[发明专利]原代肿瘤细胞培养基、培养方法以及应用有效
| 申请号： | 201810527720.1 | 申请日： | 2018-05-26 |
| 公开（公告）号： | CN108624561B | 公开（公告）日： | 2021-09-17 |
| 发明（设计）人： | 党永军;王嘉琦;姜帅;李增霞;杨宸;谭仁可 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人： | 陆飞;陆尤 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于医药技术领域，具体为一种原代肿瘤细胞培养基、培养方法以及应用。本发明的原代肿瘤细胞培养方法包括：配置原代细胞培养基，其组分包含：氢化可的松，EGF，Insulin，ROCK抑制剂，但不包含霍乱毒素，是对已有原代细胞培养基的改进；使用上述原代细胞培养基在铺好滋养层细胞上培养肿瘤组织上皮细胞，肿瘤组织上皮细胞在滋养层细胞所分泌的生长因子及培养基中所含营养因子的共同作用下快速增殖，待肿瘤组织上皮细胞长至80%~90%左右的细胞密度时进行消化传代。本发明利用便捷的原代细胞培养方法，得到拥有病人自身肿瘤生物学特性的永生细胞，解决了肿瘤细胞的原代培养永生化的问题，从而实现对患者的个性化治疗。 | ||
| 搜索关键词： | 肿瘤 细胞 培养基 培养 方法 以及 应用 | ||
【主权项】：
1.一种原代肿瘤细胞的培养方法，其特征在于，具体步骤为：（1）配置原代细胞培养基：其组分包含：氢化可的松，EGF，Insulin，ROCK抑制剂；所述培养基简称完全F培养基，记为Complete F；（2）铺好滋养层细胞；（3）取肿瘤组织上皮细胞；（4）使用上述原代细胞培养基在铺好滋养层细胞上培养肿瘤组织上皮细胞：将肿瘤组织上皮细胞铺于已准备好的滋养层细胞上，用Complete F培养基在35℃‑38℃，3%‑10% CO2条件下进行培养；根据肿瘤组织上皮细胞的量选择合适大小的培养皿和适量Complete F培养基；肿瘤组织上皮细胞在滋养层细胞所分泌的生长因子及培养基中所含营养因子的共同作用下快速增殖，待肿瘤组织上皮细胞长至80%~90%左右的细胞密度时进行消化传代。
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