[发明专利]四组用于鳗弧菌识别鉴定的寡核苷酸序列及其筛选方法在审
| 申请号： | 201910826750.7 | 申请日： | 2019-09-03 |
| 公开（公告）号： | CN110578010A | 公开（公告）日： | 2019-12-17 |
| 发明（设计）人： | 郑江;刘慧敏;鄢庆枇;江兴龙 | 申请（专利权）人： | 集美大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11;C12Q1/6806;C12R1/63 |
| 代理公司： | 35203 厦门市新华专利商标代理有限公司 | 代理人： | 朱凌 |
| 地址： | 361000 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了四组用于鳗弧菌识别鉴定的寡核苷酸序列及其筛选方法，涉及鳗弧菌的识别检测技术领域，每个寡核苷酸序列的两端为固定序列，中间序列按照5'‑3'的顺序排列如下：第一组包含H1、H2两条序列；第二组包含五条序列，分别为：H5、H6、H26、H38、H33；第三组包含三条序列，分别为：H12、H25、H42；第四组包含一条序列，为：H28。每组中的任意一条寡核苷酸序列作为核酸适配体的中间序列用于鳗弧菌检测。序列筛选方法依次为：合成随机寡核苷酸文库、结合、分离、PCR扩增、高通量测序，如此循环3到5轮，最后获得目标序列。本发明缩短了鳗弧菌核酸适配体序列长度，筛选方法快速。 | ||
| 搜索关键词： | 寡核苷酸序列 鳗弧菌 中间序列 随机寡核苷酸文库 菌核 筛选 检测技术领域 高通量测序 核酸适配体 固定序列 目标序列 识别鉴定 序列筛选 适配体 合成 检测 | ||
【主权项】：
1.四组用于鳗弧菌识别鉴定的寡核苷酸序列，其特征在于：每个寡核苷酸序列的两端为固定序列，中间序列按照5'-3'的顺序排列如下：/n第一组包含两条序列：/nH1：TGCTCCTACTGACCACCCCGGCT/nH21：CTTCCCCCTGTTCTGGCCCTGCA/n第二组包含五条序列，分别为：/nH5：TCCCTCTTGTGCTCCCTCTTGTGCAGCCTGA/nH6：TCCTTCTTGTGCTCCCTCTTGTGCAGCCTGA/nH26：TCCCTCTTGTGCTCCCTCTTGTGCAGCATGA/nH38：TCCCTCTTGTGCTCCTTCTTGTGCAGCCTGA/nH33：TTCCTCTTGTGCTCCCTCTTGTGCAGCCTGA；/n第三组包含三条序列，分别为：/nH12：TCCCTCTGGGGTCTCCCTCTTGTGCAGCCTGA/nH25：TCCCTCTTGTGCTCCCTCTTGTGCAGCCTGAG/nH42：TCCCTCTTGTGCTCCCTCTTGTGCAGCCTTGA/n第四组包含一条序列，为：/nH28：CTCCCTCTTGTGCTCCCTCTTGTGCCTTCCCCCTGTTCTGGCCCTGCA/n所述的每组中的任意一条寡核苷酸序列作为核酸适配体的中间序列用于鳗弧菌的识别鉴定。/n
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- 冯婕;杜晓辰 - 中国科学院微生物研究所
- 2016-05-12 - 2020-01-21 - C12Q1/689
- 本发明涉及一种检测水产病原菌的组合物，尤其是对杀鲑气单胞菌具有特异性。该组合物能对杀鲑气单胞菌进行快速检测。根据杀鲑气单胞菌特异保守基因vapA、spsM、spsE设计引物，可在40分钟左右完成杀鲑气单胞菌的检测，灵敏度达到20cfu/反应。本发明组合物进行检测，能使反应结果检测方便、快捷。可直接观察反应体系的颜色变化来判定，反应体系由浅褐色变为荧光绿即为阳性结果。同时设备要求简单，易操作，反应速度更快。
- 一种支原体PCR通用引物及其应用-201910703993.1
- 姚茂金;任娇艳;李宇娟 - 中新国际联合研究院
- 2019-07-31 - 2020-01-17 - C12Q1/689
- 本发明公开了一种支原体PCR通用引物及其应用。本发明提供的支原体PCR通用引物是一对保守引物，其正向引物myco‑F包括21个碱基：GGC GAA TGG GTG AGT AAC ACG，反向引物myco‑R有22个碱基：CGG ATA ACG CTT GCG ACC TAT G。本发明设计的支原体PCR通用引物可快速地扩增细胞培养基中支原体的DNA序列，从而能够准确地鉴定细胞系有无被支原体污染，能够作为细胞培养过程中支原体污染的检测重要的工具；该支原体PCR通用引物应用在鉴定支原体时，具有灵敏度高、扩增结果重复性好及操作方法简单有效的特点。
- 一种检测沙门氏菌并鉴别鸡白痢/鸡伤寒血清型的双重PCR引物、试剂盒、应用和方法-201911114517.2
- 雷昌伟;王红宁;张安云;杨鑫;吴顺康 - 四川大学
- 2019-11-14 - 2020-01-17 - C12Q1/689
- 本发明公开了一种检测沙门氏菌并鉴别鸡白痢/鸡伤寒血清型的双重PCR引物、试剂盒、应用和方法；所述双重PCR引物包括用于沙门氏菌检测的STN引物组和用于鸡白痢/鸡伤寒检测的SEP引物组；所述STN引物组包括引物STN‑F和引物STN‑R；所述SEP引物组包括引物SEP‑F和引物SEP‑R；所述试剂盒包括所述的双重PCR引物；所述双重PCR检测方法包括步骤：模板DNA制备：提取待测样品DNA；双重PCR扩增：利用双重PCR引物的引物STN‑F、引物STN‑R、引物STN‑F和引物STN‑R进行双重PCR扩增；扩增产物的琼脂糖凝胶电泳检测及判断。本发明实现了一次PCR中检测沙门氏菌并同时鉴别鸡白痢/鸡伤寒血清型，优化后的双重PCR方法具有特异性良好的特点。
- 一种快速检测支原体的引物对和试剂盒及其应用-201911140433.6
- 刘中民;贾文文;白志慧;汤红明 - 上海市东方医院(同济大学附属东方医院)
- 2019-11-20 - 2020-01-17 - C12Q1/689
- 本发明提供了一种快速检测支原体的引物对和试剂盒及其应用，属于支原体检测技术领域，包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1或2所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3或4所示。采用本发明提供的引物对能够特异性检测支原体，对人源细胞和鼠源细胞基因无特异性，将所述引物对用于QPCR时能够实现对支原体的定量检测，检测限为3.1×10～2.8～10
- 一种用于鉴定HPV高危人群的标志物及其引物和检测方法-201911148423.7
- 牛晓宇;陈勉之 - 四川大学华西第二医院
- 2019-11-21 - 2020-01-17 - C12Q1/689
- 本发明公开了一种用于鉴定HPV高危人群的标志物及其引物和检测方法。该标志物包括Bifidobacterium_breve、Bifidobacterium_dentium、Atopobium、Streptococcus、Lacitobacillus_jensen和Lactibocillus_cripatus中的至少一种微生物。本发明以微生物作为HPV检测的标志物，通过对患者阴道中微生物的检测，即可区分能自发清除HPV和不能自发清除HPV的人群。
- 专利分类
