[发明专利]一种高有机硒含量的堇叶碎米荠硒多肽的制备方法

摘要

一种高有机硒含量的堇叶碎米荠硒多肽的制备方法，包括如下步骤：S1、原料预处理：选取碎米荠干粉作为生产原料，经乙醇浸泡脱色，过滤、去除杂质，再经纤维素酶与果胶酶的混合物预处理后获得酶解产物、备用；S2、双酶复合酶解：向经过步骤S1预处理后的上清液中先加入碱性蛋白酶酶解，灭酶、冷却至50℃，用盐酸调节pH至，加入中性蛋白酶，酶解，获得酶解液；S3、灭酶、分离肽液：将酶解液煮沸，使酶灭活，静置，下层即为清亮透明的肽液。其优点是：以堇叶碎米荠为核心原料，使用纤维素酶与果胶酶在酶解前进行预处理，有效去除碎米荠中杂质，提高碎米荠的蛋白提取率；再用双酶分步酶解法酶解，硒多肽含量较高，分子量较小。

主权项

1.一种高有机硒含量的堇叶碎米荠硒多肽的制备方法，其特征在于：包括如下步骤

S1、原料预处理：选取蛋白含量在15％以上、且硒含量范围为1000‑2000ug/g的碎米荠干粉作为生产原料，经乙醇浸泡脱色20‑30min，过滤、去除杂质，再经纤维素酶与果胶酶的混合物预处理后获得酶解产物、备用；

S2、双酶复合酶解：向经过步骤S1预处理后的酶解产物中先加入碱性蛋白酶酶解2～3h，灭酶、冷却至50℃，用盐酸调节pH至6.0～8.0，加入中性蛋白酶，酶解2～3h，获得酶解液；

S3、灭酶、分离肽液：将酶解液煮沸10min，使酶灭活，同时使汤液灭菌，然后静置30min，此时水解液分层，上层为未酶解的大分子变性蛋白和灭活的酶的浆状物，下层即为清亮透明的肽液。

2.根据权利要求1所述，其特征在于：步骤S2中，碱性蛋白酶酶解反应在PH为8.5、55℃的条件下进行。

3.根据权利要求1所述，其特征在于：步骤S2中，碱性蛋白酶、中性蛋白酶的加入量按照以下用量加入：即步骤S1中作为原料的碎米荠干粉内所含蛋白质与碱性蛋白酶、中性蛋白酶总体积的体积比为1:30。

4.根据权利要求1所述，其特征在于：步骤S1中，预处理具体方式如下：

S11、等比例称取纤维素酶与果胶酶后混合，然后将混合物置入去除杂质后的原料中，获得混合液A；在PH为6.0的条件下酶解1h，再调节PH至7.0，加水，且使得此时获得的酶解产物与水按照1:20～1:40g/mL的比例混合，在45～55℃下提取3h，离心，收集上清液备用；

S12、向步骤S11的沉淀中加入0.1mol/L的NaOH溶液，且所述沉淀与NaOH溶液按照1:40g/mL的比例混合，45～55℃下提取3h，收集上清备用；

S13、分别将步骤S11、S12的上清液浓缩4倍，醇沉、静置过夜，离心后混合、获得酶解产物备用。

5.根据权利要求4所述，其特征在于：步骤S11中，去除杂质后的原料，先将碎米荠干粉与水按照1:20～1:40g/mL的比例混合，再在50℃条件下添加纤维素酶与果胶酶混合物，以获得混合液A。

6.根据权利要求4所述，其特征在于：步骤S11中，纤维素酶与果胶酶的总质量占混合液A质量的1％。

7.根据权利要求4所述，其特征在于：步骤S13中离心速度为4000rpm。