所获得OsrAAT的HPLC纯度为97％，收率可达18.89±3.19％，相当于每公斤的粗米可生产0.366g的OsrAAT。
- 大竹蛏丝氨酸蛋白酶抑制剂SgKunitz基因及其重组蛋白和应用-201210204184.4
- 韦秀梅;刘相全;杨建敏;王忠全 - 山东省海洋水产研究所
- 2012-06-20 - 2012-10-03 - C12N15/15
- 本发明是大竹蛏Kunitz型蛋白酶抑制剂基因SgKunitz的克隆和体外重组表达技术，本发明利用构建的大竹蛏cDNA文库，克隆得到了大竹蛏Kunitz型蛋白酶抑制剂基因SgKunitz的cDNA全长序列，该基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；利用原核重组表达技术表达了其编码蛋白，该重组蛋白对于胰蛋白酶和糜蛋白酶的活性具有较强的抑制作用。该基因及其重组蛋白的研究对于进一步了解Kunitz型蛋白酶抑制剂基因在先天性免疫中发挥的功能，研制新的人类疾病防治药物和动物饲料添加剂具有重要的意义。
- 一种重组人胱抑素C编码基因与表达方法-201210151606.6
- 张宏斌 - 广州军区广州总医院
- 2012-05-16 - 2012-09-19 - C12N15/15
- 本发明公开了一种重组人胱抑素C编码基因与表达方法，该编码基因的核苷酸序列见SEQ ID NO：1，重组人胱抑素C蛋白的表达方法，包括以下步骤：将重组人胱抑素C编码基因插入到原核表达载体的多克隆位点，构建重组表达质粒，将重组表达质粒转化到表达宿主菌大肠杆菌，筛选出阳性克隆菌，得工程菌；工程菌经发酵、诱导、分离、纯化，得重组人胱抑素C蛋白。本发明提供的重组人胱抑素C编码基因，能表达人胱抑素C蛋白，操作方便，且由编码基因表达的人胱抑素C蛋白，纯度达90%以上，表达效率高，目前未见表达效率更好的报道。
- 一种在酵母中制备重组胱抑素C的方法-201210104241.1
- 周宏峰;彭毅;何超军;周鹏飞 - 武汉友芝友生物制药有限公司
- 2012-04-11 - 2012-08-22 - C12N15/15
- 本发明涉及一种在毕赤酵母中制备重组胱抑素C(CysC)的方法，包括以下步骤：1).提供编码胱抑素C的核苷酸序列；2).将上述核苷酸序列克隆到酵母表达载体中；3).将上述载体转化至同一酵母宿主；4).诱导上述酵母宿主表达C端带有组氨酸标签的胱抑素C；5).纯化上述胱抑素C该方法表达量高，表达产物无需经过变性和复性，即可得到有活性的胱抑素C，并且后续的纯化步骤也简单方便。制备的重组胱抑素C可用于检测肾功能的胱抑素C试剂盒。
- 黑杨中具有抗虫效果的胰蛋白酶抑制剂基因及用途-201110326290.5
- 王洁华;杨少辉;宋英今;陈姗 - 天津大学
- 2011-10-25 - 2012-03-28 - C12N15/15
- 本发明公开了黑杨中具有抗虫效果的胰蛋白酶抑制剂基因及用途，黑杨中具有抗虫效果的胰蛋白酶抑制剂基因，用序列表SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示；本发明分离到黑杨Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因(PnKTIs)，它们对机械损伤以及虫咬两种外界诱导刺激均具有高诱导特性，实验证明具有抗虫效果，显著降低了鳞翅目昆虫的成活率。该发明能够为从事抗虫转基因工程及生防相关研究人员提供新型抗虫基因，并在此基础上发展新的抗虫手段，降低农药使用及其对环境的恶性污染，维持生态系统的平衡和可持续性发展。
- 一种含有医用水蛭素基因的重组真核汉逊酵母工程菌株的构建及重组水蛭素的生产工艺-201110334701.5
- 元昊;杨力 - 元昊;杨力
- 2011-10-28 - 2012-03-14 - C12N15/15
- 本发明公开了一种含有医用水蛭素基因的重组真核汉逊酵母工程菌株的构建及重组水蛭素的生产工艺。其中采用汉逊多型宿主细胞株RB-11为出发菌株来构建适用于生产的含有水蛭素的汉逊酵母高表达工程菌株RBHV145-6，并通过培养、发酵来获得高纯度和高含量的水蛭素。在本发明中，水蛭素基因以多拷贝的形式拷贝到宿主细胞的染色体上，且拷贝数保持稳定，含有水蛭素基因的外源基因表达盒完全整合到宿主细胞染色体上，种子库细胞、传代40、80代后的细胞中均无游离质粒存在，外源蛋白的表达量和分泌效率比酿酒酵母高10倍，特别和国内的多型汉逊酵母相比水蛭素外源蛋白的表达量高35.8％，且没有过度糖基化现象，因此适合于大规模发酵生产目的蛋白。
- 草鱼基质金属蛋白酶抑制因子-2基因、编码的重组蛋白及其时空表达图谱的构建方法和用途-201110127832.6
- 李家乐;徐晓雁;沈玉帮;宣云峰;王荣泉 - 上海海洋大学
- 2011-05-17 - 2011-12-07 - C12N15/15
- 本发明公开了草鱼基质金属蛋白酶抑制因子-2基因、编码的重组蛋白及其时空表达图谱的构建方法和用途。本发明草鱼基质金属蛋白酶抑制因子-2基因的核苷酸序列如SEQ??ID??NO：1所示。该核苷酸序列编码的重组蛋白，其氨基酸序列如SEQ??ID??NO：2所示。将本发明的草鱼基质金属蛋白酶抑制因子-2基因在草鱼组织和发育过程中的表达，该基因在血液、中肾、头肾、脾、鳃、肠、心中大量转录，在脑、肌、肝、皮中有微量转录，在鳍条中检测到及其微量mRNA的存在。该基因从尾鳍期开始大量转录，在鱼苗3天达到最大表达量。本发明还公开了草鱼基质金属蛋白酶抑制因子-2基因、编码的重组蛋白在草鱼育苗和作为草鱼饲料添加剂中的应用。
- 一种编码丝氨酸蛋白酶抑制剂的基因及其应用-201010164526.5
- 武波;蒋承建;郝振宇;申佩弘;唐咸来;李双喜;金科;马格非 - 广西大学
- 2010-05-07 - 2010-11-10 - C12N15/15
- 一种编码丝氨酸蛋白酶抑制剂活性的基因spilC，具有下列核苷酸序列之一：1)序列表No.1的DNA序列；2)与序列表No.2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有丝氨酸蛋白酶抑制活性的蛋白质。序列表中序列1的DNA从5’端第111个核苷酸开始起始密码子ATG到755个碱基以终止密码子TAA结束，存在一个完整的ORF(核苷酸111-755)，自5’端的第111-113位核苷酸为spilC基因的起始密码子ATG，自5’端的第753-755位核苷酸为spilC基因的终止密码子TAA。本发明所提供的新的丝氨酸蛋白酶抑制剂及其编码酶基因针对致病性微生物侵染的过程，在发挥宿主细胞主动防御作用等方面具有广泛的用途。
- 专利分类
