[发明专利]一种发酵生产杆菌肽的方法有效
| 申请号： | 201811403100.3 | 申请日： | 2018-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN109608522B | 公开（公告）日： | 2022-11-18 |
| 发明（设计）人： | 李军;郭绍定;唐静;黄晔;柴小涛;明国军 | 申请（专利权）人： | 江苏九阳生物制药有限公司 |
| 主分类号： | C07K7/58 | 分类号： | C07K7/58;C12P21/04 |
| 代理公司： | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人： | 陈娟 |
| 地址： | 224300 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种发酵生产杆菌肽的方法，包括发酵液预处理、树脂吸附、树脂分离和漂洗、解析脱氨、一次纳滤以及萃取浓缩六大步骤；本发明制备的杆菌肽通过加入硫代硫酸钠以及密封操作使得杆菌肽不会被氧化，从而极大的提高了杆菌肽最终的效价，其医用价值更高，而且本发明操作简单、制备周期短，可用于大量工业生产杆菌肽。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 发酵 生产 杆菌 方法 | ||
【主权项】：
1.一种发酵生产杆菌肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)发酵液预处理：取重量为1000份的发酵液，并向发酵液中加入重量为30‑60份的硫代硫酸钠后搅拌均匀，再将发酵液泵入预处理罐内，加入酸化剂调节PH至2.5‑3.0，搅拌1h；2)树脂吸附：向步骤1中酸化后的发酵液中加入液碱调节PH至4.0‑4.5，然后按放罐效价投入001×1.1‑H+吸附树脂对杆菌肽吸附3‑6h，使得吸附尾液中杆菌肽含量不超过50U/ml；3)树脂分离、漂洗：吸附完成后的树脂经树脂分离器将饱和树脂和料液分离，然后用去离子水漂洗至水清澈且无漂浮物；4)解析脱氨：漂洗后的树脂经过真空抽入解析柱内，然后用去离子水对树脂全方位清洗至水澄清后，通入浓度为2.5‑3.5％的氨水进行解析，并将解析液经脱氨柱内001×14‑H+脱氨树脂进行脱氨，当脱氨液由无色变为浅黄色时，收集脱氨液于储存罐中，并加入重量为2‑8份硫代硫酸钠，当脱氨柱出口的脱氨液PH≧8.5时，停止收集；5)一次纳滤：将步骤4中的收集液通过纳膜浓缩至原体积8‑10％；6)萃取浓缩：将一次纳滤后的浓缩液放入萃取罐中，并加入重量为2‑5份的硫代硫酸钠，充分搅拌后加入萃取剂进行萃取，向萃取液中加入沉淀剂后，沉淀过滤后，对滤液进行浓缩干燥即得杆菌肽。
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