[发明专利]一种蔬菜接种发酵系统中发酵剂的定性和定量直接检测方法

摘要

本发明属蔬菜深加工技术领域，为解决目前蔬菜发酵系统中无法直接检测发酵剂生长繁殖情况，检测结果不确定等问题，提供一种蔬菜接种发酵系统中发酵剂的定性和定量直接检测方法。提取蔬菜接种发酵系统中待测时间发酵液中微生物基因组总DNA，用16S rDNA V6‑V8区通用引物进行PCR扩增，扩增产物与发酵剂标准样品同步DGGE电泳，通过电泳带数量和迁移率比对分析得到定量检测结果；通过凝胶分析软件计算DGGE电泳带的相对浓度，依据标准样品电泳带浓度得出定量检测结果。能确定蔬菜接种发酵体系中发酵剂菌种的存在和数量，保证了检测结果的可靠性，能有效的指导蔬菜接种发酵工艺。检测时间短，检测结果直接、准确、不易失真。

主权项

一种蔬菜接种发酵系统中发酵剂的定性和定量直接检测方法，其特征在于：提取蔬菜接种发酵系统中各个待测时间发酵液中微生物基因组总DNA，用16S rDNA V6‑V8区通用引物进行PCR扩增，扩增产物与发酵剂的标准样品以相同DNA含量上样同步进行变性剂梯度凝胶电泳即DGGE电泳，通过标准样品的DGGE电泳带与扩增产物DGGE电泳带的数量和迁移率比对分析得到定量检测结果；通过凝胶分析软件Quantity One定量分析功能计算标准样品的DGGE电泳带与扩增产物DGGE电泳带的相对浓度，依据发酵剂标准样品DGGE电泳带的浓度得出蔬菜接种发酵体系中各个待测时间发酵剂的菌量，即获得定量检测结果，若待测时间发酵剂DGGE电泳带与标准样品DGGE电泳带迁移率一致，相对浓度为1，则该发酵剂在蔬菜发酵系统成为主导菌，接种发酵工艺正常；相对浓度＞1，则该发酵剂在蔬菜发酵系统成为优势菌，蔬菜接种发酵过程继续；相对浓度<1，则该发酵剂在蔬菜发酵系统中未发挥其作用。