[发明专利]一种基于石墨烯氧化物芯片DNA解旋酶的检测方法有效
申请号: | 201410832817.5 | 申请日: | 2014-12-29 |
公开(公告)号: | CN104611419A | 公开(公告)日: | 2015-05-13 |
发明(设计)人: | 高力;时海霞;李琴;李娆祺;周阳;陈克平;张春霞;连超群 | 申请(专利权)人: | 江苏大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/34 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 212013 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明属于生物医学领域中的蛋白质检测,尤其是一种基于石墨烯氧化物芯片的DNA解旋酶的检测方法:本发明主要包括如下步骤:(1)制备具有氧化石墨烯点阵的玻片;(2)连接双链DNA序列到具有石墨烯氧化物点阵的玻片:(3)DNA解旋酶的检测:加入不同数量的DNA解旋酶在不同作用时间下,PBS冲洗后,进行扫描和分析,通过FAM荧光强度的变化,进行检测。本发明运用石墨烯氧化物能淬灭单链DNA标记的FAM上的荧光,DNA解旋酶对双链DNA作用后,一条单链DNA脱离互补的固定在石墨烯氧化物上的单链DNA后,FAM与石墨烯氧化物表面的距离发生改变,引起FAM的荧光强度变化的特点,结合高通量的微阵列芯片技术,能低成本﹑高灵敏度地对DNA解旋酶进行检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 石墨 氧化物 芯片 dna 解旋酶 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种基于石墨烯氧化物芯片DNA解旋酶的检测方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)制备具有氧化石墨烯点阵的玻片;(2)一端氨基修饰另一端FAM标记的单链DNA与互补的单链DNA变性杂交后,连接到具有石墨烯氧化物点阵的玻片上,反应完成后洗涤,扫描记录玻片上DNA标记的FAM荧光强度F1;(3)DNA解旋酶检测:ATP为10 mM时,将不同数量的DNA解旋酶加入到步骤(2)处理过的玻片上,作用30 min以下,PBS冲洗,扫描记录玻片上DNA标记的FAM荧光强度F2。
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