[发明专利]一种ι-卡拉胶酶的制备方法有效
| 申请号： | 201610592652.8 | 申请日： | 2016-07-26 |
| 公开（公告）号： | CN105950590B | 公开（公告）日： | 2019-07-09 |
| 发明（设计）人： | 肖安风;李佳佳;肖琼;倪辉;蔡慧农;吴昌正;朱艳冰 | 申请（专利权）人： | 集美大学 |
| 主分类号： | C12N9/38 | 分类号： | C12N9/38;C12R1/01 |
| 代理公司： | 厦门创象知识产权代理有限公司 35232 | 代理人： | 尤怀成 |
| 地址： | 361000 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种ι‑卡拉胶酶的制备方法，将一株产卡拉胶酶的菌株Pseudoalteromonas carrageenovora ASY5接种于种子培养基中，活化培养后转接于发酵培养基中诱导产酶，分离含ι‑卡拉胶酶发酵液获得ι‑卡拉胶酶。本发明以ι‑卡拉胶作为诱导剂发酵生产ι‑卡拉胶酶，建立了ι‑卡拉胶酶的发酵生产工艺，对于卡拉胶降解酶及卡拉胶寡糖工业化生产具有良好的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 卡拉 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种ι‑卡拉胶酶的制备方法，其特征在于：将产ι‑卡拉胶酶的菌种Pseudoalteromonas carrageenovora ASY5接种于种子培养基中，23℃活化培养24h，活化培养后转接于发酵培养基中20℃发酵培养40h，然后发酵液在4℃、10000r/min条件下离心20min，收集上清，即得ι‑卡拉胶酶粗酶液，其中，所述种子培养基为：牛肉膏10g，胰蛋白胨10g，加入蒸馏水250mL，调节pH7.8，水浴10min，调节pH7.3，再加入人工海水750mL，充分混匀后，121℃灭菌15min，冷却后在4℃下保存备用；所述人工海水中包括氯化钠、氯化钾、二水合氯化钙、六水合氯化镁、碳酸氢钠、七水合硫酸镁的质量分数(g/100mL)依次为2.8、0.08、0.16、0.48、0.01、0.35；所述发酵培养基中的氯化钠、酵母粉、二水合氯化钙、十二水合磷酸氢二钠、二水合磷酸二氢钠、ι‑卡拉胶的质量分数(g/100mL)依次为1.5、1.5、0.02、0.38、0.13、0.9，充分混匀后，121℃灭菌15min，在4℃下保存备用。
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- 杨洪江;李梦菲;朱慧明 - 天津科技大学
- 2014-04-24 - 2014-09-17 - C12N9/38
- 本发明涉及一种采用喷雾干燥法破碎乳酸菌细胞壁制备胞内乳糖酶粉剂的方法，调节喷雾干燥机进料温度和风速等运行参数，利用高温使乳酸菌细胞涨破释放胞内乳糖酶，同时添加保护剂保护乳糖酶活性，制备乳糖酶粉剂。所述保护剂为糊精、脱脂奶粉与糊精的混合物，酶活回收率可达到80％以上。本发明利用高温破坏细胞壁，避免了氯仿等化学试剂的使用，极大地降低了生产过程对环境的污染压力，同时也避免了乳糖酶产品中污染有机试剂的可能性。实现了乳糖酶的绿色生产。本发明将制备粗酶液和制备酶固体粉剂两个过程合并，极大地简化了生产工艺，提高了生产效率。本发明可以适用于任何细胞胞内酶的制备，包括细菌、真菌、动物细胞核植物细胞等。
- 一种半乳糖苷酶和编码这种酶的多核苷酸-201410137767.9
- 林连兵;梁丛丛;郑健;魏云林;季秀玲;张琦;邓先余 - 昆明理工大学
- 2014-04-08 - 2014-07-23 - C12N9/38
- 本发明公开了一个克隆自大理洱源65℃热泉宏基因组的β-半乳糖苷酶(β-D-半乳糖苷酶，EC3.2.1.23)和编码这种酶的核苷酸，该半乳糖苷酶在37-55℃具有较高的催化活性，可作为乳糖降解和双糖合成催化剂，并有水解生物体内储存的多糖和半乳糖残基，另外该酶还具有转糖苷作用，能生成一些功能性的低聚糖，如低聚半乳糖。低聚糖几乎不被小肠消化，是一种低分子量的、不粘稠的水溶性膳食纤维；低聚半乳糖作为肠道内双歧杆菌的增值因子，只能被双歧杆菌所利用，增殖的双歧杆菌竞争性地拮抗腐败菌的生长，减少毒素和酶的产生，有整肠效果。
- 利用枯草芽孢杆菌液体发酵制备β-半乳糖苷酶酶制剂的方法-201310455457.7
- 高兆建;陈宏伟;张桂英;孙会刚;王东星;于洋;杜永凯 - 徐州工程学院
- 2013-09-30 - 2014-03-05 - C12N9/38
- 本发明涉及一种利用枯草芽孢杆菌液体发酵制备β-半乳糖苷酶酶制剂的方法，其特征在于选用枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)F69作为β-半乳糖苷酶的生产菌种，先经摇瓶震荡法发酵制备发酵液或者发酵罐通风发酵法制备发酵液、再经β-半乳糖苷酶酶制剂制备，而得到β-半乳糖苷酶酶制剂成品。本发明生产的β-半乳糖苷酶耐热性好，即80℃保温60min、残余酶活达85％；酶活性高，即发酵液酶活达216U/ml；酶回收率高，即总酶活回收率大于80%、酶冻干粉酶活力单位达到2512U/g；且操作工艺简单、生产效率高和生产成本低，适合于大批量生产。
- 采用固体罐发酵制备米曲霉乳糖酶发酵曲的方法-201310519860.1
- 赵从波;章淑艳;马清河;李宾;王云鹏;李军;韩韬;罗同阳;秦艳梅;刘丽娜 - 河北省微生物研究所
- 2013-10-29 - 2014-02-05 - C12N9/38
- 本发明属于微生物发酵，特别是指一种采用固体罐发酵制备米曲霉乳糖酶发酵曲的方法。包括孢子悬液的制备、固体罐发酵、曲盘培养等工艺步骤，本发明解决了现有技术存在的发酵周期长、染菌率高等技术问题，具有发酵周期短、染菌率低、生产效率高等优点。
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