[发明专利]一种增加茶叶及其加工产品香气的方法

摘要

本发明公开了一种增加茶叶及其加工产品香气的方法，包括以下步骤：步骤一、黑曲霉孢子悬液的制备；步骤二、接种及发酵培养；步骤三、初酶液的提取；步骤四、用酶处理茶叶或者茶叶提取物；步骤五、SPME萃取；步骤六、检测茶汤香气成分。采用本发明后，茶叶或茶叶提取物中的香气成分大大提高。

主权项

1.一种增加茶叶香气的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、黑曲霉孢子悬液的制备：用新制备的马铃薯葡萄糖斜面培养基即PDA培养基活化保存在4 °C冰箱内的黑曲霉菌株，30 °C培养96 h至有大量成熟孢子产生；用预先灭菌的体积浓度为0.01%的吐温‑80溶液冲洗孢子，冲洗下的孢子液装入装有无菌玻璃珠的三角瓶中，摇床震荡30 min打散孢子，将孢子悬液的OD₆₀₀的值调至2.0，得到浓度约为1.0×10⁸个/mL的黑曲霉孢子悬液；步骤二、接种及发酵培养：发酵培养基的制备：过20目筛的茶梗或茶枝88%、M_gSO₄•7H₂O 0.1%、KH₂PO₄ 0.1%、N_aCl 0.1%、NH₄Cl 4.7%及蔗糖7%，初始含水量为65%，自然pH；其中用发酵培养基发酵产初酶液的培养温度为25 °C，环境湿度为60%的条件下培养96 h；步骤三、初酶液的提取：培养完成后，以每5 g培养基干物质加入50 mL缓冲液比例添加缓冲液，搅拌后置于25 °C、180 r/min的摇床上震荡0.5 h，用定性滤纸过滤，收集到的酶液即为初酶液；步骤四、用酶处理茶叶：称取3g茶叶，加入15倍的水及0.5倍的初酶液，30 °C浸泡处理30 min；步骤五、SPME萃取：将茶叶及溶液一起转移到萃取瓶中，在60 °C情况下用手动SPME进样器萃取30 min；步骤六、检测茶汤香气成分：采用气相色谱‑质谱联用仪测定茶汤香气成分；其中，色谱柱为Rtx‑5MS：60 m×0.32 mm×0.25 μm，载气为高纯氦气，纯度99.999%，柱流量3 ml/min，分流比1:5；进样口温度220 °C，初始温度50 °C保持2 min，然后以2 °C /min升温至120 °C，然后以5 °C /min升温至200 °C保持1 min；质谱离子源温度200 °C，电离方式为EI，电离能量0.80 kV，质谱接口部分温度为250 °C，SCAN模式进行扫描，离子碎片扫描范围35‑500 m/z；定量时质谱扫描模式为SIM模式。