[发明专利]一种海洋微生物环糊精葡萄糖基转移酶的固定化方法在审
| 申请号： | 201811071017.0 | 申请日： | 2018-09-14 |
| 公开（公告）号： | CN108977430A | 公开（公告）日： | 2018-12-11 |
| 发明（设计）人： | 郝建华;孙晶晶;王伟;刘均忠 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
| 主分类号： | C12N11/10 | 分类号： | C12N11/10;C12N11/02 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 266071 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供一种海洋微生物环糊精葡萄糖基转移酶的固定化方法，属于生物技术领域，发明采用分子筛SBA‑15进行吸附‑交联‑包埋复合固定化，固化条件为酶浓度2U/ml、分子筛浓度2g/L、戊二醛浓度0.01％、吸附时间6h、交联时间5h、CaCl2浓度4％、硬化时间1h。本发明方法对海洋微生物环糊精葡萄糖基转移酶固定化后，酶稳定性好，操作简单，重复使用性好，催化效率高。 | ||
| 搜索关键词： | 环糊精葡萄糖基转移酶 海洋微生物 固定化 分子筛 交联 吸附 生物技术领域 重复使用性 催化效率 复合固定 固化条件 酶稳定性 戊二醛 包埋 硬化 | ||
【主权项】：
1.一种海洋微生物环糊精葡萄糖基转移酶的固定化方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)选择分子筛SBA‑15作为固定化吸附载体；(2)将酶粉溶解于缓冲液中制成酶溶液，并与固定化吸附载体SBA‑15混合，振荡吸附；所述酶为海洋微生物Y112生产的环糊精葡萄糖基转移酶；(3)将戊二醛溶液加入到步骤(2)得到的溶液中，振荡交联；(4)将海藻酸钠溶液加入到步骤(3)得到的溶液中，用注射器逐滴滴入CaC12溶液中硬化，抽滤获取固定化酶凝胶珠，用蒸馏水多次冲洗至无CaC12残留。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国水产科学研究院黄海水产研究所，未经中国水产科学研究院黄海水产研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201811071017.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 用于催陈和澄清山西老陈醋的共固定化酶的制备方法-201610062125.6
- 王如福;王冕;李玉萍;侯红萍;霍乃蕊;张茜;段国锋;王争争;陈嘉;张慧霞;王媛慧;王鈺平;焦玉双;王进龙;张怀敏;李江涌 - 山西农业大学
- 2016-01-29 - 2019-11-01 - C12N11/10
- 一种用于催陈和澄清山西老陈醋的共固定化酶的制备方法,包括制备酯化酶酶液、糖化酶酶液，然后取海藻酸钠与黄原胶质量比为5:1制成的载体材料，用其质量55‑60倍的50‑60℃水溶解，常温下加入一定量的酯化酶液，搅拌均匀后静置，待气泡完全消失后，在4‑5℃条件下，缓慢滴入2%的氯化钙水溶液中，固化1 h后生成颗粒物，然后用两层纱布滤出颗粒物，用pH 3.6的乙酸‑乙酸钠缓冲液冲洗颗粒物3~5次，除去表面的氯化钙，吸干表面的水分，制成直径2.0‑2.3 mm的颗粒状固定化酶；再按固定化酶与糖化酶液质量体积比为1:1、将固定化酶放入糖化酶液中吸附6‑7 h，然后用纱布滤出颗粒，再用pH 4.6乙酸‑乙酸钠缓冲液冲洗颗粒3~5次，除去表面酶液，吸干表面水分，制得共固定化酶。
- 一种乳酸菌冻干粉的两次八层包埋方法-201910648811.5
- 潘玉林;马明磊;司书锋;王维新;曹维超;张永娟;李翠华;孙川 - 山东中科嘉亿生物工程有限公司
- 2019-07-18 - 2019-10-22 - C12N11/10
- 本发明涉及乳酸菌的技术领域，具体来说，是一种提高冻干存活率和保护乳酸菌生物活性的两次八层包埋技术，具体为一种乳酸菌冻干粉的两次八层包埋方法。在乳酸菌发酵终点处，在发酵液中加入灭过菌的壳聚糖，搅拌均匀，然后进行离心，得到离心后的菌泥，在离心后的菌泥中加入按菌泥重量计的15.0％‑35.0％冻干保护剂进行冻干，将普鲁兰多糖雾化，对菌粉进行喷干。发明降低冻干过程中菌数死亡率，提高冻干后菌粉活性、提高收得率、降低常温放置的死亡率、提高乳酸菌粉耐胃酸、胆盐的能力。
- 一种细菌固定化方法及应用-201910572216.8
- 李笃信;赵磊;张健;张真庆 - 苏州大学
- 2019-06-28 - 2019-10-18 - C12N11/10
- 本发明公开了一种细菌固定化方法及应用，将LH‑52、TM‑30、EggerthellaYY7918等三种菌包埋到载体微球上，再将此固定化细菌微球装填到层析柱中，制成微生物反应器。本发明通过固定化细菌方法，提高了细菌的利用率，而且可以回收重复使用；通过装入层析柱中，可以用于连续生产。同时，所得到的菌种固定化球生产成本低，菌体附着牢固，菌种具有较高的活性和较长的使用寿命，可高效生产S‑雌马酚。
- 具备自养脱氮功能的复合微生物载体及制备方法与应用-201910443762.1
- 曾明;杨俊锋;吴梓萌;姜昕叶;韩茜雅;吴楠 - 天津科技大学
- 2019-05-27 - 2019-09-24 - C12N11/10
- 本发明涉及一种具备自养脱氮功能的复合微生物载体及其制备方法与应用，在厌氧氨氧化生物膜填料表面负载一层包埋了好氧活性污泥的凝胶。制备方法为将一定量的凝胶材料与水混合，混合均匀后，冷却，加入一定量的活性污泥混合充分后制成具有一定粘度的凝胶液体；把一定量的附着了厌氧氨氧化生物膜的填料放入制得的凝胶液体中，混合均匀；取出表面负载了凝胶的填料，静置一段时间，在自身重力作用下去掉多余的凝胶；放入一定浓度的交联液中进行交联，之后取出填料用水洗去多余的交联液，得到复合微生物载体。发明利用厌氧氨氧化生物膜技术和凝胶包埋技术，制备一种具备自养脱氮功能的复合微生物载体，能够快速实现生活污水的同步短程硝化厌氧氨氧化过程。
- 一种固定化菌藻微球的制备方法及其应用-201910529639.1
- 崔康平;李明泽;许为义;郭志;韦林;田晨 - 合肥工业大学
- 2019-06-19 - 2019-09-20 - C12N11/10
- 本发明公开了一种固定化菌藻微球的制备方法及其应用，采用PVA和海藻酸钠复合载体包埋的方法来固定化菌藻，运用固定化菌藻微球中包埋的藻液和菌液的协同作用，使得水体中的氮磷和有机物降解，在处理黑臭水中避免外界水体有毒物质对菌类和藻类的毒害作用。固定化菌藻微球相比较游离小球藻和细菌对黑臭水具有较好的脱氮除磷效果。
- 固定化酮还原酶突变体及其在制备奈必洛尔手性醇中间体及其类似物中的应用-201910529412.7
- 林涛;徐明文;蒋丽丽;于丽珺 - 南京趣酶生物科技有限公司;上海仁酶生物科技有限公司
- 2019-06-19 - 2019-09-10 - C12N11/10
- 固定化酮还原酶突变体及其在制备奈必洛尔手性醇中间体及其类似物中的应用。本发明提供了固定化酮还原酶突变体，其特征在于，所述的固定化酮还原酶突变体为酮还原酶突变体的固定化细胞或固定化酶，固定化酶是所述的突变体固定化于固相支撑物上；固定化细胞是所述的酮还原酶突变体表达于固定化于固相支撑物上的微生物细胞中，所述的酮还原酶突变体选自ET016、ET017或ET031酮还原酶。本发明具有如下技术效果：1）本发明的固定化酮还原酶突变体，可作为催化剂，与辅酶再生体系共同用于制备奈必洛尔手性醇中间体及其类似物，反应转化率可达90%、95%或99%以上，产物的手性纯度值可达90%、95%或99%以上。2）固定化后的酶或细胞可以通过简单的过滤进行回收，回收后可以反复使用7‑10次，且重复使用时与初次使用的反应转化率和手性纯度值基本相同。
- 一种脂肪酶的固定化方法-201611000207.4
- 林朝阳;沈志成 - 浙江大学
- 2016-11-14 - 2019-08-13 - C12N11/10
- 本发明公开了一种脂肪酶的固定化方法，所述方法为：将脂肪酶、蛋白连接肽和壳聚糖结合域氨基酸序列依次连接成脂肪酶融合蛋白，以壳聚糖为载体，将脂肪酶融合蛋白进行固定化，得到固定化脂肪酶；本发明固定化脂肪酶经过十五次的回收利用固定化脂肪酶融合蛋白催化的棕榈酸十六酯的转化率仍能保持在90％；本发明方法可以规模化生产，可以提高脂肪酶生产量，降低生产成本。
- 一种固定化马铃薯多酚氧化酶及其农残降解应用-201810097041.5
- 吴非;刘承帅;高庭;吕亚辉;李芳柏 - 广东省生态环境技术研究所
- 2018-01-31 - 2019-08-06 - C12N11/10
- 本发明提供了一种固定化马铃薯多酚氧化酶及其农残降解应用。使用本发明的固定化多酚氧化酶及降解农产品残留农药污染的方法，在短时间内对农产品残留农药的降解率均达60％以上，能够简单快速有效地去除农产品中的农药残留，不需要进行酶的失活处理，也不需要调整pH值，处理过程简单易操作，且不会产生二次污染。本发明的固定化多酚氧化酶的制备方法原料来源简单，廉价易得，产量大，固定化效率高、稳定性好。本发明的固定化马铃薯多酚氧化酶属于食品级，可直接喷洒在农产品表面，或者直接在农产品采摘后的加工过程中添加，对农药的降解效果稳定，对环境具有较强的适应性，应用前景良好。
- 一种制备细胞块的方法及用于制作细胞块的试剂盒-201910439223.0
- 贾世军;姚宇琪 - 四川省肿瘤医院
- 2019-05-24 - 2019-08-02 - C12N11/10
- 本发明涉及一种制备细胞块的方法及用于制作细胞块的试剂盒，其中，所述制备细胞块的方法，采用海藻酸钠溶液和氯化钙溶液作为将缺乏粘附性的松散细胞样本网罗聚集起来的凝固剂；本方法制备细胞块，过程简单、操作简便，整个制备过程，不仅无异源性蛋白成分，减少后续免疫染色时的非特异性着色，而且在常温下即可进行，无需额外进行加热、温度控制等操作，避免高温对细胞的影响；此外，用于制备细胞块的海藻酸钠溶液和氯化钙溶液成本低，且可以长期保存，两种溶液混合后会在短时间内形成固态，可以将松散的细胞网罗起来凝聚成团，大大方便了细胞块的制作。
- 一种增强干细胞血液适应能力的方法-201910403671.5
- 华子昂;刘宝全;竹添;张建;王姣;佟明斯 - 刘宝全
- 2019-05-15 - 2019-07-30 - C12N11/10
- 一种增强干细胞血液适应能力的方法，本发明涉及一种增强干细胞血液适应能力的方法。本发明的目的是为了解决现有干细胞血液适应能力差，导致进入血液后成活率低的问题，本发明将培养的干细胞置于封闭的培养体系中，调整培养体系的压力，尤其是模拟人体血液的压力变化，使干细胞地培养过程中就经历血液血压训练，保证只有适应血液压力变化的干细胞生长，从而保证干细胞进入血液后活性。干细胞培养体系的压力可以通过气体媒介完成，也可以通过液体媒介完成，与无压力培养相比，加压培养后干细胞入血液后的成活率提高5‑15％。本发明应用于干细胞领域。
- 一种壳聚糖/微介分子筛固定化漆酶制备方法、一种含酚废水的降解方法-201610554254.7
- 唐海;魏彬;刘方舟;徐建平 - 安徽工程大学
- 2016-07-14 - 2019-07-30 - C12N11/10
- 本发明提供了一种壳聚糖/微介分子筛固定化漆酶制备方法、一种含酚废水的降解方法。与现有技术相比，本发明以具有微介双孔ZSM‑5分子筛为载体，采用物理吸附固定化漆酶，以壳聚糖包裹固定化漆酶的ZSM‑5分子筛，制作固定化小球，解决了分子筛对漆酶吸附良好性能但对酶负载不稳固易脱落，壳聚糖具有良好的生物兼容性和适应性但是酶固定化面积小固定化效率低缺点。
- 一种高活性微生物土壤修复剂的制备方法-201811404735.5
- 马步华 - 广东省中药研究所
- 2018-11-23 - 2019-07-23 - C12N11/10
- 本发明公开了一种高活性微生物土壤修复剂的制备方法，包括如下步骤：（1）包埋型高活性微生物的制备；（2）原料称取；（3）成品制备。本发明最终制备的微生物土壤修复剂，适用于各种污染性质的土壤，能够持久有效的降解污染物，降低其在环境中的可迁移性与生物可利用性，改良土壤肥力，提高作物的产量和品质，极具市场推广应用价值。
- 一种球形固定化含D-泛解酸内酯水解酶细胞及其制备方法和水解D-泛解酸内酯的方法-201910203561.4
- 孟小川;刘树蓬;郭恒华;张冬竹;章晖;田宋魁 - 合肥华恒生物工程有限公司
- 2019-03-18 - 2019-07-12 - C12N11/10
- 本发明属于生物催化技术领域，具体涉及一种球形固定化含D‑泛解酸内酯水解酶细胞及其制备方法和水解D‑泛解酸内酯的方法。所述球形固定化含D‑泛解酸内酯水解酶细胞的制备方法，包含如下步骤：以海藻酸钠、明胶和聚乙烯醇为原料制备固定化载体，以含CaCl2的硼酸溶液为固化剂，固定化产D‑泛解酸内酯水解酶大肠杆菌得到固定化含D‑泛解酸内酯水解酶细胞。本发明的球形固定化含D‑泛解酸内酯水解酶细胞对D‑泛解酸内酯的选择性高，重复使用性好。
- 一种负载浸矿微生物的包埋体、制备方法和培养方法-201910302360.X
- 周洪波;周文博;孙见行;程海娜;王玉光 - 中南大学
- 2019-04-16 - 2019-07-12 - C12N11/10
- 本发明属于微生物包埋体领域，具体涉及到一种负载浸矿微生物的包埋体、制备方法和培养方法，负载浸矿微生物的包埋体为中间填充浸矿微生物的核壳结构，核结构为营养丸，营养丸为含有营养液的包埋剂交联后形成的颗粒，所述营养液为不含能源物质的培养液；壳结构为交联剂附着在营养丸后形成的包被膜，包被膜为网状的膜结构；所述包被膜和营养丸之间为浸矿微生物。本发明解决了浸矿微生物在培养过程中营养物质的利用和能源物质消耗不匹配的难题，克服了生物浸出过程中浸矿微生物在浸出环境中的难适应、易中毒、多流失等问题，解决浸矿微生物的难保藏、难运输等问题，使浸矿微生物更加方便利用，浸出效率得以提高。
- 用于酶固定化的改性壳聚糖微球、其制备方法及应用-201510875790.2
- 熊春华;缪喜喜;皮蕾蕾;李建丹;张润润 - 浙江工商大学
- 2015-12-02 - 2019-06-21 - C12N11/10
- 本发明公开了一种用于酶固定化的改性壳聚糖微球、其制备方法及应用，上述制备方法包括：在0.5g壳聚糖粉末中加入质量分数为5%的乙酸溶液，充分溶解后，加入液体石蜡，搅拌10分钟，升温至50℃，滴加乳化剂Span80，乳化10分钟；加入0.5～2.0mL的甲醛溶液，搅拌反应1.5小时；升温至70℃，滴加质量分数为10%的NaOH溶液，在缓慢滴加1.0～2.5mL的环氧氯丙烷，反应5小时；过滤，用蒸馏水、石油醚、无水乙醇洗涤、水洗涤，得到壳聚糖微球（NCTS）；在50mgNCTS中加入50mL N,N‑二甲基甲酰胺(DMF)，浸泡过夜后；加入250mg乙二胺，在氮气保护下于90℃下搅拌反应12小时，用1mol/L的盐酸加热处理9小时，进行碱洗、酸洗、水洗，再干燥至恒重，得到改性壳聚糖微球（NCTS‑EDA）。本发明提供固定化酶的良好载体。
- 用于酶固定化的磁性壳聚糖微球、其制备方法及应用-201510875758.4
- 沈忱;缪喜喜;皮蕾蕾;李建丹;余欣龙 - 浙江工商大学
- 2015-12-02 - 2019-06-18 - C12N11/10
- 本发明公开了一种用于酶固定化的磁性壳聚糖微球、其制备方法及应用，上述制备方法包括：在0.5g壳聚糖粉末和0.125g纳米四氧化三铁中加入质量分数为4%的乙酸溶液，待壳聚糖粉末充分溶解后，加入液体石蜡，250r/min转速下搅拌10分钟；升温至50℃，滴加乳化剂Span80，乳化10分钟；加入1.0mL的甲醛溶液，搅拌反应1.5小时；升温至70℃，滴加质量分数为10%的NaOH溶液，在溶液pH值保持为碱性条件下，缓慢滴加2.0mL的环氧氯丙烷，反应5小时；过滤，用蒸馏水洗涤，再依次用石油醚、无水乙醇洗涤、水洗涤，直至洗涤液的pH值达到中性，再干燥至恒重，得到用于酶固定化的磁性壳聚糖微球（MCTS）。本发明能够提供固定化酶的良好载体。
- 一种斯氏普罗威登斯菌酶剂的制备方法及应用-201910204712.8
- 吴小毛;张承;李荣玉;龙友华;李姣红;王秋萍;黄文源;代园凤 - 贵州大学
- 2019-03-18 - 2019-05-31 - C12N11/10
- 本发明公开了一种斯氏普罗威登斯菌酶剂的制备方法及应用，其以斯氏普罗威登斯菌(Providencia stuartii)CCTCC M 2017738为菌种，经菌悬液扩繁和降解酶剂超声破碎提取制备而得斯氏普罗威登斯菌降解酶剂。该降解酶剂可应用于于高效降解油菜、大白菜、紫菜苔、生菜、韭菜、黄瓜、番茄、辣椒、马铃薯、烟草等植物体中以及土壤和水体中的菌核净、烯菌酮和异菌脲。具有速效性好、环境友好、效果显著、成本低廉和易于推广等优点。
- 固定化微生物批量制备的方法-201711106784.6
- 安立超;陈圳;戴昕 - 南京理工大学
- 2017-11-10 - 2019-05-17 - C12N11/10
- 本发明公开了一种固定化微生物批量制备的方法。所述方法先加热将聚乙烯醇充分溶解在水中，继续加入海藻酸钠和二氧化硅并充分溶解，得到PVA‑SA水凝胶溶液，再将微生物硝化菌剂与PVA‑SA水凝胶溶液充分搅拌混合，最后将混合物滴入到硼酸与硫酸铝配置的交联剂中，得到固定化微生物。本发明使用机械设备对固定化微生物进行批量制备，确定了合适的固定化微生物配方及生产中的控制因素，保证了批量制作中性能和生产的稳定性，推动包埋固定化微生物技术在工业化中的运用和发展。
- 脱除重金属酵母小球造粒工艺-201811625616.2
- 徐莹;张丹丹;陈鹏;封福鲜;吴岩强;汪东风 - 中国海洋大学;大连棒棰岛海产股份有限公司
- 2018-12-28 - 2019-05-17 - C12N11/10
- 本发明公开了一种脱除重金属酵母小球造粒工艺，步骤如下：将酵母菌，经过固体活化和液体活化并扩大培养之后，用无菌水清洗，离心得到酵母菌泥；配制0.5%‑5%的海藻酸钠水溶液，超声排气；用搅拌器将海藻酸钠水溶液与酵母菌泥按1‑4:1的体积比混匀；将匀混的海藻酸钠‑酵母菌泥混合液滴入0.5%‑5%的氯化钙溶液中造粒；制成的固定化酵母小球在氯化钙溶液中静置30min‑2h，然后用纱布过滤，随后用蒸馏水将小球再进行二次清洗，洗去上面残余的氯化钙溶液。造粒得到的固定化微生物酵母小球具有良好的重金属脱除效果，而且在确定微生物包埋率的情况下，确定了海藻酸钠与酵母菌泥的合理的体积比，既保证包埋效果好，也能减少海藻酸钠或者酵母菌泥的用量，达到节约成本的目的。
- 一种活化谷氨酰胺转氨酶酶原的方法-201811647908.6
- 史百鸣;王运龙;卢雪峰;李国莹;陆瑞琪 - 江苏一鸣生物股份有限公司
- 2018-12-30 - 2019-04-12 - C12N11/10
- 本发明涉及食品加工技术领域，尤其是一种活化谷氨酰胺转氨酶酶原的方法，包括以下步骤；步骤一、配料：壳聚糖、4%的醋酸溶液、液体石蜡、乳化剂、致孔剂乙酸乙酯、壳聚糖凝胶、戊二醛溶液、10%的无水乙醇和谷氨酰胺转氨酶酶原溶液；步骤二、制取壳聚糖固形胰蛋白酶微粒；步骤三、将固定化胰蛋白酶微粒制成2‑4cm厚的填充床；步骤四、将谷氨酰胺转氨酶酶原溶液通过填充床进行活化，本发明固相的固定化胰蛋白酶与液相的谷氨酰胺转氨酶酶原是异相反应体系，可以很容易的通过过滤分离，不会引入新的杂质，对下一步谷氨酰胺转氨酶的纯化有利，固定化胰蛋白酶微粒制成的填充床可重复多次使用，活化成本低。
- 利用氧化石墨烯改性海藻酸钙制备固定化微生物的方法-201610092173.X
- 王建龙;陈灿 - 清华大学
- 2016-02-18 - 2019-04-05 - C12N11/10
- 本发明公开了属于环境科学技术领域的一种利用氧化石墨烯改性海藻酸钙制备固定化微生物的方法。将海藻酸钠、氧化石墨烯完全溶于去离子水后，加入待固定化的微生物，混合均匀，获得含待固定化微生物的混合溶液；然后将含待固定化微生物的混合溶液滴加到交联剂溶液中，形成球形颗粒，并浸泡2‑24h后，将形成的球形颗粒经纱布过滤取出，去离子水洗涤，获得固定化微生物颗粒。所述方法操作简单、成本低、效果好，所制备的固定化微生物颗粒，机械强度与化学稳定性好，适应性强，具有优良的生物吸附性能，可应用于重金属废水和放射性废水的处理领域。
- 一种褐藻胶裂解酶固定化酶的制备方法-201811629201.2
- 宋海妹;单俊伟;张术聪 - 青岛海大生物集团有限公司
- 2018-12-28 - 2019-03-29 - C12N11/10
- 本发明公开了一种褐藻胶裂解酶固定化酶的制备方法，采用壳聚糖、罗望子胶－戊二醛交联吸附的方法，将褐藻胶裂解酶固定于介质之上，它包括壳聚糖载体的精制、交联试剂的配制、壳聚糖、罗望子胶－戊二醛的交联、褐藻胶裂解酶的提取及固定等步骤。本发明所制备的褐藻胶裂解酶固定化酶，催化能力和对不同环境(温度、pH、贮存时间)的稳定性都有明显提高，用固定化酶处理海藻酸钠，采用离子树脂吸附降解产物，筛网过滤的方法回收固定化酶，采用超滤膜过滤的方法回收游离状态的酶，可以反复利用，提高了褐藻寡糖的得率，生产过程简单，生产成本大幅度下降，满足了褐藻寡糖产品的工业化生产要求。
- 一种白腐菌生物微球及制备方法-201610635776.X
- 李彦春;徐旭东;祝德义 - 齐鲁工业大学
- 2016-08-05 - 2019-03-26 - C12N11/10
- 本发明涉及一种白腐菌生物微球及制备方法，步骤包括制备植物秸秆粉末与白腐菌的共基质体和制备白腐菌生物微球，白腐菌生物微球内包埋植物杆粉末与白腐菌的共基质体。本发明制备的生物微球克服了目前白腐菌处理废水时稳定性低、固定化白腐菌消耗营养基来源的问题，可以用于处理制革、毛皮、纺织印染等行业产生的废水，其无需外加营养源，环境适应性强，降解能力强，无毒，无安全隐患。
- 一种固定化蚯蚓纤溶酶的磁性微球的制备方法-201510701431.5
- 赵钟兴;雷敬玲;王朝阳;苗剑;王欣辉;陶萌良;谢美萱 - 广西大学
- 2015-10-27 - 2019-03-12 - C12N11/10
- 本发明公开了一种固定化蚯蚓纤溶酶的磁性微球的制备方法，先将猪肺抑肽酶溶于pH7～9的缓冲液中得到蛋白酶缓冲液，再将其加入到经过活化的磁性壳聚糖微球中，水浴振荡偶联4～8h后得到偶联猪肺抑肽酶的磁性壳聚糖微球；再将其加入蚯蚓纤溶酶粗酶溶液在30‑60℃恒温水浴摇床中振荡固化反应0.5‑3h；反应结束后，反复洗涤至洗涤液中检测不出蛋白为止，磁铁分离收集即可得到固定化蚯蚓纤溶酶的磁性微球，其酶活性为15‑30U/mg。本发明以猪肺抑肽酶为配基，与磁性微球偶联，运用用于蚯蚓纤溶酶的分离纯化，提高了蚯蚓纤溶酶的分离纯化选择性，而且磁性微球易于与蚯蚓纤溶酶分离。
- 海藻酸钠复合固定化菌剂及其制备方法以及用途-201610225872.7
- 张可;陈强;罗鸿兵;陈伟;陈佳 - 四川农业大学
- 2016-04-13 - 2019-03-12 - C12N11/10
- 本发明公开了海藻酸钠复合固定化菌剂及其制备方法，解决了现有技术中并没有适用于二氯喹啉酸降解用假单胞菌的固定化方式的问题。本发明包括将具有假单胞菌的载体培养基和海藻酸钠混合后，滴入浓度为1～4%的氯化钙中静置2～4h制成的颗粒剂；所述海藻酸钠的质量浓度为2～6%；所述载体培养基包括吸附载体和无机盐液体培养基；该吸附载体与海藻酸钠的重量比为1～3∶1，该吸附载体由重量比为1∶1～2∶1的玉米芯、竹炭和油枯组成。本发明通过有效提高菌体的降解效率；且本发明固定化菌剂的降解率远远高于空白小球物理吸附效率和游离菌株的生物降解效率之和，能有效达到相互促进的效果。
- 一种产脲酶菌株的固定化及其应用-201610293206.7
- 毛相朝;侯恩玲;孙建安 - 中国海洋大学
- 2016-05-05 - 2019-03-12 - C12N11/10
- 本发明涉及一种产脲酶菌株的固定化及其应用，固定生产脲酶的根瘤菌属细菌，并将其应用于清除食品尿素中。本发明研究了细胞固定化的最适条件以及游离细胞和固定化细胞的最适pH、最适温度、温度稳定性和pH稳定性，用响应面方法优化固定化细胞的最优条件为：1.96％琼脂，1.42％细胞和pH 9.0，固定化后，细胞的脲酶活性提高了约1.5倍，最适反应温度由40℃上升到50℃。最后还研究了固定化细胞在清除尿素中的应用，尿素清除实验显示固定化细胞对部分酒类和牛奶具有良好的效果。将固定化的菌株细胞加入到5种市售的产品中，在35℃保温24小时，结果显示，10％‑92.8％的尿素可以被清除，具有良好的应用价值。
- 一种甘露糖磁性纳米载体及其制备方法-201811537539.5
- 王剑锋;鲁晓莉;刘宝全;李春斌 - 大连民族大学
- 2018-12-15 - 2019-02-19 - C12N11/10
- 一种甘露糖磁性纳米载体及其制备方法，属于纳米载体领域。该甘露糖磁性纳米载体通过以下步骤制备：制备油酸磁性纳米颗粒Fe3O4@OA，将Fe3O4@OA加入多巴胺盐酸溶液制备得到多巴胺功能化磁性纳米载体Fe3O4@OA@DP，多巴胺功能化磁性纳米载体Fe3O4@OA@DP加入到甘露糖胺盐溶液制备得到甘露糖磁性纳米载体Fe3O4@OA@DP‑mannose。本发明制备的载体制备过程简单温和，且制备的磁性纳米载体由于采用细胞表面的糖基组分‑甘露糖修饰，拥有较好的生物兼容性。
- 一种固相化细胞的制备方法及其应用-201510745755.9
- 宋海鹏;李敏;王庆东 - 长春力太生物技术有限公司
- 2015-11-05 - 2019-02-19 - C12N11/10
- 本发明公开了一种固相化细胞的制备方法，所述方法包括在含欲被固相化细胞的悬液中加入果胶溶液，并加入氯化钙和壳聚糖溶液，以得到含果胶钙的细胞微球悬浮液。所述方法可以保持细胞的活性，允许细胞的营养成分进入微丸，维持细胞的正常生长和分裂，细胞的代谢产物可以分泌出微丸，进而从培养基中分离纯化相关的重组蛋白。本发明还公开了所述方法在固相化细胞工程化应用和药物制备方面的应用。
- 一种基于壳聚糖纳米粒子的CTC捕获与纯化基底及其制备方法-201510173357.4
- 裴仁军;孙娜;王金娥 - 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
- 2015-04-14 - 2019-02-01 - C12N11/10
- 本发明公开了一种基于壳聚糖纳米粒子的CTC(循环肿瘤细胞)捕获与纯化基底、其制法与应用。本发明选择细胞相容性良好的壳聚糖构筑三维纳米结构“软”基底，引入抗粘附分子，例如聚乙二醇(PEG)分子降低细胞在界面上的非特异粘附，利用CTC亲和捕获分子，例如上皮细胞黏附分子(EpCAM)适配体实现CTC细胞的高特异捕获，随后基于CTC与血液细胞增殖属性差异，通过被捕获细胞原位培养的方式进一步提高靶细胞的纯度。本发明的CTC捕获与纯化基底具备良好的细胞相容性，能保持所捕获细胞的活性，且制备工艺简单便捷，成本低廉，并能实现所捕获细胞的原位培养纯化，还易于规模化实施。
- 一种动态键水凝胶的制备方法及其在酶固定化方面的应用-201811157242.6
- 陈敬华;米哈伊尔·巴尔博尤;张燕;王睿 - 江南大学
- 2018-09-30 - 2019-01-25 - C12N11/10
- 本发明一种动态键水凝胶的制备方法及其在酶固定化方面的应用，属于高分子材料领域。首先由芳香醛、氨基封端的聚合物以及含不同功能基团的胺，经亚胺生成反应聚合而成，并进一步与6‑氧‑羧甲基壳聚糖交联得到水凝胶。然后利用动态键水凝胶作载体，在制备过程中通过物理吸附法将靶点酶包裹于其中，实现酶的固定化。本发明与前期反应体系中动态键聚合物的直接添加相比，水凝胶固定化材料能显著增强酶的重复利用度。相对其他酶固定化材料，该方法简单易行，水凝胶的高含水量为酶提供了较好的外部催化环境，能较大程度维持固定化酶的体外活性。
- 专利分类
