[发明专利]一种菌毛亚单位蛋白EbpA1猪源粪肠球菌抗体间接ELISA检测方法在审

专利信息
申请号: 202010219003.X 申请日: 2020-03-25
公开(公告)号: CN111337670A 公开(公告)日: 2020-06-26
发明(设计)人: 王亚宾;蒋毛勤;段志刚;金钺;董家君;王芳;胡慧;陈丽颖;魏战勇 申请(专利权)人: 河南农业大学
主分类号: G01N33/569 分类号: G01N33/569;C12N15/31;C12N15/70;C07K14/315
代理公司: 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 代理人: 冉珊敏
地址: 450002 河*** 国省代码: 河南;41
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摘要: 发明属于微生物检测领域,特别是指一种菌毛亚单位蛋白EbpA1猪源粪肠球菌抗体间接ELISA检测方法。利用纯化复性后的EbpA1亚单位蛋白初步建立了间接ELISA方法,采用棋盘法确定了最佳的包被浓度为2µg/mL;封闭液可以排除其他物质的非特异性吸附,我们选用1%的BSA进行封闭,达到了较好的效果;此外,对血清、酶标二抗的稀释比例和作用时间和底物的显色时间进行了摸索,均选择最佳的条件使建立的ELISA方法达到最优水平。ELISA结果的判定:在方法建立时采用P/N﹥2.1可视为阳性;而最终的结果采用阴性样品OD450值的平均数加3倍的标准差等于阳性的临界值。
搜索关键词: 一种 菌毛亚 单位 蛋白 ebpa1 猪源粪肠 球菌 抗体 间接 elisa 检测 方法
【主权项】:
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