[发明专利]对淀粉聚合物具有增强的活性的变体α淀粉酶

摘要

本发明描述了用于诸如淀粉液化的工业过程的α‑淀粉酶的变体。所述α‑淀粉酶变体具有增强的比活性，从而允许在液化过程中更快地降低峰值粘度。所述α‑淀粉酶通过向亲本家族13α‑淀粉酶多肽的氨基酸序列在淀粉结合槽中的氨基酸残基处引入突变而改性；其中所述淀粉结合槽通过A结构域中在第一条β‑链之前的α‑螺旋中的氨基酸残基、A结构域中第六个α‑螺旋与第七条β‑链之间的环、A结构域中第七个α‑螺旋与第八条β‑链之间的环，以及连接A结构域和C结构域的环形成；并且其中与所述亲本α淀粉酶多肽相比所述突变改变淀粉与所述变体α淀粉酶多肽的结合。

主权项

1.一种用于产生与亲本α‑淀粉酶多肽比较具有改变的结合淀粉束的变体α‑淀粉酶多肽的方法，包括：(a)鉴定亲本家族13α‑淀粉酶多肽的氨基酸序列中与淀粉束结合的淀粉结合槽；(b)向亲本家族13α‑淀粉酶多肽的氨基酸序列在与淀粉束结合的淀粉结合槽中的氨基酸残基处引入突变，获得变体α‑淀粉酶多肽；(c)确定与亲本α‑淀粉酶多肽相比，具有改变的结合淀粉束的变体α‑淀粉酶多肽，其中所述淀粉结合槽通过A结构域中在第一条β‑链之前的α‑螺旋中的氨基酸残基、A结构域中第六个α‑螺旋与第七条β‑链之间的环、A结构域中第七个α‑螺旋与第八条β‑链之间的环，以及连接A结构域和C结构域的环形成；以及所述淀粉结合槽对应于氨基酸残基1‑6、36、38、91‑97、224‑226、249‑257、278‑282、309‑320、354‑359、391、和395‑402，有关编号参见SEQ ID NO:2；氨基酸残基1‑6、37、39、92‑98、227‑229、252‑260、281‑285、312‑323、357‑362、391、和395‑402，有关编号参见SEQ ID NO:3；或氨基酸残基1‑4、36、38、91‑97、226‑228、251‑259、280‑284、311‑322、356‑361、363、391、和395‑402，有关编号参见SEQ ID NO:4。