[发明专利]一种外泌体包裹AAV载体的制备及纯化方法在审

专利信息
申请号: 202011620726.7 申请日: 2020-12-31
公开(公告)号: CN112662706A 公开(公告)日: 2021-04-16
发明(设计)人: 段莉;梁宇杰;徐晓;徐丽梅 申请(专利权)人: 深圳市第二人民医院(深圳市转化医学研究院)
主分类号: C12N15/864 分类号: C12N15/864;C12N15/87
代理公司: 北京挺立专利事务所(普通合伙) 11265 代理人: 吴彩凤
地址: 518000 广东省深*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明属于基因药物载体技术领域,公开一种外泌体包裹AAV载体、AAV靶基因载体及其制备方法和应用。将Expi293F细胞用DMEM完全培养基培养,待细胞生长至融合度达细胞培养至3–5×106活细胞/mL用于转染,转染前14h用DMEM基础培养基置换旧的培养基;将pAAV‑靶基因质粒,pAAV‑RC2质粒和pHelper质粒共转染至Expi293F细胞培养液中,37℃共转染12‑16h之后,加入无外泌体胎牛血清,继续培养48‑72h,收集上清,离心分离,获得外泌体包裹AAV靶基因载体。所述外泌体包裹AAV靶基因载体在制备治疗靶基因所对应疾病药物中的应用。本发明制备的外泌体包裹AAV靶基因载体,并进行纯化,相较于AAV靶基因载体,外泌体的天然膜结构可有效增强AAV在视网膜组织中的转运,提高靶基因转染效率。
搜索关键词: 一种 外泌体 包裹 aav 载体 制备 纯化 方法
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