[发明专利]一种十四烷基氨基丁酰缬氨酰胺基丁酸脲三氟乙酸盐的液相合成方法

摘要

本发明公开了一种十四烷基氨基丁酰缬氨酰胺基丁酸脲三氟乙酸盐的液相合成方法，以十四胺和氯甲酸乙酯为原料合成十四烷胺基甲酸，再与H‑DAB(Boc)‑OH合成CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB(Boc)‑OH；以Fmoc‑Val‑OH和H‑DAB(Boc)‑OH合成H‑Val‑DAB(Boc)‑OH，再与CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB(Boc)‑OH连接得CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB(Boc)‑Val‑DAB(Boc)‑OH，其经脱保护、HPLC纯化、冻干得纯度大于95％的十四烷基氨基丁酰缬氨酰胺基丁酸脲三氟乙酸盐。本发明放弃使用价格高昂的Fmoc‑DAB(Boc)‑OH和H‑DAB(Boc)‑OMe·HCl为原料，选择以H‑DAB(Boc)‑OH为原料，具有合成简单方便、成本低的优点。

主权项

一种十四烷基氨基丁酰缬氨酰胺基丁酸脲三氟乙酸盐的液相合成方法，其特征在于所述方法由以下步骤组成：(1)合成十四烷胺基甲酸①以三氯甲烷为溶剂，将1‑十四胺、三乙胺、氯甲酸乙酯在室温条件下搅拌反应1～3小时，反应完后用稀盐酸洗涤反应液，旋转蒸发除去三氯甲烷，干燥，得到十四烷胺基甲酸乙酯；②以四氢呋喃和甲醇体积比为2:1的混合液为溶剂，将十四烷胺基甲酸乙酯和质量浓度为10％的氢氧化锂水溶液在0～5℃搅拌反应2～4小时，用盐酸调节pH＝4～5，旋转蒸发除去四氢呋喃和甲醇，用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯相用无水硫酸钠干燥后旋转蒸发至干，得到十四烷胺基甲酸；(2)合成CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB(Boc)‑OH①以四氢呋喃为溶剂，将十四烷胺基甲酸、N‑羟基琥珀酰亚胺、N,N'‑二环己基碳酰亚胺在室温条件下搅拌反应2～4小时，过滤除去沉淀，得CH3(CH2)12CH2NH‑COOSu的四氢呋喃溶液；②将H‑DAB(Boc)‑OH和N,N‑二异丙基乙胺溶于四氢呋喃后加入到CH3(CH2)12CH2NH‑COOSu的四氢呋喃溶液中，在室温条件下搅拌反应1.5～2.5小时，旋转蒸发浓缩，将浓缩产物溶于乙酸乙酯中，用稀盐酸洗涤后无水硫酸钠干燥，旋转蒸发至干，得到CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB(Boc)‑OH；(3)合成H‑Val‑DAB(Boc)‑OH①以四氢呋喃为溶剂，将Fmoc‑Val‑OH、N‑羟基琥珀酰亚胺、N,N'‑二环己基碳酰亚胺在室温条件下搅拌反应2～4小时，过滤除去沉淀，得到Fmoc‑Val‑OSu的四氢呋喃溶液；②将H‑DAB(Boc)‑OH和N,N‑二异丙基乙胺溶于四氢呋喃后加入到Fmoc‑Val‑OSu的四氢呋喃溶液中，在室温条件下搅拌反应1.5～2.5小时，旋转蒸发浓缩，将浓缩产物溶于乙酸乙酯中，乙酸乙酯相用稀盐酸洗涤后无水硫酸钠干燥，旋转蒸发至干，得到Fmoc‑Val‑DAB(Boc)‑OH；③向Fmoc‑Val‑DAB(Boc)‑OH中加入哌啶与四氢呋喃体积比为1:4的混合溶液，在室温条件下搅拌反应20～40分钟，旋转蒸发浓缩，将浓缩液加入冷乙醚中析出沉淀，离心除去上清，将沉淀用乙醚洗涤、离心，室温真空干燥，得到H‑Val‑DAB(Boc)‑OH；(4)合成CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB(Boc)‑Val‑DAB(Boc)‑OH①以四氢呋喃为溶剂，将CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB(Boc)‑OH、N‑羟基琥珀酰亚胺、N,N'‑二环己基碳酰亚胺在室温条件下搅拌反应2～4小时，过滤除去沉淀，得到CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB(Boc)‑OSu的四氢呋喃溶液；②将H‑Val‑DAB(Boc)‑OH和N,N‑二异丙基乙胺溶于四氢呋喃后加入到CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB(Boc)‑OSu的四氢呋喃溶液中，在室温条件下搅拌反应1.5～3小时，旋转蒸发浓缩，将浓缩产物溶于乙酸乙酯中，乙酸乙酯相用稀盐酸洗涤后无水硫酸钠干燥，旋转蒸发至干，得到CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB(Boc)‑Val‑DAB(Boc)‑OH；(5)合成CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB‑Val‑DAB‑OH·2CF3COOH将CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB(Boc)‑Val‑DAB(Boc)‑OH加入切割液中，所述的切割液是三氟乙酸与水体积比为95:5的混合液，室温搅拌反应1～2小时，抽滤，滤液减压浓缩，将浓缩液加入冷乙醚中析出沉淀，离心除去上清，将沉淀用乙醚洗涤、离心，室温真空干燥，得到CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB‑Val‑DAB‑OH粗品；粗品经C18反相高效液相色谱纯化、减压浓缩、冷冻干燥，得到CH3(CH2)12CH2NH‑CO‑DAB‑Val‑DAB‑OH，即十四烷基氨基丁酰缬氨酰胺基丁酸脲三氟乙酸盐。