[发明专利]聚乙二醇修饰蛋白及修饰产物纯化的方法有效
申请号: | 201410837314.7 | 申请日: | 2014-12-29 |
公开(公告)号: | CN105802947B | 公开(公告)日: | 2019-11-19 |
发明(设计)人: | 马永;王俊;吴鼎龙;闻兴元;王和;徐春林;陈一飞;王耀方 | 申请(专利权)人: | 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 |
主分类号: | C12N9/96 | 分类号: | C12N9/96;C12N9/82 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 213125 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种PEG修饰蛋白及纯化的工艺过程,包括:将蛋白质溶于缓冲溶液1中,将蛋白溶液吸入离子交换层析柱,用平衡缓冲液平衡、用洗脱缓冲液洗脱,收集洗脱蛋白等步骤。和传统的PEG修饰及纯化工艺比较,本发明提供的工艺步骤更简单,产物收率更高,且对蛋白的活性影响较小。 | ||
搜索关键词: | 聚乙二醇 修饰 蛋白 产物 纯化 方法 | ||
【主权项】:
1.一种聚乙二醇修饰蛋白质方法,包括蛋白的缓冲液置换、加入PEG修饰剂进行修饰反应和目的修饰产物的纯化,其特征在于:所述缓冲液置换通过离子交换色谱层析法一步完成,其中采用的洗脱缓冲液同时也是PEG修饰反应步骤中的修饰缓冲液,是pH为7.5-8.5、的磷酸缓冲液或硼酸磷酸缓冲液;/n所述纯化采用离子交换色谱层析法一步完成,其中洗脱缓冲液是修饰产物最终的制剂缓冲液,是含有0.10M~0.15M氯化钠,pH为7.0-7.2的磷酸缓冲液;/n并且,所述修饰蛋白质为门冬酰胺酶。/n
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