[发明专利]细菌中产生双链蛋白的方法有效
| 申请号： | 201580059973.5 | 申请日： | 2015-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN108064308B | 公开（公告）日： | 2023-06-09 |
| 发明（设计）人： | J·朱利亚诺蒂;D·赖利 | 申请（专利权）人： | 豪夫迈·罗氏有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/00 | 分类号： | C12P21/00;C07K16/46;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人： | 陈迎春;黄革生 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本文提供了产生含有两条链的多肽(如包括轻链和重链的抗体)的方法。具体地说，提供了通过利用优化的表达载体和培养过程在细菌中产生异源分泌性蛋白的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 细菌 产生 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
1.一种在原核宿主细胞中产生包含两条链的多肽的方法，所述方法包括：(a)在培养基中在包含以下的条件下培养宿主细胞以表达多肽的两条链：包含生长温度和生长搅拌速率的生长阶段，和包含生产温度和生产搅拌速率的生产阶段，因而当表达时，两条链折叠并装配以在宿主细胞中形成生物活性多肽；其中宿主细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(1)编码多肽第一链的第一翻译单位；(2)编码多肽第二链的第二翻译单位；和(3)编码选自肽酰基-脯氨酰异构酶、蛋白质二硫键氧化还原酶及其组合的至少一种伴侣蛋白的第三翻译单位；其中生长温度在生产温度之上2℃至10℃，并且生长搅拌速率在生产搅拌速率之上50至250转/分钟；并且(b)从宿主细胞回收生物活性多肽。
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