[发明专利]用于rs1801177检测的电化学DNA生物传感器制备方法在审
| 申请号： | 201811344504.X | 申请日： | 2018-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN109536576A | 公开（公告）日： | 2019-03-29 |
| 发明（设计）人： | 于超;周媛;吴静 | 申请（专利权）人： | 重庆医科大学 |
| 主分类号： | C12Q1/44 | 分类号： | C12Q1/44;C12Q1/00;G01N27/48;G01N27/327 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 400016*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明涉及可用于LPL基因SNP(rs1801177)检测的电化学DNA生物传感器的制备方法，属于电化学检测技术领域。其特征在于：首先在氮掺杂石墨烯(N‑G)片表面负载大量钯铂双金属(PdPt)纳米粒子，然后在其表面原位聚合形成聚苯胺得到纳米复合材料，接着将单链DNA信号探针与该复合材料混合，制得氧化还原探针；然后通过C60/PAMAM/Au纳米复合材料将捕获探针固定在传感器表面，从而制备了对rs1801177进行定量检测的电化学DNA生物传感器，该传感器成功用于脂蛋白脂肪酶基因的单碱基突变的检测。本发明的优点在于灵敏度高，特异性强，检测方便、快捷，为rs1801177的检测提供了新方法，也为心血管疾病的临床诊断与预防提供了理论依据和实验基础。 | ||
| 搜索关键词： | 电化学 检测 制备 纳米复合材料 电化学检测技术 氮掺杂石墨烯 脂蛋白脂肪酶 传感器表面 单碱基突变 心血管疾病 表面负载 表面原位 捕获探针 定量检测 临床诊断 纳米粒子 实验基础 特异性强 信号探针 氧化还原 单链DNA 复合材料 聚苯胺 灵敏度 双金属 传感器 可用 探针 钯铂 聚合 基因 预防 成功 | ||
【主权项】：
1.一种用于脂蛋白脂肪酶(LPL)基因单核苷酸多态性(SNP)(rs1801177)检测的电化学DNA生物传感器制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)富勒烯(C60)/聚酰胺树枝状聚合物(PAMAM)/金纳米粒子(Au)纳米复合材料的制备；(2)氮掺杂石墨烯(N‑G)/钯铂双金属(PdPt)/聚苯胺(PANI)纳米复合材料的制备；(3)建立电化学DNA生物传感器，测定rs1801177，绘制标准曲线。
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- 2015-01-21 - 2017-06-30 - C12Q1/44
- 本发明公开了一种适度水解磷脂酸的方法，具体涉及一种提高磷脂酶A1水解磷脂酸效率的方法。针对PLA1水解磷脂酸中间产物不稳定，水解效率低，水解液中游离脂肪酸含量高，水解时间长等一系列问题，而提出的一种适度水解磷脂酸的方法。包括如下步骤一、PLA1水解磷脂酸产物Sn‑2‑LPA的酰基转移机理的研究；二、Sn‑2‑ LPA酰基转移影响因素的研究；三、PLA1适度水解磷脂酸程度的研究。利用PLA1适度水解磷脂酸，稳定剂的加入及水解条件的有效控制，使得PLA1的酶解时间缩短了33%，提高了反应效率，体系中FFA含量减低了8.93%，达到适度水解的目的。
- 高密度脂蛋白2中的胆固醇的定量方法和用于该方法的试剂盒-201280020681.7
- 樋口麻衣子;伊藤康树 - 电化生研株式会社
- 2012-02-27 - 2017-05-10 - C12Q1/44
- 本发明公开了一种不必进行繁杂的操作，即可定量受检样品中的HDL2胆固醇的方法。胆固醇的定量方法包括使磷脂酶与HDL发生作用，来定量胆固醇。该方法包括步骤一，使受检样品中的高密度脂蛋白以外的胆固醇转移到反应系统外；以及步骤二，定量反应系统内残留的高密度脂蛋白中的高密度脂蛋白2胆固醇，通过利用该方法进行步骤二，可以定量受检样品中的高密度脂蛋白2胆固醇。
- 一种大肠杆菌和/或沙门氏菌和/或单增李斯特菌产酶共培养基-201710106071.3
- 夏利宁;姚刚;帕力达·亚森;苏战强;刘英玉;钟旗;郑小凤;张琦;张晓红 - 新疆农业大学
- 2017-02-27 - 2017-04-26 - C12Q1/44
- 本发明属于生物技术领域，具体公开一种大肠杆菌和/或沙门氏菌和/或单增李斯特菌产酶共培养基，该培养基每升无菌蒸馏水中包含酪蛋白酶消化物17g、酵母膏6g、葡萄糖2.5g、大豆胨3g、氯化钠5g、磷酸二氢钾1.35g、磷酸氢二钾2.5g、磷酸氢二钠9.6g及丙酮酸钠1.1g；上述物质溶解于无菌蒸馏水后，经121℃高压灭菌15min，冷至室温，冷藏保存即可制得该培养基。实践中不但大大提高了检测速度，也保证了检测效果的可靠性，效果十分显著。
- 一种包括肝羧酸酯酶1的用于诊断肝癌的血浆生物标记物工具及肝癌筛选方法-200880129216.0
- 白融基;罗根 - 延世大学校产学协力团
- 2008-10-01 - 2017-03-29 - C12Q1/44
- 本发明涉及一种用于诊断肝癌(HCC)的血浆生物标记物，具体来讲，本发明使用双向荧光差异凝胶电泳(2‑D DIGE)、免疫沉淀以及纳升液相色谱质谱(Nano‑LC‑MS/MS)系统发现了血浆中的一种基于传统技术处于未知的蛋白。通过证明人血浆中肝羧酸酯酶1(hCE1)的存在并证实人肝羧酸酯酶1在患有HCC的病人中的分泌水平高于健康志愿者的分泌水平，可将本发明用作HCC早期诊断的筛选方法。
- 一类检测羧酸酯酶1的高特异性荧光探针的应用-201611118500.0
- 崔京南;冯磊;王铮 - 苏州尚稷电子科技有限公司
- 2016-12-07 - 2017-03-08 - C12Q1/44
- 一类检测羧酸酯酶1（Carboxylesterase 1，CE1）的高特异性荧光探针的应用，其属于精细化工领域。该特异性探针底物是2‑羟基‑3‑烯丙基苯并噁唑类化合物酯类衍生物，其可用于检测不同生物样品中CE1的存在与否及其活力的定量测定。酶活具体测定流程如下选择2‑羟基‑3‑烯丙基苯并噁唑酯类衍生物水解反应为探针反应，选择适宜底物浓度在线性反应区间内通过定量检测单位时间内其水解代谢产物2‑羟基‑3‑烯丙基苯并噁唑的生成量来测定各生物样品、细胞、在体及整体器官中CE1酶的实际活性。该探针不仅可用于不同来源生物样本中CE1酶活的定量评估，此外借助该探针反应还可用于体外快速筛选CE1的抑制剂。
- 一种耐高温植酸酶活性评估方法-201611077820.6
- 刘娇;王昕陟;李东全;杨光;郭伟;王密;李忠秋;孙丹彤 - 沈阳波音饲料有限公司
- 2016-11-30 - 2017-02-22 - C12Q1/44
- 本发明适用于饲料原料及加工工艺技术领域，提供了一种耐高温植酸酶活性评估方法，解决目前植酸酶的测定方法没有充分考虑实际生产环境中的各个环节对耐高温植酸酶影响的问题,该方法包括以下步骤:首先将饲料样品与高温植酸酶充分混合，然后放置高压灭菌锅内在75℃‑90℃反应3min，反应结束后迅速将铝塑袋取出置于冰水混合物中快速冷却至室温；然后在体外微环境进行模拟消化，最后采用比色法测磷，得出在模拟胃环境中植酸酶作用饲料样品释放的水溶性磷含量，对耐高温植酸酶的活性进行评估。本发明通过模拟制粒的高温、高湿环境和胃环境内底物多释放水溶性磷的多寡，来判定耐高温植酸酶在模拟制粒过程后在体内的实际作用效果。
- 专利分类
