[发明专利]一种富集4-羟基壬烯醛HNE修饰肽段的方法在审
申请号: | 201710011147.4 | 申请日: | 2017-01-06 |
公开(公告)号: | CN108276469A | 公开(公告)日: | 2018-07-13 |
发明(设计)人: | 陆豪杰;袁文娟 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C07K1/113 | 分类号: | C07K1/113;C07K1/14 |
代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人: | 吴桂琴 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明属生化分析领域,涉及一种氟试剂衍生结合氟固相萃取FSPE)富集HNE修饰肽段的方法,其中,采用羟胺功能化含氟试剂对HNE肽段衍生,具有衍生效率高,反应时间短的特点,且衍生上含氟试剂后能提高HNE修饰肽段的离子化效率;氟固相萃取技术富集HNE修饰肽段具有选择性较高,时间短,除盐能力好等优点;经用于乳腺癌细胞系MCF‑7检测,结果显示共检测到655个HNE修饰位点,对应于644条修饰肽段,437个修饰蛋白。本氟试剂衍生结合氟固相萃取富集HNE修饰肽段的方法具有衍生效率高,反应时间短,操作简便、选择性较高、除盐能力好的特点。 | ||
搜索关键词: | 修饰肽 富集 反应时间短 固相萃取 含氟试剂 除盐 固相萃取技术 乳腺癌细胞系 离子化效率 羟基壬烯醛 生化分析 修饰蛋白 功能化 检测 位点 肽段 羟胺 修饰 | ||
【主权项】:
1.一种富集4‑羟基壬烯醛HNE修饰肽段的方法,其特征是,采用含氟试剂对4‑羟基壬烯醛HNE修饰肽段进行衍生后,用氟固相萃取技术富集氟试剂衍生化的4‑羟基壬烯醛HNE修饰肽段,其步骤包括:(1)在4‑羟基壬烯醛HNE修饰肽段样品中,加入含氟试剂与4‑羟基壬烯醛HNE修饰肽段溶液混合,反应结束后,冻干样品,(2)预洗平衡FluoroFlashNuTips,溶解所述的冻干样品,用FluoroFlashNuTips反复吹打样品后,用洗脱液清洗FluoroFlashNuTips完成对4‑羟基壬烯醛HNE修饰肽段的富集,(3)进行MALDI质谱分析或LC‑MS/MS分析。
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