[发明专利]一种杆状病毒基因组的合成方法及其在重组杆状病毒构建中的应用有效
| 申请号： | 201710144998.6 | 申请日： | 2017-03-13 |
| 公开（公告）号： | CN106754896B | 公开（公告）日： | 2019-09-17 |
| 发明（设计）人： | 商雨;胡志红;邓菲;王曼丽;王华林 | 申请（专利权）人： | 中国科学院武汉病毒研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N7/01 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 毕翔宇 |
| 地址： | 430071 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种杆状病毒基因组的合成方法及其在重组杆状病毒构建中的应用，属于生物技术领域。本发明提供的一种杆状病毒基因组的合成方法，包括使用引物组合和穿梭载体。引物组合包括杆状病毒全基因组扩增引物组合和线性载体扩增引物组合，应用该引物组合合成的基因片段，可在酵母中通过多片段的拼接合成出杆状病毒基因组，方便对杆状病毒基因组的任意位点进行改造；该方法中用于完整基因组拼接的穿梭载体带有能在昆虫细胞方便检测的基因，所合成的杆状病毒基因组可通过转染昆虫细胞获得有感染活性的病毒，方便用于拯救基因组改造后的杆状病毒；应用上述方法构建重组杆状病毒，方便快速高效，利于推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 杆状病毒 基因组 合成 方法 及其 重组 构建 中的 应用 | ||
【主权项】：
1.一种杆状病毒基因组的合成方法，其特征在于，所述合成方法包括使用引物组合和穿梭载体，所述引物组合包括杆状病毒全基因组扩增引物组合和线性载体扩增引物组合，所述杆状病毒全基因组扩增引物组合包括第1‑45引物对，其碱基序列分别如SEQ ID No.1‑90所示；所述线性载体扩增引物组合包括第46‑54引物对，其碱基序列分别如SEQ ID No.91‑108所示；所述穿梭载体的碱基序列如SEQ ID No.109所示。
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