[发明专利]聚乙二醇修饰蛋白及修饰产物纯化的方法有效

专利信息
申请号: 201410837314.7 申请日: 2014-12-29
公开(公告)号: CN105802947B 公开(公告)日: 2019-11-19
发明(设计)人: 马永;王俊;吴鼎龙;闻兴元;王和;徐春林;陈一飞;王耀方 申请(专利权)人: 江苏众红生物工程创药研究院有限公司
主分类号: C12N9/96 分类号: C12N9/96;C12N9/82
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 213125 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种PEG修饰蛋白及纯化的工艺过程,包括:将蛋白质溶于缓冲溶液1中,将蛋白溶液吸入离子交换层析柱,用平衡缓冲液平衡、用洗脱缓冲液洗脱,收集洗脱蛋白等步骤。和传统的PEG修饰及纯化工艺比较,本发明提供的工艺步骤更简单,产物收率更高,且对蛋白的活性影响较小。
搜索关键词: 聚乙二醇 修饰 蛋白 产物 纯化 方法
【主权项】:
1.一种聚乙二醇修饰蛋白质方法,包括蛋白的缓冲液置换、加入PEG修饰剂进行修饰反应和目的修饰产物的纯化,其特征在于:所述缓冲液置换通过离子交换色谱层析法一步完成,其中采用的洗脱缓冲液同时也是PEG修饰反应步骤中的修饰缓冲液,是pH为7.5-8.5、的磷酸缓冲液或硼酸磷酸缓冲液;/n所述纯化采用离子交换色谱层析法一步完成,其中洗脱缓冲液是修饰产物最终的制剂缓冲液,是含有0.10M~0.15M氯化钠,pH为7.0-7.2的磷酸缓冲液;/n并且,所述修饰蛋白质为门冬酰胺酶。/n
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