[发明专利]一种产胆盐水解酶干酪乳杆菌KL1活菌制剂的制备方法

摘要

本发明涉及一种产胆盐水解酶干酪乳杆菌KL1活菌制剂的制备方法，适用于家禽畜牧业中饲用功能性活菌制剂等微生态制剂的生产。本发明利用筛选自藏灵菇中的产胆盐水解酶的干酪乳杆菌KL1菌株，经过活化、扩大培养、高密度发酵、离心浓缩、加入冻干保护剂、预冻和冷冻干燥等工序制备活菌制剂。本发明利用全自动发酵罐优化发酵条件，并利用马铃薯粉浆作为冻干保护基质，确定冻干保护剂较优组合配方，使KL1菌株的活菌数量可达1010CFU/g以上，存活率达到85％以上。本发明制备的活菌制剂价格低廉，活菌含量高，可作为家禽饲料添加剂，具有鸡生长速度快、饲料用量省、少生病等特点。它不仅有降低鸡蛋胆固醇的效果，而且具有调节鸡的肠道菌群平衡作用，对鸡白痢有较好预防和治疗作用。

主权项

一种利用菌株KL1CGMCC No.1809为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)的产胆盐水解酶乳酸菌制备活菌制剂的方法，其特征在于：将干酪乳杆菌KL1扩大培养液按3％的接种量移种至2L改良MRS发酵培养基中，利用5L全自动发酵罐进行灭菌和高密度发酵，控制发酵温度40℃，发酵液pH6.4，搅拌转速55r/min，发酵时间20h，得到发酵液；将发酵液于4℃、5000r/min离心15min，收集得到菌泥；在600mL冻干瓶中按离心前发酵液1/10体积的量，加入马铃薯粉浆作为冻干保护基质，再加入3.5％谷氨酸钠、2.0％脱脂奶粉和1.5％甘油的冻干保护剂与收集的菌泥，混合均匀后，得到浓缩发酵剂；将每个冻干瓶装量为100mL的浓缩发酵剂于‑34℃预冻15h至完全冻结状态，得到预冻活菌制剂；利用美国产6L LABCONCO真空冷冻干燥机将预冻活菌制剂于‑55℃、真空度0.16mBar的条件下，冻干48h至完全干燥状态，得到干酪乳杆菌KL1冻干活菌制剂。