[发明专利]一种可视化检测MCR-3多粘菌素耐药基因的引物组及其检测方法在审
| 申请号： | 201910910011.6 | 申请日： | 2019-09-25 |
| 公开（公告）号： | CN110777212A | 公开（公告）日： | 2020-02-11 |
| 发明（设计）人： | 郝智慧;刘志海;郭长梅;黄亭亭 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 37231 济南智圆行方专利代理事务所(普通合伙企业) | 代理人： | 张玉琳 |
| 地址： | 266109 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种可视化检测MCR‑3多粘菌素耐药基因的引物组及其检测方法，属于细菌耐药基因的检测领域。其技术方案为：引物组包括外引物F3和B3，内引物FIP和BIP；在62℃对DNA样品进行LAMP扩增反应，在LAMP反应体系中预先添加适量羟基萘酚兰(HNB)，通过观察反应液的颜色变化判断待测物中是否存在MCR‑3基因。本发明的有益效果为：本发明能够在恒温条件下快速、高效、高特异、高灵敏地检测到MCR‑3基因，无需昂贵复杂的仪器，为细菌耐药基因的检测提供了新的方法，具有较大的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 细菌耐药基因 引物组 检测 可视化检测 内引物FIP 多粘菌素 恒温条件 检测领域 耐药基因 颜色变化 羟基萘酚 基因 待测物 外引物 灵敏 观察 应用 | ||
【主权项】：
1.一种可视化检测MCR-3多粘菌素耐药基因的引物组及其检测方法，其特征在于，所述引物组包括外引物F3和B3，内引物FIP和BIP；/n所述引物组中各引物的核苷酸序列分别如下所示：/n所述外引物F3：CAACACCATCCGCTACAC；/n所述外引物B3：TCCAGGTGACATCCACAC；/n所述内引物FIP：AGCAACGCGGTGTTGTACTTGATTGGAGAGATGATTGCCA；/n所述内引物BIP：CATGGTGAATCACTGGGAGCATTAAGGAACACGGGTCTGATC；/n所述检测方法包括以下步骤：/nS1、提取待测样品的DNA；/nS2、以步骤S1中提取的基因组DNA为模板，在所述引物组的引导下进行等温LAMP 扩增反应，在LAMP反应体系中预先添加适量羟基萘酚兰(HNB)；/nS3、结果判定：根据步骤S2中的反应液的颜色变化判断结果，天蓝色表示待测样品中存在MCR-3基因，紫色表示待测样品中不存在MCR-3基因。/n
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