[发明专利]一种适用于不同种源黑果枸杞一次性成苗的诱导方法

摘要

一种适用于不同种源黑果枸杞一次性成苗的诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：诱导基质准备、不同种源黑果枸杞茎段活性诱导、灭菌处理、不定芽增殖、根系诱导、移栽。本发明的有益之处在于：本发明中的一种适用于不同种源黑果枸杞一次性成苗的诱导方法，所用不定芽诱导基质和根系诱导基质配方合理，采用的震荡处理激活枝条本身所含的内源激素，结合明暗交替以及基质外源植物激素的应用使不同种源黑果枸杞不定芽增殖倍数达20～30；生根率以及移栽后成活率均可达到100％，且瓶苗移栽后对生长的气候、土壤、水分等条件没有特殊要求，采用常规方法管理即可；50d左右即可实现不同种源黑果枸杞优质种苗快速繁殖及一次性成苗。

主权项

一种适用于不同种源黑果枸杞一次性成苗的诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)诱导基质准备大量元素溶液配置，按硝酸钾3000.00mg/L、氯化钙150.00mg/L、硫酸镁500.00mg/L、磷酸二氢钾150.00mg/L、硫酸铵134.00mg/L、硫酸锰10.00mg/L的配比配置1000mL大量元素溶液；微量元素溶液配置，按硼酸3.0mg/L、硫酸锌2.0mg/L、碘化钾0.75mg/L、硫酸铜0.025mg/L、钼酸钠0.25mg/L的配比配置500mL微量元素溶液；铁盐溶液配置，按Fe2·EDTA10.00mg/L的配比配置500mL铁盐溶液；有机成分溶液配置，按肌醇100.0mg/L、烟酸1.0mg/L、盐酸吡哆醇1.0mg/L、盐酸硫胺素10.0mg/L、甘氨酸2.0mg/L的比例配置500mL有机成分溶液；不定芽诱导基质制作，加入所述大量元素溶液50mL，所述微量元素溶液、铁盐溶液、有机成分溶液各5mL，加入6‑苄基氨基嘌呤(6‑BA)0.5mg、萘乙酸(NAA)0.2mg，之后加入蒸馏水定容到1000mL，混合均匀后进行蒸煮，之后加入蔗糖15g、琼脂5g，将pH调整为5.8；制作完成后分装三角瓶、每瓶约60～70mL，高温高压灭菌后待用；根系诱导基质制作，加入所述大量元素溶液25mL，所述微量元素溶液、铁盐溶液、有机成分溶液各2.5mL，之后加入蒸馏水定容到1000mL，混合均匀后进行蒸煮，之后加入蔗糖7.5g、琼脂5g，将pH调整为5.8；制作完成后分装三角瓶、每瓶约60～70mL，高温高压灭菌后待用；(2)不同种源黑果枸杞茎段活性诱导于当年春季，植物内源激素活性最强时，分别剪取不同种源黑果枸杞健康母株上当年生、没有病虫害及牲畜啃食的健康枝条，迅速将下切口剪成马蹄形，之后蘸取少量家用洗涤剂原液，以保证枝条的新鲜，然后带回实验室，用稀释浓度为50％的吐温80浸泡枝条1h以彻底清洗附着在枝条表面的粘性物质，之后用流动的自来水浸泡冲洗4h，冲洗之后沥干枝条上的水分并将其放入震荡培养箱中进行震荡培养；(3)灭菌处理将经过震荡培养后的不同种源黑果枸杞枝条置于超净工作台，采用75％的乙醇浸泡，浸泡期间用已灭菌的玻璃棒不断搅动，然后用无菌水冲洗7～8次，之后将冲洗干净的枝条放在经过高温灭菌并铺有滤纸的铝盒中，用镊子夹取滤纸充分吸干枝条表面残留的水渍后待用；(4)不定芽增殖剪除经过灭菌处理的枝条两端约2～3cm，并将枝条上着生的叶片从叶柄基部剪除，之后将枝条剪成长1.5～2cm、并至少带有一个侧芽的茎段，放入培养皿，全部剪完后用镊子轻轻夹住茎段上端垂直插入所述不定芽诱导基质中，每瓶不定芽诱导基质中只扦插1个茎段，之后封口，在25℃条件下采用黑暗和光照交替培养的方式进行不定芽增殖；(5)根系诱导将步骤(4)中诱导30d的不定芽从基部剪切，剪成带有1～2个腋芽、长约2cm的茎段，并将其转接插入装有所述根系诱导基质的三角瓶中，置于25±2℃条件下，黑暗培养4d，之后光照培养20d左右，使得根系长满整个三角瓶瓶底，得到符合移栽标准的瓶苗；所述光照培养的条件为光照强度2000lx/d，光照时间12h/d；(6)移栽移栽前对玻璃温室或搭建的小拱棚进行土壤翻耕、平整、消毒、晾晒；之后将符合移栽标准的所述瓶苗连同三角瓶移至玻璃温室或搭建的小拱棚中，将瓶口开放1/3放置1d，第2d即可完全开瓶移栽；移栽前用镊子轻轻夹住瓶苗基部，夹出后放置在清水中，用清水冲洗干净瓶苗基部的根系诱导基质，冲洗干净后即可移栽至土壤中，株行距20～30cm，培养温度为25℃左右，湿度为70％左右；生长20d左右长出5～6片新叶，生长健壮，适应性强，即可进行露地定植。