[发明专利]一种葡萄糖异构酶、基因、载体、工程菌及其应用有效
申请号: | 201610999999.4 | 申请日: | 2016-11-14 |
公开(公告)号: | CN106566824B | 公开(公告)日: | 2019-05-28 |
发明(设计)人: | 郑裕国;贾东旭;周霖 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12N9/92 | 分类号: | C12N9/92;C12N15/61;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/24;C12P19/02;C12R1/19 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种葡萄糖异构酶、基因、载体、工程菌及其在催化D‑葡萄糖异构化制备D‑果糖中的应用,所述葡萄糖异构酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供了一种新的耐高温葡萄糖异构酶。本发明中所述葡萄糖异构酶具有较高酶活(2.42U/mg)和优良热稳定性,于85℃添加20mM锰盐助剂保温48h,仍保持80%以上初始酶活,具备在高温生物催化生产高果糖浆的工业化应用潜力。 | ||
搜索关键词: | 一种 葡萄糖 异构酶 基因 载体 工程 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种葡萄糖异构酶在催化D‑葡萄糖异构化制备D‑果糖中的应用,其特征在于所述的应用以含葡萄糖异构酶基因的基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体为酶源,以D‑葡萄糖为底物,以锰盐为助剂,以pH 8.0、50mM的Na2HPO4/NaH2PO4缓冲液为反应介质构成反应体系,在50‑100℃、150r/min条件下反应,待反应结束,将反应液分离纯化,获得D‑果糖;所述葡萄糖异构酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述反应体系中,底物初始浓度为400g/L,湿菌体的用量为25g/L,所述锰盐终浓度为20mM。
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